Jaké jsou normy v kvantitativní analýze hepatitidy C?

Share Tweet Pin it

Virus hepatitidy C je schopen reprodukovat v krvinkách a způsobit lymfoproliferativní onemocnění. Díky mnoha mutacím dochází k oslabení obranyschopnosti těla, objevují se genotypy a podtypy viru. Správná a včasná identifikace určitého typu závisí na účinnosti antivirové terapie. Nebezpečí nákazy je, že onemocnění je asymptomatická. Celkem 15% ze 100 může mít nevolnost a zvracení, ztrátu hmotnosti a horečku.

Definice viru hepatitidy C

Standardní normou hepatitidy C jsou velikosti od 40 do 60 nm, s většinou lipidů, poškození jater v důsledku akutního nebo chronického průběhu onemocnění. Hepatitida C, jmenovitě RNA z rodiny Togaviridae, je extrémně vytrvalá, přenášená transfuzí krve nebo použitím nesterilních předmětů, nesprávnou hygienou koupelnového příslušenství, Kvantitativní analýza umožňuje vyšetřit krev a identifikovat genetickou strukturu infikovaného viru.

U hepatitidy C a jejich genotypů, které mají být stanoveny, se provádí kvantitativní analýza. V závislosti na analyzátoru lze určit tři úrovně výskytu viru RNA.

Podtypy mohou produkovat různé modifikace, takže specifičnost a citlivost analyzátoru by měla být sto procent. Kromě zjišťování onemocnění u pacienta je nutné určit stupeň jeho závažnosti. Některé laboratoře nemají všechna data o definicích RNA viru, existuje možnost falešně pozitivní odpovědi.

Studie hepatitidy C bude přesnější při studiu těchto ukazatelů:

Při upozornění na výsledky těchto indikátorů a na celkovém stavu těla je zobrazen výsledek, který ukazuje stupeň infekce, formu a počet buněk hepatitidy C v krvi. To přispívá k hojení a účinnosti antivirové terapie.

Typy analýz pro hepatitidu C

Polydizovaná řetězová reakce (PCR) poskytuje představu o množství DNA částic v analýze pacienta a správně identifikuje příčinu infekce.

Infekční agenti se mohou projevit. Takové infekční onemocnění jater, jako je hepatitida C, je v současné době léčitelné, když je zjištěno včas. Je-li podezření na virus, je provedena PCR analýza.

Zatímco příznaky viru mohou být maskované po dlouhou dobu, osoba nemusí cítit nástup průběhu onemocnění. Ale při pečlivém vyšetření v 60-70% případů se detekuje hepatitida C, primární analýza, ve které je ELISA, pak diagnostika PCR. Analýza se provádí v určitých obdobích, aby se zjistila fáze onemocnění a aby se předepisovala vhodná léčba. Bez toho, bez použití všech těchto postupů, můžete roubovat z hepatitidy.

Kvalitativní a kvantitativní analýza

Existují kvalitativní a kvantitativní analýzy. Podstatou prvního je to, že určuje přítomnost infekce v krvi. A to znamená, že virus postihuje zdravé jaterní buňky. Pokud má pacient protilátky proti hepatitidě C, okamžitě se provede kvalitativní test. Norma, kterou by výsledek měl způsobit, je "nezjištěn v krvi". Při určování koncentrace viru existuje potřeba znalosti o citlivosti diagnostického systému, protože analýza může být provedena osobami podstupujícími antivirovou terapii. Citlivost analyzátoru by neměla být nižší než 50 IU / ml.

Když je zjištěn virus, provede se kvantitativní analýza, jinými slovy virové zátěže, které určuje koncentraci viru v krvi a závažnost onemocnění.

Vírová RNA, která je v určitém množství krve, je definována jako norma rychlostí 1 ml na 1 cm krychlovou. Po kvantifikaci virové zátěže lze posoudit stupeň infekce neinfikovaného prostředí. Jakmile koncentrace hepatitidy C stoupne v krvi, musí být životní prostředí izolováno.

V prvních fázích je důležité zjistit stupeň koncentrace hepatitidy, aby bylo možné určit rychlost rehabilitace. Pokud je míra hepatitidy C překročena o více než 800 tisíc IU / ml, je považována za příliš vysokou, s nárůstem na jeden milion - kritická. Je-li kvantitativní rozmezí menší než 400 tisíc IU / ml, má se za to, že kontaminace ostatních se objeví s menší pravděpodobností. Tento údaj jasně ukazuje, že hepatitida C v těle je přítomna ve velmi malých dávkách. Analýza nebyla schopna stanovit kvantitativní hodnotu RNA virových částic, takže je několikrát převedena na přesnost diagnózy.

Výsledky kvantitativní analýzy

Úkolem stanovení množství virové zátěže v pacientově krvi je určit míru infekce u ostatních.

Výsledky PCR analýzy:

  1. Pozitivní odpověď znamená, že v biologickém materiálu dochází k infekci. Analýza umožňuje určit přesný počet infikovaných buněk.
  2. Negativní odpověď naznačuje nepřítomnost infekce, která byla v těle pečlivě prohledávána.

Kvantitativní metoda pro hepatitidu C je přesná a informativní, prováděná na zařízeních s vysokou citlivostí. Dešifrování výsledků analýzy umožňuje zjistit, zda existuje infekce a její specifičnost, abyste viděli nejmenší počet infikovaných buněk na analyzátorech s vysokou citlivostí.

Falešně pozitivní nebo opačné výsledky analýzy poskytují zřídka, častěji se to děje ve studiích imunotestu.

Kvantitativní analýza PCR pro hepatitidu C

Existuje mnoho podtypů HCV, a proto není vždy možné vybrat efektivní antivirové léky a dosáhnout požadovaných výsledků léčby. Rozmanitost patogenů je způsobena jejich schopností změnit svou strukturu, tj. Mutovat. Výsledkem je, že imunita nemá čas na to, aby vytvořila silnou reakci proti patogennímu agens a léky jsou neúčinné.

Často je hepatitida diagnostikována ve fázi cirhózy, která předurčuje pozdější detekci onemocnění kvůli nedostatku klinických příznaků. Pouze laboratorním vyšetřením lze detekovat HCV v inkubačním období.

Kvantitativní analýza hepatitidy C umožňuje nejen zjištění přítomnosti patogenu v krvi, ale také výpočet koncentrace.

Doporučení pro přípravu analýzy

Specifická příprava pro laboratorní diagnostiku není nutná. Stačí, abyste dodrželi následující doporučení:

  1. kvantitativní analýza se provádí na prázdném žaludku s posledním jídlem - 8 hodin před vzorkem krve;
  2. po dva dny by měl být opuštěný alkohol a "těžké" pokrmy;
  3. Léčivé přípravky, které pacient užívá, mají zvláštní význam. Mohou ovlivnit výsledek studie, takže by o nich lékař měl vědět.

Také těžké fyzické námahy a fyzioterapeutické postupy v předvečer odběru vzorků krve nejsou žádoucí. Chcete-li dešifrovat kvantitativní analýzu hepatitidy C, se ukázalo jako spolehlivé, nezapomínejte na výše uvedené doporučení.

Často pacient obdrží výsledek analýzy za den. Cena testu pro stanovení koncentrace patogenu v krvi závisí na laboratoři a kvalitě činidel a může dosáhnout 4 000 rublů.

Laboratorní diagnostika hepatitidy C

Mezi primární diagnostické metody patří metoda ELISA nebo jiný enzymatický imunosorbentní test. Je určen k detekci specifických protilátek proti HCV. Jeho účinnost dosahuje 95%. Pokud přepis studie přinese pozitivní výsledek, je vhodné domnívat se, že přítomnost činidla v krvi.

Je třeba poznamenat, že polovina testovaných osob s "+" testem v průběhu další diagnostiky nezjistí virovou látku v krvi. ELISA v tomto případě indikuje předchozí kontakt s HCV v minulosti, což potvrzují cirkulující protilátky.

Přesnější studií je polymerázová řetězová reakce nebo PCR. Umožňuje stanovit koncentraci RNA patogenu v krvi. Po objevení genetické sady viru v biologickém materiálu doktor potvrzuje hepatitidu C.

PCR je určena pacientovi k ověření diagnózy. Umožňuje identifikovat RNA ve stadiu, kdy protilátky ještě nejsou k dispozici. Existuje několik typů genetických studií:

  1. kvantitativní analýza PCR pro hepatitidu C, která nejen potvrzuje přítomnost patogenu v krvi, ale také poskytuje informace o jeho koncentraci;
  2. kvalita - potvrzuje infekci;
  3. genotypizace - umožňuje určit genotyp patogenního činidla a vybrat nejúčinnější léky proti němu.

Polymerázová řetězová reakce

Jak již bylo řečeno, existuje několik typů laboratorního výzkumu:

  • kvalitativní analýza - indikuje přítomnost patogenního činidla v krvi. Tento typ diagnózy má určitou "úroveň odpovědi", takže není vždy spolehlivá. Aby bylo možné správně dešifrovat výsledky a získat skutečné ukazatele, doporučuje se pro studii použít testovací systém s citlivostí nejméně 50 IU / ml. Norma analýzy je "negativní odpověď" nebo "virus není detekován." To naznačuje nedostatek genetické sady patogenů v testovaném materiálu. Pokud byl výsledek pozitivní, je nutné provést další vyšetření pacienta;
  • kvantitativní analýza PCR pro hepatitidu C určuje virovou zátěž, tj. koncentraci patogenní látky v krvi. Výsledek studie ukazuje počet jednotek RNA ve fixním objemu biologické tekutiny;

Vírusová zátěž je počet infekční RNA v jednom mililitru krve výzkumníka. Jednotky měření jsou ME / ml, ale některé laboratoře určují "kopie / ml", přičemž uvádějí políčko standardní analýzy pro porovnání a vyhodnocení výsledků.

  • genotypizace. Vzhledem ke schopnosti patogenu měnit výběr účinných antivirových léků na terapii by měl být založen na jeho genotypu. Závisí to nejen na výsledku, ale také na délce trvání léčby. Takže HCV 1 hepatitida vyžaduje léky po dobu jednoho roku, ale pouze 60% případů vykazuje pozitivní dynamiku. Co se týče druhého a třetího genotypu, jsou méně odolné vůči působení antivirových činidel, a proto účinnost terapie přesahuje 85%. Při získání takového výsledku výzkumu - "virus není napsán", je vhodné domnívat se, že přítomnost činidla, která není rozpoznána standardními testovacími systémy.

Indikace pro analýzu

Výklad kvantitativní analýzy hepatitidy C je nezbytný pro:

  1. další vyšetření pacienta, kdy byly pomocí ELISA detekovány protilátky proti HCV;
  2. potvrzení diagnózy;
  3. stanovení virové zátěže v případě smíšené infekce, pokud je osoba infikována několika druhy patogenů;
  4. stanovení léčebné taktiky (výběr antivirových léků, jejich nahrazení nebo dokončení terapie);
  5. posoudit dynamiku progrese onemocnění, stejně jako účinnost léků;
  6. stanovení stupně patologie (akutní, chronická).

PCR má následující výhody:

  1. dobrá citlivost, díky čemuž je možné počítat i malé množství viru;
  2. stanovení samotného patogenu (RNA), ne antigeny;
  3. specifičnost metody - vytvoření specifického druhu patogenního činidla;
  4. rychlost získávání výsledků, protože pro analýzu nevyžaduje kultivaci plodin na živném médiu. Odpověď je připravena za 5 hodin;
  5. univerzálnost - umožňuje identifikaci genetické sady různých patogenů, jak RNA, tak DNA (hepatitida B);
  6. detekce latentní infekce.

Laboratorní test pomáhá potvrdit diagnózu a je nedílnou součástí komplexního vyšetření (analýza klinických příznaků, výsledků ELISA a biochemie).

Navíc PCR je široce používán v alergologii, genetice, stejně jako při zjišťování otcovství.

Dekódování kvantitativní analýzy viru hepatitidy C

Hodnocení výsledků laboratorní diagnostiky provádí lékař porovnáním získaných údajů s normou.

Interpretace analýzy hepatitidy C

Onemocnění jater v moderním světě je velmi relevantní, protože toto tělo je vystaveno negativnímu vlivu z prostředí, špatného životního stylu atd.

Existují však takové nemoci, s nimiž se může každý nakazit, a předvídat, zda se to stane nebo ne, je velmi obtížné. To například virové hepatitidy, které jsou přenášeny převážně krví a zpočátku se necítí. Zejména mluvíme o C-hepatitidě.

Skutečnost, že virus původně neposkytuje zvláštní příznaky, vážně komplikuje diagnózu, nicméně existují poměrně účinné a rozmanité studie, které pomohou určit problém.

Hlavním principem detekce HCV je interpretace testů na hepatitidu C, tj. Porovnání určitých ukazatelů s normami.

Podmínky pro příjem směru

Diagnostika hepatitidy C se provádí u lidí z různých důvodů, zejména:

  • podezření na hepatitidu;
  • osoba je ohrožena;
  • Diagnostika je povinná vzhledem ke specifikaci práce;
  • žen během těhotenství nebo při plánování.

Existuje několik druhů diagnostiky: některé jsou povrchové studie, jiné jsou hluboké a vysoce přesné, jehož principem je studium minimálních odchylek normálních indexů nebo detekce specifických látek.

Pro detekci viru hepatitidy C v lidské krvi se používají 3 typy diagnostických metod:

  1. Imunoenzymová analýza (ELISA). Provádí se v laboratoři, princip je stanovení protilátek proti hepatitidě, zejména: IgG, IgM. Tato diagnóza neposkytuje podrobnou odpověď: osoba je nemocná nebo ne, protože jedna třetina nosičů nevykazuje protilátky. K tomu dochází z důvodu intervalu mezi vstupem do těla viru a produkcí protilátek proti němu, takže je to pochybná a velmi povrchní analýza.
  2. Rekombinantní analýza imunoblotů. Provádí se pouze k potvrzení laboratorního testu, pokud je výsledek pozitivní, pak je osoba nositelem onemocnění nebo byla nosičem. Protilátky proti viru se neodstraní ihned po úspěšné léčbě hepatitidy. Kromě toho může být kvůli některým vnějším faktorům možný falešný výsledek.
  3. Analýza polymerázy (PCR). Jaká je nejpřesnější metoda pro stanovení hepatitidy? - jednoznačně PCR. Je to nejmladší a nejpřesnější metoda diagnostiky. Je to PCR, která může poskytnout podrobnou odpověď na průběh onemocnění, umožňuje stanovit koncentraci viru v krvi a jeho genotypu (je zde 6). Princip je založen na detekci viru DNP / RNA v krevní plazmě. Tato metoda překonává všechny výše uvedené údaje o kvalitě diagnózy: před klinickými projevy hepatitidy by měla předcházet minimálně 20, maximálně 120 dní, před vznikem protilátek - 10-12 týdnů po proniknutí do viru. Ale detekce patogenu v krvi nemůže být v žádném případě falešná, jediné omezení: od okamžiku infekce musí trvat 5 dní, protože v objemu viru nemusí být ještě virus.

Pro přesné stanovení diagnózy se provádí PCR, existují tři poddruhy:

  1. Kvalitativní analýza. S jeho pomocí určit pouze přítomnost viru.
  2. Kvantitativní diagnostika. Slouží k určení přesného obsahu viru v objemu krve; při testování účinnosti.
  3. Genotypická diagnóza. Používá se k určení genotypu a následně fenotypu viru. Znalost genotypu patogenu je pro terapii mimořádně důležitá, protože v závislosti na charakteristikách se změní průběh a koncentrace léků.

Pomocné testy

V diagnostických metodách hrají důležitou roli další analýzy, které někdy úplně mění charakteristiku léčby a někdy dokonce mohou poukázat na jinou diagnózu.

Biochemická analýza

Aby bylo možné řádně předepisovat léčbu a ne zhoršit obraz, je třeba spolehlivě určit stupeň poškození jater, pro toto použití biochemický krevní test, který bude vykazovat odchylky od normy v jeho složení.

Změny charakterizují vlastnosti poškození jaterní tkáně, to jest: stupeň onemocnění, závažnost fibrózy a zhoršená funkce jater. Biochemická metoda ukazuje skutečné údaje o obsahu bilirubin v krvi, protein, močovina, kreatinin, cukr, AST a ALT, alkalická fosfatóza, železo a gama-glutamyltranspeptidáza. Kromě toho bude stanoven lipidový profil a kvalita metabolismu bílkovin.

Diagnostika fibróz

Fibróza je léze jaterní tkáně, povaha průběhu závisí na jeho stupni, takže je velmi důležitá diagnóza závažnosti poškození tkáně. Soudě podle vzorce průběhu onemocnění doktor může posoudit naléhavost léčby: pokud je situace nekritická, může být dokonce odložena tak, aby nedocházelo k tomu, že léky poškozují jiné orgány.

Další testy

Někdy, s cílem získat úplný obraz o nemoci, ultrazvuk břišní dutiny a štítné žlázy, běžný test krve. Lidé pokročilého věku jsou diagnostikováni kardiovaskulárním a trávicím systémem, plicemi.

Pokud neexistuje možnost provádět standardní ELISA / PCR testy, procházejí specificky: analýza slin a jiných tekutin pro přítomnost patogenů.

Indikátory

Technologie pro diagnostiku hepatitidy C jsou na vysoké úrovni a často nedávají falešné výsledky.

Navzdory tomu není možné poskytnout 100% záruku přesnosti: jsou možné falešně pozitivní výsledky.

Nesprávně odpovězte na krevní test v případě nesouladu s pravidly analýzy nebo s některými jinými faktory. Hlavní důvody pro zkreslení výsledků:

  • některé specifické infekce, které reagují s testovacími látkami a test je pozitivní;
  • studie během těhotenství;
  • přítomnost vedlejších produktů v těle;
  • porušení imunitního systému;
  • porušení pravidel odběru vzorků krve.

Interpretace testů na hepatitidu C

Interpretaci testů na hepatitidu provádí zkušený odborník, který určí odchylky od normy každého z indikátorů a zapíše závěr o pravděpodobnosti hepatitidy.

V diagnostice EIA metod detekce protilátek v krvi bude mluvit neomylně, že lidské tělo je nebo byl virus hepatitidy B: pacient je nemocný nyní, nebo trpěl nemocí a antigeny neměl čas odstoupit od těla. To by mělo být zapamatováno protilátky nepracují hned - musí uplynout určitý čas, tak, aby taková analýza dala spolehlivé výsledky, takže pokud je to nutné, potřebujete opětovně darovat krev pro testování.

Pokud PCR diagnostika dal kladnou odpověď, s pravděpodobností 99% v těle je původcem. V tomto případě je nutné určit závažnost a provádět genotypových RNA ke korekci kurzu a poté zahájit léčbu, aby urychleně hepatitidy nestal chronické. Údaje polymerázových analýz jsou považovány za velmi přesné, protože mohou detekovat až 1 zástupce viru v buňce. Není-li míra polymerázové řetězové reakce narušena, pak je odpověď záporná a neměli byste se obávat.

Při stanovení hepatitidy C se používá kvantitativní stanovení bilirubinu, ALT a AST. Jejich obsah také indikuje závažnost a závažnost onemocnění.

Obecná tabulka indikátorů látek v krvi, která může indikovat C-hepatitidu po biochemické analýze:

Hepatitida C. Kvantitativní analýza. Norma, interpretace výsledků

Hepatitida C. Co je pro člověka nebezpečné. Jak diagnostikovat infekci. Co potřebujete k analýze

Virus hepatitidy C. Je nebezpečný. Jak ji identifikovat včas.

Virus hepatitidy C nebo HCV je infekční onemocnění, které nese molekulu ribonukleové kyseliny.

Tento typ viru je schopen snadno přizpůsobit se podmínkám v oblasti životního prostředí a jsou často přeměněna na jinou formu nemoci, takže naše tělo je obranný systém tak těžké se s tím vyrovnat. Šest hlavních genetických typů infekce a desítky podtypů je klasifikováno. V našem regionu se často vyskytují první tři typy viru.

Podle statistik se vyskytuje pouze čtvrtina případů onemocnění HCV bez komplikací, ve všech ostatních případech normou, pokud se infekce vyvinou do chronického procesu, který nepříznivě ovlivňuje vnitřní orgány. Takže hepatitida může být komplikována jaterní fibrózou - procesem nahrazení jaterních buněk. Další komplikace se objevují prostřednictvím řetězové reakce: v důsledku fibrózy se vyskytují rakovinné nádory, onemocnění jater se rozvíjí do cirhózy.

Ve většině případů infekce proniká do lidského těla přes krevní cévy. Diagnostikujte virus hepatitidy C několika způsoby. Monitorujte koncentraci protilátek proti HCV. Infekce se nevyskytla, kdyby se její protilátky v pacientově krvi nenacházely. V opačném případě je virus zkoumán hlouběji, provede se další test - PCR. Pouze tento způsob umožňuje identifikaci virové RNA po pouze jeden a půl týdne po infekci, v době, kdy tělo nemá čas zahájit produkci protilátek proti infekci, a účinky znečištění se neprojeví v obecném stavu, a to zejména v výsledky dalších studií, například BAC a biopsie.

Analýza PCR na RNA: kvantitativní a kvalitativní. Vysvětlení výsledků

Vírusová zátěž nebo kvantitativní PCR analýza - stanovení míry infekce v plazmě. Ve skutečnosti je kvantitativní analýzou počet molekul infekční ribonukleové kyseliny v jednom mililitru krve.

P-DNA je rychlý, levný a nejpřesnější kvantitativní způsob detekce viru založené na detekci buněk rozvětvené DNA. Tento test nemusí identifikovat infekci přítomnou v těle kvůli špatné citlivosti - asi 450 IU / ml.

Kvantitativní metoda transkripční amplifikace umožňuje nalézt RNA buňky v těle. Tato metoda se objevila poměrně nedávno, je levná a je dostatečně účinným diagnostickým nástrojem. Citlivost testu je přibližně 10 IU / ml.

Pokusme se vysvětlit výsledky testů. Níže je tabulka a přepis.

Studie PCR pro hepatitidu C: typy, indikace, přepis

Virová hepatitida C je vážné onemocnění, které se objevuje při poškození jater. U osmdesáti procent pacientů přechází do chronické formy. Vírus se množí v jaterních buňkách - hepatocytech - a způsobuje jejich smrt. Mrtvé tkáně jsou nahrazeny ložisky pojivové tkáně, fibróza se vyvíjí.

S rozvojem fibrózy jater, je schopen plnit svou funkci, začíná cirhóza, což je nebezpečné pro jeho komplikací: zvyšující se tlak v portální žíle, gastrointestinální krvácení, poruchy srážlivosti krve, mentální změny kvůli poškození mozku jádra toxických produktů.

Příčinou onemocnění je infekce virem z rodiny Flaviviridae, což je typ viru RNA. To znamená, že genetický materiál, kterým jsou syntetizovány proteiny patogenu, je kódován molekulou ribonukleové kyseliny. Infekce nastává skrze krev, sexuálně a od těhotné ženy až po plod. Bohužel mezi infekcí a počátkem produkce protilátek může proběhnout poměrně velká doba - od dvou týdnů do šesti měsíců. To neumožňuje stanovení infekce metodou enzymového imunoanalýzy a zahájením léčby v časných stádiích.

Co je analýza PCR?

PCR je metoda molekulární analýzy, která umožňuje detekci genetického materiálu patogenu již v prvním týdnu po infekci za použití polymerázové řetězové reakce. Studie má vysokou specificitu, přesnost a umožňuje nejen stanovit přítomnost nebo nepřítomnost viru, ale i jeho koncentraci a genotyp.

Pro studii si vezměte pacientovu krev, v níž se může potenciálně nalézt RNA viru. Krev se přidá primerů - uměle syntetizované krátké délce části požadovaného genu a RNA polymerázu - speciální enzym, který násobí množství genetického materiálu patogenu. Pomocí speciálního přístroje se provádí několik cyklů vytápění a chlazení. Materiál je pak analyzován a porovnán se známými virovými geny, na základě kterých se dospěje k závěru o přítomnosti nebo nepřítomnosti infekce.

Typy PCR analýzy pro hepatitidu C

Existují tři typy analýzy PCR:

  1. Kvalitativní analýza PCR. První fáze studie. Umožňuje vám identifikovat genetický materiál viru v krvi.

  • Kvantitativní analýza PCR. Umožňuje určení virové zátěže - koncentrace genetického materiálu patogenu v jednom mililitru krve. Tato studie se provádí před zahájením léčby a poté v první, čtvrté, dvanácté a (pokud je kurz dlouhý) ve dvacátém čtvrtém týdnu léčby, aby se vyhodnotila jeho účinnost.

  • Genotypizace. Příčinný faktor hepatitidy C se často a rychle mění. Na planetě bylo nalezeno sedm variant genotypu tohoto viru. V Rusku jsou společné první, druhé a třetí typy. Každý z genotypů má jinou rezistenci k terapii, například účinnost léčby prvního typu je šedesát procent a pro druhý a třetí dosahuje osmdesát pět. Proto, aby bylo možné vybrat vhodná léčiva a předepsat dostatečnou dobu trvání léčby, je nutné přesně určit, jaký typ viru je pacient infikován.
  • Indikace pro analýzu PCR pro hepatitidu C

    Studie PCR je předepsána v následujících případech:

    • kontakt s nemocnou, která by mohla vést k infekci;
    • pozitivní imunoanalýza spojená s enzymem;
    • příznaky jaterní cirhózy: změny velikosti jater, zvětšení sleziny, výskyt podkožního žilního plexu na břiše;
    • výskyt příznaků poškození jater: bolesti na pravé straně břicha, zožnění kůže;
    • zvýšená aktivita ALT a AST v biochemické analýze krve;
    • před zahájením léčby k určení virové zátěže;
    • sledovat účinnost antivirové léčby;
    • po dokončení léčby k monitorování relapsu;
    • v přítomnosti diagnostikované hepatitidy B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater.

    Dekódování studie PCR pro hepatitidu C

    Dekódování analýzy PCR a enzymového imunoanalýzy pro hepatitidu C by mělo být řešeno specialistou na hepatologii nebo na infekční nemoci. Analýza výsledků PCR je nezbytná v kombinaci s biochemickým vyšetřením krve, biopsií a ultrazvukem. Pouze kvalifikovaný lékař bude schopen analyzovat výsledky studií a na základě nich předepsat správnou léčbu.

    Dekódování kvalitativní analýzy.

    Genetický materiál patogenu byl nalezen v analyzovaném biologickém materiálu. Infekce je potvrzena.

    Neexistuje žádná infekce nebo množství RNA patogenu je pod hranicí citlivosti.

    Dekódování kvantitativní analýzy.

    Normální postava pro zdravé lidi. To znamená, že v testovaném materiálu není přítomna žádná RNA hepatitidy C nebo její koncentrace je pod prahem citlivosti studie.

    Koncentrace RNA je nižší než rozsah kvantifikace. Takové výsledky jsou interpretovány velmi opatrně, korelují je s údaji jiných studií, často provádějí druhou studii.

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za nízkou. Obvykle snížení množství viru znamená, že terapie je úspěšná.

    Více než 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za vysokou.

    Více než 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Množství RNA je nad horní hranicí rozsahu kvantifikace. Závěry o stupni virové zátěže s tímto výsledkem nejsou možné. Obvykle se v takových případech opakuje test s ředěním vzorku krve.

    Dekódování genotypizace.

    Byla detekována RNA specifického genotypu

    V biomateriálu je detekován virus hepatitidy C specifického genotypu a podtypu. Výsledek je kódován římskými číslicemi a latinkou, například - 1a, 2b. Existuje sedm genotypů a šedesát sedm podtypů, ale v Rusku existují pouze tři první typy.

    RNA virové hepatitidy C byla detekována

    V krvi se RNA nachází v Rusku vzácným genotypem, který nelze přičíst prvnímu, druhému nebo třetímu typu. Je zapotřebí více výzkumu.

    Tento výsledek naznačuje, že pacient je zdravý, nebo že úroveň RNA patogenu je příliš malá.

    Situace je možná, pokud je analýza PCR pro hepatitidu C negativní a enzymový imunotest detekuje protilátky proti viru. To znamená, že pacient měl v akutní formě hepatitidu C a uzdravil se. Přibližně dvacet případů infekce vede k spontánnímu vyléčení, pokud tělo pacienta vykazuje dostatečnou odolnost proti infekci.

    Navzdory skutečnosti, že PCR je velmi přesná analýza, její výsledky mohou být zkresleny v následujících situacích:

    • krev byla transportována do laboratoře za nevhodných podmínek, teplotní režim byl porušen;
    • byl vzorek biomateriálu kontaminován;
    • v krvi byly zbytky stop heparinu a dalších antikoagulancií;
    • Ve zkoumané látce byly inhibitory - látky, které zpomalují nebo zastavují polymerázovou řetězovou reakci.

    Výhody PCR v porovnání s jinými metodami

    1. Diagnóza v počátečních fázích. PCR detekuje genetický materiál vyvolávajícího onemocnění. Pomocí analýzy imunofluorescence lze stanovit pouze imunoglobuliny - látky, které organismus produkuje v reakci na infekci. V případě infekce způsobené hepatitidou C může být interval mezi infekcí a nástupem imunitní odpovědi několik týdnů a měsíců, kdy bude ELISA neúčinná. PCR poskytne odpověď už v prvním týdnu po infekci.

  • Nízká pravděpodobnost chyby. Ve studovaném materiálu se určuje genetický materiál, který je charakteristický pouze pro jeden typ patogenů. To vám umožňuje vyloučit falešné výsledky. Při ELISA jsou možné chyby, protože stejný druh protilátek lze uvolnit proti různým virům - takové protilátky se nazývají zkřížené reakce.

  • Vysoká citlivost. PCR může detekovat RNA patogenu i v minimálních množstvích. To umožňuje identifikovat skryté infekce.
  • Jak se připravit na dodávku krve pro výzkum PCR

    Pro analýzu PCR se pro hepatitidu C sbírá venózní krev. Obvykle se z pacientovy žíly najednou odeberou dvě části krve: první se odešle pro PCR a druhá pro ELISA. To se provádí, aby bylo možné přesněji posoudit, jak špatně je pacient infikován tímto virem a jak proti němu bojuje imunita.

    Obvykle jsou pro pacienta vyžadována následující pravidla:

    • vyšetření krve se odebere ráno;
    • přestávka mezi posledním jídlem a dodávkou krve by měla být osm až deset hodin;
    • dva nebo tři dny před analýzou se musíte vzdát smažených a mastných potravin a alkoholu;
    • po dobu čtyřiadvaceti hodin před analýzou by se pacient měl vyhnout fyzické námaze: nemají váhy, nechodí do tělocvičny nebo do bazénu.

    Co ukazuje kvantitativní analýzu hepatitidy C?

    Diagnostikování jaterních onemocnění vnějšími příznaky nebo bolesti je obtížné.

    To je způsobeno zvláštností orgánu, který prakticky nemá nervové zakončení a trpí různými onemocněními.

    Takže věci a hepatitidy - v počátečních fázích, mohou samy o sobě nerozlišují, jen s rozvojem onemocnění se může objevit žloutenka, nárůst teploty a cítit mírné bolesti v oblasti jater.

    Pro správnou diagnózu a výběr způsobu léčby může lékař předepsat řadu testů: z krevní testy na protilátky proti ultrazvuku jater.

    Ale samotná hepatitida je diagnostikována krví, všechny další studie jsou primárně navrženy tak, aby pochopily, jak moc virus poškodilo játra.

    Na zasedání vám může lékař přiřadit kvantitativní analýzu hepatitidy C. V tomto článku budeme diskutovat o tom, proč je přidělen, jak prochází, možné výsledky a jejich dekódování. Na konci materiálu najdete přibližnou cenu za dárcovství krve pro analýzu.

    Co to je?

    Taková studie je vedena k pochopení, kolik molekul viru je v těle

    Kvantitativní analýza je krevní test na přítomnost hepatitidy. Ukazuje, jak jsou buňky v těle infikovány virem, zda se onemocnění vyvíjí nebo ne.

    To znamená, že ukazuje koncentraci nebo zátěž RNA hepatitidy C v lidském těle v jednotkách na mililiter nebo na 1 kubický centimetr krve.

    Naproti tomu kvalitativní analýza pomáhá určit pouze přítomnost RNA viru.

    V jakých případech to dělají?

    Studie se provádí souběžně s kvalitativní analýzou poté, co krevní test na přítomnost protilátek proti hepatitidě (EIA) ukázal pozitivní výsledek. Udělejte to několikrát:

    • s počáteční diagnózou hepatitidy C před rozhodnutím o volbě léčby;
    • během léčby onemocnění (obvykle 1, 4, 12 a 24 týdnů) k určení klinického obrazu výsledků léčby;
    • po léčbě k určení relapsu.

    Význam

    Kvantitativní analýza je jedním z hlavních typů výzkumu, který lékař opírá při volbě metod léčby hepatitidy. Slouží k:

    1. Abychom pochopili, kolik je organismus infikován tímto virem, kvantitativní přítomnost antigenů v těle.
    2. Účinnost zvolené terapie.
    3. Vyberte způsob léčby a proveďte předpověď.

    Zároveň nám tato analýza neumožňuje posoudit stupeň poškození jater nebo závažnost průběhu onemocnění organismu. K tomu použijte jiné studie, například biochemický krevní test, elastometrii, biopsii a další.

    Způsob a podmínky implementace

    Vzorek krve z žíly se obvykle vyskytuje ráno. Vzhledem k použití polymerázové řetězové reakce (PCR) lze tuto studii nazvat jednou z nejpřesnějších v oblasti definice viru.

    Bez použití vědecké terminologie může být proces popsán následovně: biomateriál je smíchán s určitými enzymy, které umožňují kopírování enzymů RNA nebo DNA viru. Až do té doby, dokud tyto molekuly dostatečně nezjišťují patogen.

    Lhůta pro vydání výsledků se liší podle zdravotnického zařízení a jeho pracovní zátěže. Výsledky lze shrnout 4-5 hodin po zahájení studie. Proto může být výsledek podán již následující den po odběru krve.

    Čím je moderní laboratoř, zařízení a reagencie, tím přesnější a rychlejší jsou výsledky

    Příprava na darování krve

    Dodávka biomateriálu pro analýzu pochází z žíly. Neexistují žádné speciální doporučení pro přípravu, a proto jsou důležité standardní pravidla, která by měla být dodržována před dárcovskou krví pro výzkum:

    1. Udělejte to lépe ráno na prázdném žaludku (poslední jídlo by nemělo být dříve než 8-12 hodin před porodem).
    2. Není-li odběr vzorků krve ráno, pak pro snídani nemůžete jíst tučné pokrmy (je třeba také dodržovat interval 8-12 hodin).
    3. Vynechte alkohol, tučné a smažené potraviny 1-2 dny před testem.
    4. Nepřijďte k analýze den po slavnostním svátku.
    5. Kouření je zakázáno nejméně hodinu před dodáním biomateriálu.
    6. Než začnete krvácet, měli byste sedět v klidu 10-15 minut, abyste uvolnili tělo, vyloučili vliv na výsledky stresu, fyzické i psychologické.
    7. Pokud užíváte jakékoli léky nebo podobné přípravky, může být test proveden 10 až 14 dní po posledním podání. (tato skutečnost by měla být hlášena lékaři, možná by udělal jiný stav).
    8. Biomateriál se nevzdává okamžitě po rektálním vyšetření, radiografii a fyzioterapeutických postupech.
    9. Počáteční a reanalýza se nejlépe provádí ve stejné laboratoři (zdravotnická zařízení), takže mohou používat různé činidla, vybavení, měrné jednotky a přesnost.

    Vysvětlení výsledků

    V závislosti na koncentraci viru v těle se provádějí různé závěry týkající se léčby onemocnění

    Dále určete účinnost léčby. Pokud je druhá analýza zatížení viru menší než 8 * 105 IU / ml, pak lze argumentovat, že terapie je správným směrem a v boji proti nemoci je úspěch.

    Pokud kvantitativní přítomnost RNA viru klesne třetí den léčby, může být řeč o rané virologické odpovědi. Ale pravděpodobné je to na úrovni 85%.

    Pokud je však indikátor více 8 * 105 IU / ml, pak lékař by měl přezkoumat plán léčby a vybrat vhodnější. Proto čím vyšší je hladina, tím silnější je virus v těle a tím horší prognóza.

    Výsledky v různých laboratořích mohou být uvedeny v IU / ml nebo v kopii na ml. Přepočítací koeficient je jiný (v rozmezí od 1 do 5) a závisí na metodě použité k určení kvantitativního ukazatele. V praxi je všeobecně uznáváno, že 1 IU / ml = 4 kopie na ml.

    Jsou nějaké chyby?

    Bohužel diagnóza může být chybná. To je však pouze tehdy, pokud zdravotnická zařízení používá zastaralé vybavení, nevhodné reagencie, pak jsou přítomny některé špatné výsledky.

    Takové faktory mohou také ovlivnit:

    • přítomnost heparinu nebo inhibitorů v krvi;
    • kontaminace biomateriálu v průběhu výzkumu.

    Při správné přípravě na analýzu v moderních léčebnách se tato pravděpodobnost blíží nule.

    Koho kontaktovat a jaké jsou náklady

    Pokud máte podezření na hepatitidu, měli byste se obrátit na virologa, odborníka na infekční onemocnění nebo na hepatologa. Pokud je to nutné, zašlou vám další lékaře.

    Cena těchto studií může být odlišná. Kromě toho závisí na okrajích samotných diagnostických center a na složitosti práce, vybavení atd.

    V moderních laboratořích je možné 2900-3000 rublů (1350-1400 UAH) bez nákladů na odběr krve z žíly. Tam jsou také kliniky, které nabízejí analýzu od 300 rublů (asi 140 UAH).

    Přibližná podoba výsledků analýzy vypadá takto

    Závěr

    Abychom shrnuli výsledky článku, nastíníme hlavní body:

    1. Kvantitativní analýza pro hepatitidu C vyžaduje studii krve za přítomnost buněk viru s uvedením jeho zátěže.
    2. Ukazatel se měří v jednotkách na mililitr nebo na 1 kubický centimetr krve.
    3. Analýza se provádí jak v počáteční diagnóze, tak v následném sledování, aby se zjistila účinnost zvolené terapie nebo se zjistila relaps.
    4. Nelze mluvit o úrovni zdraví jater, zhoršené v důsledku infekci virem hepatitidy C v souvislosti s tímto výzkumem může být provedena: chemie krve, elastometry, biopsii a další.
    5. V podstatě se darování krve odehrává ráno, biomateriál se odebírá z žíly.
    6. Doporučuje se, abyste před provedením testu nekouřili, nepijte alkohol, tučné nebo smažené potraviny. Zároveň je vítán soulad s pravidly přípravy pro výzkum uvedený v článku.
    7. Pokud by analýza ukázala, že plazmatické zatížení viru je více 600 IU / ml, pak došlo k infekci a rozvoji hepatitidy C v těle.
    8. V případě, že opakované analýzy jsou větší 8 * 105 IU / ml, lékař by měl přezkoumat schéma a metody léčby. To naznačuje nedostatečnou účinnost zvolené terapie.
    9. Pravděpodobnost chyb v kvantitativním výzkumu je velmi malá. Je však možné kontaminovat biomateriál, přítomnost inhibitorů nebo heparinu v něm, což vede k nepravdivosti analýzy.
    10. Nižší prahová hodnota nákladů na řízení - 300 rublů (bez ceny vzorků krve) a roste v závislosti na použitých činidlech, vybavení v laboratoři a dalších faktorech.

    №350SV, Kvantifikace HCV RNA pomocí PCR [virová zátěž] (HCV virovou nálož RNA viru hepatitidy C (kvantitativní test)) v séru

    Stanovení RNA viru hepatitidy C v séru polymerázovou řetězovou reakcí (PCR) s detekcí v reálném čase.

    detekovatelný fragment je specifickou oblastí RNA viru hepatitidy C; specificita stanovení je 100%. Citlivost stanovení je 60 IU / ml. Lineární rozsah: 10 ^ 2 - 1 x 10 ^ 8 IU / ml.

    • Pozitivní kvalitativní test na přítomnost RNA viru hepatitidy C v krevním séru.
    • Stanovení virové zátěže.
    • Určení taktiky léčby pacientů.
    • Přesné vyhodnocení účinnosti léčby.

    Interpretace výsledků výzkumu obsahuje informace pro ošetřujícího lékaře a není diagnózou. Informace z této části nelze použít pro vlastní diagnostiku a samoléčbu. Správnou diagnózu provádí lékař, a to jak s použitím výsledků tohoto průzkumu, tak s potřebnými informacemi z jiných zdrojů: anamnéza, výsledky dalších průzkumů atd.

    Jednotky míry: množství RNA viru hepatitidy C, vyjádřené v IU / ml. Pro přepočet v kopii / ml je třeba použít poměr IU = 2,5 kopií HCV RNA.

    • Základní informace
    • Příklady výsledků

    * termín nezahrnuje den užívání biomateriálu

    PCR s detekcí v reálném čase.

    příklady výsledků na formuláři *

    * Upozorňujeme na skutečnost, že při objednávání několika studií se na jednom formuláři projeví několik výsledků testů.

    V této sekci si můžete zjistit, kolik provádění výzkumu ve vašem městě, přečtěte si popis testu a interpretace tabulce výsledků. Volba, kde mají být testovány, „Kvantifikace HCV RNA pomocí PCR [virová zátěž] (HCV virovou nálož RNA viru hepatitidy C (kvantitativní test)) v séru“ v Moskvě a dalších ruských městech, se na paměti, že při analýze cen, náklady biomaterial přičemž postupy, metody a načasování výzkumu v krajských zdravotnických úřadů se mohou lišit.

    Medinfo.club

    Portál o játrech

    Kvantitativní analýza HCV a její interpretace

    Hepatitida C je onemocnění, které se může reprodukovat ve zdravých jaterních buňkách a vyvolat proliferační nemoci. V moderním světě, kdy virus hepatitidy prošel určitou mutací, je ohrožen lidský imunitní systém ve srovnání s infekcí, je zanedbatelný. Je také třeba poznamenat, že ne všichni pacienti budou mít první známky onemocnění, a to zejména v raných stádiích.

    RNA analýza viru hepatitidy C je kvantitativní studie, jejíž normou je mírné množství přítomnosti virových buněk v krvi pacienta. Podle statistik je asi 31% pacientů zcela vyléčeno z této nemoci, pokud je v počáteční fázi.

    Lékaři v lékařské praxi konstatují, že 4 miliony infikovaných symptomů a prvních příznaků se vůbec neobjevují, přestože zanedbatelná forma hepatitidy může vést k cirhóze jater nebo rakoviny.

    V současné době se v průběhu "krevní transfúze" vyšetří tato krev na přítomnost viru hepatitidy C, protože toto onemocnění se přenáší krví dárce.

    K dnešnímu dni svět již vyvinul drogy z hepatitidy C s účinností téměř 100%. Moderní farmaceutický průmysl vytvořil léky, které prakticky nemají žádné vedlejší účinky. Mnozí pacienti dostanou první výsledky ve formě zmírnění symptomů a snížení virální zátěže po týdnu užívání. Přečtěte si více o přípravcích z hepatitidy z indické výroby v našem samostatném článku.

    Na trhu společností pro přepravu indické medicíny pro hepatitidu C "Sofosbuvir Express" se osvědčil. Tato společnost úspěšně pomáhá lidem se zotavit z onemocnění více než 2 roky. Komentáře a videa spokojených pacientů naleznete zde. Představují více než 4 000 lidí, kteří se zotavili kvůli zakoupeným lékům. Nedělejte své zdraví v dlouhém boxu, navštivte www.sofosbuvir-express.com nebo zavolejte na číslo 8-800-200-59-21

    Druhy studií PCR

    PCR (polymerázová řetězová reakce) je nejmodernější a nejúčinnější metodou pro studium genu viru a jeho schopností. Tato diagnostika může vyvolat různé nemoci a určit její další mutaci v těle pacienta.

    Analýza se provádí odebráním krve, která se potom umístí do speciálních činidel, ve kterých dochází k klonování buněk.

    Dvě buňky se vyrábějí z jedné buňky a tak dále. V důsledku toho se objevují stovky DNA, díky nimž je možné diagnostikovat patogen a identifikovat virus v počáteční fázi.

    Proto je PCR rozdělena do několika typů:

    • kvalitativní analýza - rozpoznává geny infekce v krvi. Pokud je pacient potvrzen pro kvalitativní analýzu, měla by být provedena kvantitativní analýza k určení stupně infekce. V důsledku této diagnostiky odborníci píšou "zjištěné / neidentifikované". "Zjistil" - označuje, že onemocnění je přítomno v těle a jeho RNA je již zjištěna. "Nezjištěno" znamená, že ve vzorku není žádný gen viru, tj. Neexistuje hepatitida RNA. Lékaři nicméně doporučují provést druhou studii po 10 dnech.
    • kvantitativní analýza - určuje množství genetického materiálu infekce v krvi. Tato diagnostika pomáhá stanovit závažnost onemocnění a celou klinickou anamnézu. V důsledku takové analýzy lze zapsat pouze "Pozitivní / Negativní / Neplatný". "Pozitivní" - zobrazuje infekční zatížení. Lékaři používají tuto metodu diagnostiky onemocnění k určení účinnosti léčby ve 4, 12, 16 a 24 týdnech onemocnění. Pokud je skóre viru v rozmezí 8x10t IU / ml, pak je léčba účinná, pokud jsou indikátory vyšší, pak ne. "Negativní" - nebyl nalezen gen infekce. "Neplatná" - stane se to, pokud je gen viru nalezen v kvalitě, ale není kvantitativní analýzou odhalen. Existuje podobná jestliže je infekce pod úrovní.

    Rozdíly v kvalitativních a kvantitativních analýzách

    Virus hepatitidy C - je diagnostikován především kvantitativní analýzou, jejíž dekódování je nezbytné pro správnou interpretaci onemocnění. Ale přes to, že kvalitativní a kvantitativní metoda diagnostiky mají své odlišnosti, jako je role a úkolů k výzkumu - kvalitativní - potvrdí přítomnost infekce po objevení viru protilátek a kvantitativní - sekundární způsob vyvrátit nebo potvrzení onemocnění, aby správné a pouze diagnózu.

    Vysvětlení kvantitativního výzkumu

    Po diagnóze mohou výsledek interpretovat pouze lékaři, protože by se neměli uvádět v číslech, ale slovy. Podle statistik je kvantitativní PCR nejcitlivější analýzou. Za účelem zjištění, zda je přítomna v těle virus, je nutné pochopit a vědět, že kvantitativní analýza pro hepatitidu C, je dešifrován pomocí digitálního značení (standard) infekce:

    Pomocí diagnostiky PCR

    Polymerázová řetězová reakce (PCR) v molekulární biologii se nazývá experimentální metoda detekce virů. Umožňuje významně zvýšit koncentraci určitých fragmentů nukleové kyseliny (DNA) ve vzorcích biologického materiálu, což umožňuje určit (rozpoznat) a počítat je.

    Analýza se provádí následovně. Genetický materiál (vzorek krve), který potenciálně může obsahovat požadovaný gen, se zavede do zkumavky. Tam jsou také umístěny primery - chemicky syntetizované malé délky požadovaného genu.

    Do nádoby je také přidána DNA nebo RNA polymeráza, která je schopna vytvořit řetězec nukleové kyseliny, který je zcela identický s původním řetězcem. Sada čtyř volných nukleotidů, speciální stavební materiál pro RNA nebo DNA, z nichž jedna obsahuje radioaktivní částice fosforu, se také zavádí do výsledné kompozice.

    Výsledná směs se zahřeje na teplotu 95 až 96 ° C, kvůli níž se obě spirály DNA, které se v obvyklém stavu překrývají, rozplývají. Poté se preparát ochladí, v tomto okamžiku se primery připojují k požadované oblasti virového genomu, aniž by RNA (nebo DNA) znovu vytvořila dvojitou šroubovice.

    Během chlazení polymeráza vyhledává volný řetězec nukleotidů. Pro fungování tohoto enzymu je nutný jediný řetězec nukleotidů. Vzhledem k tomu, že polymeráza klouže podél řetězce DNA (jako prsten pomocí lana), nemůže pracovat na dvojité šroubovice.

    Poté se provádí opakovaný cyklus zahřívání, díky kterému jsou nukleotidové řetězce odděleny. Pro každý z těchto cyklů PCR se množství požadovaného genu hepatitidy ve vzorku zvyšuje v geometrické progresi a zbytek genetického materiálu se produkuje lineárně.

    Po čištění roztoku nukleotidových zbytků a oddělení DNA řetězců parametrem molekulové hmotnosti od elektroforézy je snadné určit, zda požadovaný gen existuje ve zkušebním vzorku nebo ne.

    Výhody PCR

    Laboratorní studie používající metodu PCR umožňuje získat ještě více informací než jednoduše přítomnost RNA viru. Při stanovení parametru úrovně radioaktivního záření je možné určit, jaké množství genetického materiálu bylo původně obsaženo ve studovaném vzorku. V případě hepatitidy určit míru virové zátěže.

    Další výhodou této metody je velmi vysoká citlivost CR reakce. Je mnohem vyšší než klasické metody detekce virů. V ideálním případě pro identifikaci požadovaného genu je pro PCR dostatečný pouze jeden virus ve vzorku.

    Navíc PCR je zcela specifická. Jeho primery jsou vytvořeny tak, aby plně odpovídaly jedinečným částem požadovaných genů, které nemá žádná jiná sekvence. Obě otisky prstů jsou jedinečné a v každém genu existují jedinečné sekvence nukleotidů.

    Kvalitativní analýza PCR

    Kvalitativní analýza pouze odhaluje přítomnost viru v krvi. Tento test by měl být proveden u všech pacientů, u kterých bylo zjištěno, že mají v krvi protilátky proti hepatitidě C. Výsledkem může být pouze jedna ze dvou hodnot: "zjištěna" nebo "nebyla zjištěna". U zdravého člověka by norma (referenční hodnota) neměla být "zjištěna".

    Existuje také speciální interpretace takových výsledků provedeného kvalitativního výzkumu:

    • Výsledek je "objeven". To znamená, že ve vzorku biologického materiálu, se kterým bylo nalezeno RNA fragmentu, který je specifický pro viru hepatitidy C V důsledku toho je skutečnost, že u pacienta s infekci virem hepatitidy B s C-li výsledek kvalitativní PCR je „objevil“, znamená to, že virus opakování a v tomto okamžiku infikuje nové jaterní buňky v těle.
    • Výsledek je "nezjištěn". Takové rozhodnutí ukazuje, že ve vzorku biologického materiálu získaný fragment RNA není v laboratoři, která je specifická pro HCV RNA buď stejné koncentraci patogenu infekce ve vzorku byla pod hranicí citlivosti testu detekován.

    V akutní fázi RNA viru hepatitidy C mohou kvalitativní studie s použitím PCR techniky odhalit po 1-2 týdnech bezprostředně po infekci těla, tj. Dlouho před vznikem protilátek proti samotné hepatitidě.

    Nespolehlivé výsledky analýz takového šetření lze získat u:

    • kontaminovaný biomateriál;
    • přítomnost heparinu v krvi pacienta;
    • přítomnost ve vzorku chemických nebo bílkovinných látek (inhibitorů), které ovlivňují různé složky PCR.

    Pro kvalitativní analýzu PCR není nutná zvláštní příprava pacienta pro studium. Venózní krev se používá jako materiál.

    Hodnocení výsledků

    Kvalitativní testy PCR mají určitý stupeň citlivosti a v závislosti na přesnosti výzkumu a úroveň vybavení v laboratoři se může pohybovat mezi 10 a 500 IU / ml.

    To znamená, že pokud je virus ve vzorku krve přítomen ve velmi nízké koncentraci (nižší než prahová citlivost daného laboratoře), pacienta pacienta lze určit jako "nezjištěný". Z tohoto důvodu je při provádění kvalitativní analýzy PCR s nízkou úrovní viremie (nízká koncentrace viru) například u pacientů podstupujících antivirovou terapii velmi důležité znát práh citlivosti tohoto diagnostického systému.

    Varianty diagnostických systémů

    Pro kontrolu virologické odpovědi se doporučuje antivirová léčba používat diagnostické systémy s prahem citlivosti minimálně 50 IU / ml. Tato kritéria jsou splněny, například: analyzátory COBAS Ampicolor HCV test (c přesnost 50 IU / ml) a RealBest HCV RNA (s citlivostí 15 IU / ml).

    Podle doporučení WHO pro vytvoření konečné diagnóze hepatitidy C, musí být založeno pouze na základě trojitého detekce RNA viru ve vzorcích séra od pacienta s žádnými jinými druhy hepatitidy markeru.

    Kromě metod PCR se pro detekci HCV RNA u pacientů používá také studie TMA (metoda transkripční amplifikace). Má nejlepší citlivost (5 až 10 IU / ml), ale u nás tato metoda testování ještě není příliš častá.

    Rozsah zjištěných změn virů

    Toto kvalitativní stanovení přítomnosti RNA viru hepatitidy C v séru umožňuje určit několik genotypů tohoto viru. V současné době vede věda více než šest genotypů tohoto viru, stejně jako asi 10 podtypů onemocnění.

    Vírusy 1, 2, 3 genotypů jsou běžné v naší zemi. Laboratoře mohou identifikovat následující genotypy: 1a a 1b, 2a, 2b a 2c, a 3, 4, 5a a 6 bez ohledu na podtypy. Pro všechny modifikace viru je specificita detekce 100%.

    Kvantitativní analýza PCR

    Pomocí kvantitativního testu PCR se určí koncentrace viru hepatitidy ve vzorcích krve (virové zátěž). Tento test viremie (koncentrace viru) umožňuje určit počet jednotek specifického genetického materiálu (nejvíce virové RNA), který je detekován v určité míře. V tomto případě určete jeho koncentraci v 1 ml, což odpovídá 1 cu. viz

    Kvantitativní parametry analýzy jsou vyjádřeny na obrázcích pro toto použití jako jednotky měřicích mezinárodních jednotek (IU) na mililitr (ml), označené jako ME / ml. Nyní v některých laboratořích může být množství viru stanoveno v jiných jednotkách: počet kopií na ml je označen jako kopie / ml.

    • Na hepatitidě C se taková kvantitativní analýza PCR provádí těsně před zahájením léčby. Pak na 1., 4., 12. a 24. týdnu. Hodnocení v 12. týdnu je orientační, umožňuje určit účinnost terapie.
    • Příprava na analýzu. Pro kvantitativní analýzu PCR není nutná zvláštní příprava pacienta pro studii. Půl hodiny před odběrem byste neměli kouřit. Venózní krev se používá jako laboratorní materiál.

    Hodnocení výsledků

    U různých laboratorních testovacích systémů existují pro tento ukazatel různé přepočítací koeficienty v IU / ml. V průměru se používá konverzní parametr, ve kterém jsou 4 kopie / ml = 1 IU / ml. To znamená, že pokud laboratoř dává výsledek analýzy PCR 2,4 * 10 6 kopií / ml, pak by měl být tento parametr rozdělen na 4 a dostaneme 6 x 105 5 IU / ml.

    Vysoká zátěžová hladina 800 000 IU / ml je považována za vysokou, což je přibližně ekvivalentní indexu 3 000 000 kopií / ml. Nízkou viremii podle některých autorů odpovídají parametry kvantitativní PCR nižší než 400 000 IU / ml.

    V důsledku kvantitativního testu nelze konečné výsledky doručit ve formě digitální hodnoty, ale: "pod měřicím rozsahem" nebo "nezjištěným".

    • Hodnocení: "pod měřicí rozsah". To naznačuje, že kvantitativní test nedokázal detekovat virovou RNA viru hepatitidy C, ale samotný virus je přítomen v těle ve velmi malých koncentracích. To je indikováno dodatečným kvalitativním testem, který potvrzuje přítomnost viru.
    • Hodnocení: "nezjištěno". Tento výsledek naznačuje, že kvantitativní test nezjistil virus ve vzorku RNA.

    Parametr virové zátěže určuje nejprve stupeň infekčnosti onemocnění, úroveň "infekčnosti" pacienta. Čím vyšší je koncentrace viru pacienta, tím větší je pravděpodobnost jeho přenosu jiným lidem. Například při sexu se špatnou osobou nebo vertikální cestou. Takový kvantitativní indikátor také pomáhá určit účinnost léčby pacienta.

    Provádění kvantitativní analýzy PCC je důležité pro antivirovou terapii, vyhodnocení jejího úspěchu a plánování trvání kurzu. Takže s rychlou reakcí těla na léčbu a nízkým stupněm viremie může být trvání terapie sníženo.

    Při pomalém snížení kvantitativního parametru PCR by měla být antivirová léčba prodloužena nebo upravena. Pokud je úroveň virové zátěže nízká, pak je to příznivý faktor terapie, je-li vysoká, pak je použitá metoda léčby neúčinná a drogy nebo metody jejich užívání by měly být změněny.


    Související Články Hepatitida