Analýzy pro hepatitidu C
Hepatitida C je závažné infekční onemocnění, které postihuje játra a je charakterizováno jeho zničením. Pokud virus vnikne do těla, pravděpodobnost infekce je 100%. Hlavní způsoby přenosu infekce: sexuální a přenosné.
Dlouho se nemoci projevuje jakýmkoli způsobem a je asymptomatická. Z tohoto důvodu nemocná osoba nevede žádnou léčbu a akutní forma onemocnění velmi rychle proniká do chronické. Diagnostika hepatitidy C hraje velkou roli v životě každé osoby. Včas rozpoznat vážnou nemoc, doporučuje se alespoň jednou ročně vyšetřit krev z žíly.
Způsoby přenosu a symptomatologie
Zdrojem onemocnění je nosič viru nebo nemocná osoba. Virus hepatitidy C může proniknout do těla zdravé osoby v následujících případech:
- během výkonu manikúry, piercingu, tetování s nástroji, které nebyly sterilizovány po nemocném návštěvníku;
- použití obecných osobních hygienických předmětů (nůžky na nehty, zubní kartáčky, holicí strojky atd.);
- kteří užívají jednu injekční stříkačku pro intravenózní injekce;
- při provádění hemodialýzy pomocí přístroje "umělá ledvina";
- při provádění jakýchkoli lékařských zásahů a kontaktů s biologickými kapalinami nosiče nebo pacienta bez prostředků osobní ochrany;
- při transfuzi kontaminované krve nebo jejích složek;
- během sexuálního styku bez prostředků bariérové antikoncepce;
- Od matky k dítěti během porodu nebo kojení.
Riziko infekce během lékařských manipulací přetrvává i ve vyspělých zemích. Důvodem je porušení hygienických norem a nedbalosti zdravotnického personálu.
Abyste zabránili přechodu onemocnění na chronickou formu, musíte pečlivě věnovat pozornost vašemu zdraví. Pokud máte následující příznaky, vyhledejte odborníka:
- bolesti velkých kloubů, bez poškození a zranění;
- obecná slabost, malátnost, porucha spánku;
- v akutní fázi pokožky a sliznic žlutá, moč viditelně tmavne;
- bolestivost a pocit těžkosti v pravém hypochondriu;
- nevolnost, zvracení bez příčiny;
- zvýšení tělesné teploty v průběhu 37-37,5 stupňů během dne;
- kožní vyrážky připomínající příznaky alergie;
- snížení nebo ztráta chuti k jídlu, averze k jídlu;
- krevní obraz při zkoumání změny.
Všechny tyto příznaky neznamenají, že tělo má v těle virus viru hepatitidy, je to jenom výmluva ke konzultaci s lékařem a vyšetření. Teprve po přijatých výsledcích provede diagnóza a jmenuje ošetřovatele. Pokud existuje možnost, můžete provést rychlou studii doma a zjistit přítomnost viru.
Druhy výzkumu k určení viru
Krevní test na hepatitidu se 100% spolehlivostí se stanoví metodou ELISA. ELISA je enzýmově vázaný imunosorbentní test založený na přidání specifických protilátek nebo antigenů do testované krve a následné stanovení odpovědi komplexů antigen-protilátka.
V případě pozitivního výsledku se provede další krevní test - RIBA (rekombinantní imunoblotování). Kromě toho existuje metoda PCR, která pomáhá s řetězovou reakcí obnovit RNA viru hepatitidy C a určit její kvantitativní a kvalitativní složení. Analýza pro detekci viru hepatitidy C se provádí během těhotenství, před provedením chirurgického zákroku, před odběrem krve.
Pokud studie zjistila v krvi virus viru hepatitidy C, pak tato studie nekončí? Koneckonců, ukazatele krve se mění, když je v těle infekce. Jaké testy mám vzít jako doplněk?
Po pozitivním výsledku bude jmenován odborník:
- generalizovaný krevní test;
- biochemický krevní test;
- definice genotypu viru;
- Ultrazvuk orgánů břišní dutiny (zejména jater);
- identifikace jiných typů hepatitidy;
- krev pro infekci HIV;
- histologie jater;
- v případě potřeby výzkum štítné žlázy a autoimunitní onemocnění.
Obecný krevní test na hepatitidu C se bude lišit od těch, kteří tuto patologii nemají. Jaké ukazatele se mění v nemoci? Snižování počtu leukocytů naznačuje přítomnost chronické infekční nemoci, u lidí užívajících antivirové komplexy, dochází ke zvýšení ESR a významnému poklesu neutrofilů.
Jak správně předat biologickou tekutinu pro získání přesných výsledků
Nejméně 4-6 týdnů po posledním kontaktu s údajným pacientem by měla být provedena diagnóza přenosu hepatitidy C.
Zvláštní přípravek před testem se nevyžaduje, krev se užívá ráno na prázdný žaludek. Kolik dávky krve, moči pro přesný výsledek?
Krev potřebuje ne méně než 5-6 ml, moč dostatečně 10-15 ml. Biologický materiál musí být doručen do laboratoře v den, kdy byl odebrán. V opačném případě hrozí riziko falešně pozitivního, chybného nebo pochybného výsledku.
Kromě krve mohou být pro přítomnost viru zaslány i další bio-tekutiny: moč, sliny. Všechny jsou také vhodné pro expresní testy, analýza hepatitidy C je připravena za 15-20 minut. Za tímto účelem se používá ultra-citlivý test OraQuick HCV Rapid Antibody Test.
Vysvětlení výsledků analýzy
V medicíně existuje více než 10 typů HCV, ale pro určení diagnózy je třeba udělat 5 nejčastější z nich. Krevní test v laboratoři provádí kvalifikovaný lékař.
Pokud byl prokázán pozitivní výsledek, měl by pacient naléhavě poradit se specialistou na infekční onemocnění a podrobit se dalšímu vyšetření. Po přezkoumání statistik, můžeme vidět, že 4% populace je infikováno virem hepatitidy C, ale to není nutné, aby si malé množství, protože mnozí lidé nemají darovat krev a ani nevědí o tom hrozném diagnóze.
Tabulka udávající dekódování markerů hepatitidy
Výzkum viru hepatitidy C
Protilátky proti viru hepatitidy C (celkem)
Protilátky proti viru hepatitidy C v séru obvykle chybí
Celkové protilátky proti viru hepatitidy C jsou protilátky tříd IgM a IgG, zaměřené na komplex strukturálních a nestrukturálních proteinů viru hepatitidy C.
Tato studie je testována k identifikaci pacientů s FAR. Celkové protilátky proti viru hepatitidy C mohou být detekovány v prvních 2 týdnech onemocnění a jejich přítomnost naznačuje možnou infekci virem nebo přenášenou infekci.
Jednoznačná odpověď na základě výsledků tohoto testu nelze získat, protože test určuje celkové protilátky IgM a IgG. Pokud toto rané období akutní virové hepatitidy C, o tom svědčí protilátky IgM, a pokud je to období rekonvalescence nebo stavu poté, co utrpěl HCV, pak je to indikováno IgG protilátky.
IgG protilátky proti HCV mohou přetrvávat v krvi rekonvalescenty po dobu 8-10 let s postupným snižováním jejich koncentrace. Možná pozdější detekce protilátek za rok nebo více po infekci. U chronické hepatitidy C se kontinuálně stanovují celkové protilátky. Proto, abychom objasnili načasování infekce, je nutné samostatně identifikovat protilátky třídy IgM HCV.
Hodnocení výsledků výzkumu
Výsledek výzkumu je vyjádřen kvalitativně - pozitivní nebo negativní. Negativní výsledek studie naznačuje nepřítomnost celkových protilátek (JgM a JgG) na HCV v séru. Pozitivní výsledky - detekce celkové protilátky (JGM a JGG) HCV indikuje počáteční fázi akutní virové hepatitidy, akutní infekce období počátečních fázích obnovy, virové hepatitidy C nebo chronické virové hepatitidy C.
Detekce celkových protilátek proti HCV však nestačí k diagnostice HCV a vyžaduje potvrzení k vyloučení falešně pozitivního výsledku testu. Proto je-li pro laboratorní laboratorní test proveden pozitivní screeningový test na celkové protilátky proti HCV, provede se potvrzující test. Konečný výsledek stanovení celkového počtu protilátek proti HCV je uveden společně s výsledkem potvrzovacího testu.
Protilátky proti viru hepatitidy C JgM
Protilátky proti viru hepatitidy C JgM v séru obvykle chybí. Přítomnost protilátek třídy JgM proti HCV v krvi pacienta umožňuje ověření aktivní infekce. Protilátky třídy JgM mohou být detekovány nejen s akutním HCV, ale také s chronickou hepatitidou C.
Protilátky třídy JgM až HCV se objevují v krvi pacienta 2 týdny po vývoji klinického obrazu akutní virové hepatitidy C nebo exacerbace chronické hepatitidy a obvykle zmizí po 4-6 měsících. Snížení jejich hladiny může naznačovat účinnost farmakoterapie.
Hodnocení výsledků výzkumu
Výsledek výzkumu je vyjádřen kvalitativně - pozitivní nebo negativní. Negativní výsledek studie naznačuje nepřítomnost protilátek JgM proti HCV v séru. Pozitivní výsledky - detekce protilátek proti HCV JGM ukazuje počáteční fázi akutní virové hepatitidy, akutní infekce období časných stadiích využití nebo aktivní chronické virové hepatitidy C.
Detekce viru hepatitidy C metodou PCR (kvalitativně)
Virus hepatitidy C v krvi obvykle chybí.
Na rozdíl od sérologických metod pro diagnostiku HCV, kde jsou detekovány protilátky proti HCV, může PCR detekovat přítomnost HCV RNA přímo v krvi jak kvalitativně, tak i kvantitativně. Detekovatelný fragment v obou je konzervativní oblast genomu hepatitidy C.
Detekce protilátek proti HCV jen potvrzuje pacienta faktů infikované, ale neumožňuje ohodnotí aktivity infekčního procesu (replikace viru), prognózu onemocnění. Kromě toho, protilátky proti viru HS zjištěn v krvi pacientů s akutní a chronické hepatitidy, stejně jako u těch pacientů, kteří jsou nemocní a zpět, ale často protilátky objevují v krvi jen pár měsíců po nástupu klinického onemocnění, takže je obtížné diagnostikovat. Detekce viru v krvi metodou PCR je více informativní diagnostickou metodou.
Kvalitativní detekce HCV pomocí PCR v krvi svědčí o viremii, umožňuje posoudit reprodukci viru v těle a je jedním z kritérií pro účinnost antivirové terapie.
Analytická citlivost metody PCR je alespoň 50-100 virových částic v 5 μl, která byla izolována ze vzorku DNA a specificita je 98%. Detekce HCV RNA pomocí PCR v časných stadiích virové infekce (případně během 1-2 týdnů po infekci), vzhledem k celkové absenci sérologických markerů mohou sloužit jako nejčasnější zjištění infekce.
Nicméně izolovaná detekce RNA viru hepatitidy C na pozadí úplné nepřítomnosti jakýchkoli jiných sérologických markerů nemůže zcela vyloučit falešně pozitivní výsledek PCR. V takových případech je nutné komplexní hodnocení klinických, biochemických a morfologických studií a opakované opakované potvrzení přítomnosti PCR infekce.
Podle doporučení Světové zdravotnické organizace pro potvrzení diagnózy virové hepatitidy C je nezbytná trojnásobná detekce RNA viru hepatitidy C v krvi pacienta.
Detekce HCV RNA metodou PCR se používá k:
Detekce viru hepatitidy C metodou PCR (kvantitativně)
Kvantitativní metoda pro stanovení obsahu RNA viru hepatitidy C v krvi poskytuje důležité informace o intenzitě onemocnění, účinnosti léčby a vývoji rezistence na antivirové léky. Analytická citlivost metody je od 5102 kopií / ml virových částic v krevním séru, specificita je 98%.
Úroveň viremie se hodnotí následovně: pokud obsah HCV RNA z 10 ^ 2 do 10 ^ 4 kopií / ml - nízký; od 10 ^ 5 do 10 ^ 7 kopií / ml - střední a vyšší než 10 ^ 8 kopií / ml - vysoká.
Kvantitativní stanovení HCV RNA v krevním séru pomocí PCR je důležité pro předpovědi účinnosti léčby interferonem-alfa. Bylo prokázáno, že osoby s nízkou úrovní viremie mají nejpříznivější prognózu onemocnění a největší pravděpodobnost pozitivní reakce na antivirovou terapii. Účinná léčba snižuje hladinu viremie.
Genotypizace viru hepatitidy C - stanovení genotypu
Metoda PCR umožňuje nejen detekci HCV RNA v krvi, ale také stanovení genotypu. Nejdůležitější pro klinickou praxi je 5 subtypů HCV - 1a, 1b, 2a, 2b a 3a. U nás je nejběžnější podtyp 1b, za ním následují 3a, 1a, 2a.
Stanovení genotypu (podtypu) viru je důležité pro předpovídání průběhu HCV a výběr pacientů s chronickým HCV pro léčbu interferonu-alfa a ribavirinu.
Když je pacient infikován podtypem 1b, dochází v přibližně 90% případů k rozvoji chronické HCV, u podtypů 2a a 3a v 33-50%. U pacientů s podtypem 1b se onemocnění vyskytuje v závažnější formě a často končí vývojem jaterní cirhózy a hepatocelulárního karcinomu. Když infikovaných subtypu 3a je výraznější u pacientů s cirhózou, léze žlučových cest, aktivity ALT a méně závažných fibrotických změn v játrech, než u pacientů s subtypu 1b.
Indikace pro léčbu chronického interferonu-alfa HCV jsou:
Při léčbě pacientů s interferonem-alfa s virovou hepatitidou C podtypem 1b se účinnost léčby pozoruje v průměru v 18% případů, u infikovaných jinými podtypy - u 55%. Použití kombinovaného léčebného režimu (interferon-alfa + ribavirin) zvyšuje účinnost léčby. Silná odpověď je pozorována u 28% pacientů podtypu 1b a u 66% u ostatních podtypů HCV.
Analýza PCR pro hepatitidu
PCR na hepatitidě C
- RNA hepatitidy C ( „PCR-kvalita“) - detekce v analýze krve je důkazem akutní nebo chronické hepatitidy C se určí z ve 2. týdnu infekce, se před anti-HCV, což umožňuje diagnostikovat onemocnění v časných stádiích. Stanovení RNA se provádí u pacientů s klinickou akutní hepatitidou B a u pacientů s pozitivním testem na hepatitidu.
- RNA hepatitidy C ("Kvantitativní PCR") - virové zátěž - jeden z indikátorů účinnosti antivirové terapie a jejího hodnocení (změnou úrovně z počáteční hodnoty). Kvantitativní charakterizace obsahu hepatitidy C RNA je důležitá pro hodnocení účinnosti antivirové terapie a má prognostický význam pro stanovení chronicity. Pacienti s vysokou virovou zátěží (vysoké množství RNA) před léčbou reagují horší na léčbu.
- RNA hepatitidy C (genotypy 1, 2, 3) - Druh léčby závisí na typu a účinnosti. Onemocnění způsobené virem genotypu 1 je nejpříznivější z hlediska prognózy účinnosti terapie. Podle současných doporučení by měl být před zahájením antivirové léčby proveden krevní test pro genotypizaci hepatitidy C.
- RNA hepatitidy C (rozšířené genotypizace la, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - na území Ruska cirkulují subtypy 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a. Hepatitida C, způsobená virem genotypů 1 a 4, je nejvíce nepříznivá z hlediska prognózy.
- Ultrasenzivní PCR pro hepatitidu C (kvalitativní metoda) - Analýza se používá k diagnostice onemocnění v časných stádiích infekce, je optimální pro testování krve a vyhodnocení reakce na antivirové léčby. Tato studie i v případě, nezjištěných protilátky proti hepatitidě typu C, se doporučuje provádět pacientů s onemocněním jater nespecifikovaných důvodů, c získané imunitní nedostatečnosti, nebo přijímání imunosupresivní terapií.
- Ultrasenzivní PCR pro hepatitidu C (kvantitativní metoda) - jedinečná analýza s vysokou citlivostí (10 IU / ml) pro stanovení RNA viru hepatitidy C v kvantitativním vyjádření. Studie se používá k monitorování účinnosti léčby.
PCR na hepatitidě B
- DNA z hepatitidy B (kvalitativní analýza) - index reprodukce viru hepatitidy B. Nejprve se objeví v krvi, v průměru 1 měsíc po infekci. V některých případech je to jediný marker latentní infekce HBV. Stanovení DNA viru umožňuje diagnostikovat hepatitidu B způsobenou mutantními kmeny, u kterých nejsou detekovány jiné markery infekce.
- DNA z hepatitidy B (kvantitativní analýza) - Koncentrace DNA (virové zátěž) je jedním z testů používaných k určení fáze chronické hepatitidy B a účinnosti antivirové terapie. Analýza probíhá před a během léčby.
- Genotypizace hepatitidy B - nemoci způsobené různými genotypy viru se mohou v klinickém průběhu a výsledku lišit. Hepatitida B, způsobená virem genotypu C, často trvá chronickým průběhem a má vysoké riziko transformace na cirhózu jater nebo hepatocelulárního karcinomu. Pacienti infikovaní virem genotypu A lépe reagují na léčbu.
- Ultrasenzivní DNA-PCR pro hepatitidu B (kvalitativní metoda) - předá je za včasné zjištění nemoci. Vysoce informující ve studiích krve dárce. Může být použita k potvrzení spontánního nebo léčivého odběru viru z lidského těla.
- Ultrasenzivní PCR pro hepatitidu C (kvantitativní metoda) - diagnostiku DNA viru hepatitidy B v kvantitativním vyjádření. Byla provedena analýza účinnosti léčby.
- Stanovení mutací rezistence na antivirotika lamivudin, telbivudin, entecavir, adefovir, tenofovir (společně s analýzou "kvantitativní DNA pro hepatitidu B"). Aby bylo možné předložit analýzu, je nezbytné, aby pacienti s chronickou hepatitidou B byli před zahájením antivirové terapie a během podávání léků. Výsledek obsahuje informace o dostupnosti rezistence viru hepatitidy B k antivirovým lékům:
- R - virus je rezistentní na antivirové léčivo (byly detekovány rezistenční mutace tohoto léku);
- S - virus hepatitidy B je citlivý na drogu (norální hodnota, mutace rezistence nejsou detekovány);
- I - příčinou infekce může být rezistence k tomuto léku.
Důvody sporného výsledku analýzy hepatitidy C
Může být analýza pro hepatitidu C chybná? Bohužel se takové případy někdy dějí. Tato patologie je nebezpečná, protože po infekci se příznaky často objevují u osoby po mnoho let. Přesnost při diagnostice hepatitidy C je zvláště důležitá, stejně jako při předčasné detekci a léčbě onemocnění vede k katastrofickým komplikacím: cirhóze nebo rakovině jater.
Typy diagnostiky
Viry hepatitidy C se přenášejí krví, proto je jejich analýza důležitá. Imunitní systém produkuje protilátky proti původců onemocnění bílkovin - a M imunoglobuliny G. Jsou znaky, kterými je jaterní infekce diagnostikována při použití enzymové imunoanalýzy (EIA).
Přibližně jeden měsíc po infekci nebo s exacerbací chronické hepatitidy C se tvoří protilátky třídy M. Přítomnost takových imunoglobulinů dokazuje: organismus je napaden viry a rychle je ničí. Během zotavení pacienta počet těchto proteinů postupně klesá.
Protilátky G (anti-HCV IgG) se vytvářejí mnohem později, v období od 3 měsíců do 6 měsíců po invazi virů. Jejich detekce v krevním oběhu signalizuje, že se infekce vyskytla po dlouhou dobu, takže závažnost onemocnění skončila. Pokud jsou takové protilátky málo a v opakované analýze se stává ještě méně, znamená to zotavení pacienta. Ale u pacientů s chronickou hepatitidou C jsou v oběhovém systému vždy přítomny imunoglobuliny G.
Při laboratorních testech je také stanovena přítomnost protilátek proti nestrukturálním virovým proteinům NS3, NS4 a NS5. Anti-NS3 a Anti-NS5 jsou detekovány v počáteční fázi onemocnění. Čím více jejich ukazatel, tím pravděpodobnější bude chronický. Anti-NS4 pomáhá zjistit, zda je tělo nakaženo po dlouhou dobu a jak těžce postihuje játra.
U zdravých osob nemá krevní testy ALT (alaninaminotransferázu) a AST (aspartátaminotransferázu). Každý z těchto jaterních enzymů naznačuje počáteční stadium akutní hepatitidy. Pokud se objeví obojí, může to znamenat nástup nekrózy jaterních buněk. A přítomnost enzymu GGT (gamma-glutamyltranspeptidáza) je jedním z příznaků cirhózy orgánu. Důkazem destruktivní práce virů je přítomnost bilirubinu v krvi, enzym alkalická fosfatáza (alkalická fosfatáza), frakce bílkovin.
Nejpřesnější diagnóza, je-li správně provedena, je metoda PCR (polymerázová řetězová reakce). je založena na identifikaci žádné imunitní protilátky, a struktura RNA (ribonukleová kyselina) a genotypu původce hepatitidy C. Použití provedení 2 způsobu:
- kvalita - je virus nebo ne;
- kvantitativní - jaká je koncentrace v krvi (virové zátěž).
Vysvětlení výsledků
"Analýza hepatitidy C - negativní." Tato formulace potvrzuje absenci onemocnění v kvalitativním výzkumu metodou PCR. Podobný výsledek kvantitativního testu ELISA ukazuje, že v krvi nejsou žádné virové antigeny. V imunologických studiích někdy naznačují, že jejich koncentrace je pod normou - to je také negativní výsledek. Pokud však neexistují žádné antigeny a proti nim jsou protilátky, tento závěr znamená, že pacient již měl hepatitidu C nebo byl nedávno očkován.
"Analýza hepatitidy C je pozitivní." Tato formulace vyžaduje objasnění. Laboratoř může poskytnout pozitivní výsledek osobě, která byla v akutní formě nemocná. Stejné znění platí pro osoby, které jsou v současné době zdravé, ale jsou nositeli viru. Nakonec to může být falešná analýza.
V každém případě je nutné studium znovu provést. U pacienta s akutní hepatitidou C, která je léčena, může lékař předepsat testování každé tři dny, aby sledoval účinnost léčby a dynamiku onemocnění. Pacient s chronickým onemocněním by měl kontrolní testy provádět každých šest měsíců.
Pokud je výsledek testu protilátek pozitivní a závěr PCR testu je negativní, má se za to, že osoba je potenciálně infikována. Pro ověření přítomnosti nebo nepřítomnosti protilátek se provádí diagnostika RIBA (rekombinantní imunoblot). Tato metoda je informativní 3-4 týdny po infekci.
Varianty falešných analýz
V lékařské praxi existují 3 varianty nedostatečných výsledků diagnostického výzkumu:
- pochybné;
- falešně pozitivní;
- falešně negativní.
Metoda imunoenzymu je považována za velmi přesnou, ale občas poskytuje chybné informace. Pochybná analýza - pokud má pacient klinické příznaky hepatitidy C, ale v krvi nejsou žádné markery. Nejčastěji se to děje s příliš brzkou diagnózou, protože protilátky nemají čas na formování. V takovém případě proveďte druhou analýzu po 1 měsíci a kontrola - za šest měsíců.
Falešně pozitivní test na hepatitidy C lékaře dostane, když detekuje ELISA imunoglobulinů třídy M a viru PCR RNA není detekován. Takové výsledky jsou často u těhotných žen, pacientů s jinými typy infekce, pacientů s rakovinou. Musí také provádět opakované testy.
Falešně negativní výsledky se vyskytují velmi zřídka, například, v inkubační době onemocnění, kdy je osoba již infikovaných virem hepatitidy C, ale odolnost proti ní, a příznaky nejsou zatím k dispozici. Takové výsledky mohou být u pacientů, kteří užívají léky, které potlačují obranný systém těla.
Co jiného je určeno v diagnostice?
Hepatitida C se liší různými způsoby v závislosti na genotypu viru. Proto je při diagnostice důležité určit, která z jejích 11 variant je v krvi pacienta. Každý genotyp má několik druhů, které byly přiřazeny písmena jednotek, například 1a, 2b, a tak dále. D. Stačí zvolit režim dávkování, trvání léčby lze naučit druh viru.
V Rusku převládají genotypy 1, 2 a 3. Z nich je genotyp 1 nejhorší a nejdelší léčený, zejména podtyp 1c. Varianty 2 a 3 mají příznivější prognózy. Ale genotyp 3 může vést k závažné komplikaci: steatóza (obezita jater). Někdy se pacient nakazí viry z několika genotypů. V tomto případě jeden z nich vždy dominuje ostatním.
Diagnostika hepatitidy C je indikována, pokud:
- došlo k podezření na porušení aktivity jater;
- Pochybné údaje byly získány o jejím stavu ultrazvukem orgánů břišní dutiny;
- analýza krve obsahuje transferázy (ALT, AST), bilirubin;
- plánuje se těhotenství;
- existuje operace.
Příčiny chybných analýz
Falešně pozitivní testy, pokud v těle není žádná infekce, ale výsledky naznačují její přítomnost, tvoří až 15% laboratorních testů.
- minimální virová zátěž v počáteční fázi hepatitidy;
- podávání imunosupresivních léků;
- jednotlivé znaky ochranného systému;
- vysoká hladina kryoglobulinů (proteinů v krvi);
- obsah heparinu v krvi;
- těžké infekce;
- autoimunitní onemocnění;
- benigní novotvary, rakovinné nádory;
- stav těhotenství.
Výsledky falešně pozitivních testů jsou možné, pokud budoucí matka:
- metabolismus je narušen;
- Existují endokrinní, autoimunitní onemocnění, chřipka a dokonce i časté nachlazení;
- specifické těhotenské proteiny;
- hladina mikroelementů v krevním oběhu se prudce snižuje.
Navíc při provádění testů na hepatitidu C mohou být příčiny chyb v lidském faktoru. Často postiženo:
- nízká kvalifikace laboratoře;
- chybná analýza krve někoho jiného;
- chemické reagencie špatné kvality;
- zastaralé zdravotnické prostředky;
- kontaminace vzorků krve;
- porušení pravidel přepravy a skladování.
Každé laboratoř může někdy dělat chyby. Je však možné nebo pravděpodobné pouze při testování IFA nebo pouze PTSR. Při provádění diagnózy onemocnění se proto musí používat obě metody. Pak je to nejspolehlivější, protože je obtížné udělat chybu, pokud v krvi není žádný virus.
Je důležité provést analýzu hepatitidy C, pokud nejsou žádné onemocnění, dokonce ani studená. Není třeba darovat krev na prázdný žaludek. Měli byste jen předtím, než se vzdají mastných, smažených, kořeněných pokrmů, nepijte alkohol. A poslední věc: počáteční falešně pozitivní výsledek o hepatitidě C není důvodem pro paniku. Závěr by měl být učiněn až po dalším výzkumu.
Studie PCR pro hepatitidu C: typy, indikace, přepis
Virová hepatitida C je vážné onemocnění, které se objevuje při poškození jater. U osmdesáti procent pacientů přechází do chronické formy. Vírus se množí v jaterních buňkách - hepatocytech - a způsobuje jejich smrt. Mrtvé tkáně jsou nahrazeny ložisky pojivové tkáně, fibróza se vyvíjí.
S rozvojem fibrózy jater, je schopen plnit svou funkci, začíná cirhóza, což je nebezpečné pro jeho komplikací: zvyšující se tlak v portální žíle, gastrointestinální krvácení, poruchy srážlivosti krve, mentální změny kvůli poškození mozku jádra toxických produktů.
Příčinou onemocnění je infekce virem z rodiny Flaviviridae, což je typ viru RNA. To znamená, že genetický materiál, kterým jsou syntetizovány proteiny patogenu, je kódován molekulou ribonukleové kyseliny. Infekce nastává skrze krev, sexuálně a od těhotné ženy až po plod. Bohužel mezi infekcí a počátkem produkce protilátek může proběhnout poměrně velká doba - od dvou týdnů do šesti měsíců. To neumožňuje stanovení infekce metodou enzymového imunoanalýzy a zahájením léčby v časných stádiích.
Co je analýza PCR?
PCR je metoda molekulární analýzy, která umožňuje detekci genetického materiálu patogenu již v prvním týdnu po infekci za použití polymerázové řetězové reakce. Studie má vysokou specificitu, přesnost a umožňuje nejen stanovit přítomnost nebo nepřítomnost viru, ale i jeho koncentraci a genotyp.
Pro studii si vezměte pacientovu krev, v níž se může potenciálně nalézt RNA viru. Krev se přidá primerů - uměle syntetizované krátké délce části požadovaného genu a RNA polymerázu - speciální enzym, který násobí množství genetického materiálu patogenu. Pomocí speciálního přístroje se provádí několik cyklů vytápění a chlazení. Materiál je pak analyzován a porovnán se známými virovými geny, na základě kterých se dospěje k závěru o přítomnosti nebo nepřítomnosti infekce.
Typy PCR analýzy pro hepatitidu C
Existují tři typy analýzy PCR:
- Kvalitativní analýza PCR. První fáze studie. Umožňuje vám identifikovat genetický materiál viru v krvi.
Indikace pro analýzu PCR pro hepatitidu C
Studie PCR je předepsána v následujících případech:
- kontakt s nemocnou, která by mohla vést k infekci;
- pozitivní imunoanalýza spojená s enzymem;
- příznaky jaterní cirhózy: změny velikosti jater, zvětšení sleziny, výskyt podkožního žilního plexu na břiše;
- výskyt příznaků poškození jater: bolesti na pravé straně břicha, zožnění kůže;
- zvýšená aktivita ALT a AST v biochemické analýze krve;
- před zahájením léčby k určení virové zátěže;
- sledovat účinnost antivirové léčby;
- po dokončení léčby k monitorování relapsu;
- v přítomnosti diagnostikované hepatitidy B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater.
Dekódování studie PCR pro hepatitidu C
Dekódování analýzy PCR a enzymového imunoanalýzy pro hepatitidu C by mělo být řešeno specialistou na hepatologii nebo na infekční nemoci. Analýza výsledků PCR je nezbytná v kombinaci s biochemickým vyšetřením krve, biopsií a ultrazvukem. Pouze kvalifikovaný lékař bude schopen analyzovat výsledky studií a na základě nich předepsat správnou léčbu.
Dekódování kvalitativní analýzy.
Genetický materiál patogenu byl nalezen v analyzovaném biologickém materiálu. Infekce je potvrzena.
Neexistuje žádná infekce nebo množství RNA patogenu je pod hranicí citlivosti.
Dekódování kvantitativní analýzy.
Normální postava pro zdravé lidi. To znamená, že v testovaném materiálu není přítomna žádná RNA hepatitidy C nebo její koncentrace je pod prahem citlivosti studie.
Koncentrace RNA je nižší než rozsah kvantifikace. Takové výsledky jsou interpretovány velmi opatrně, korelují je s údaji jiných studií, často provádějí druhou studii.
Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za nízkou. Obvykle snížení množství viru znamená, že terapie je úspěšná.
Více než 8 * 10 ^ 5 IU / ml
Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za vysokou.
Více než 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml
Množství RNA je nad horní hranicí rozsahu kvantifikace. Závěry o stupni virové zátěže s tímto výsledkem nejsou možné. Obvykle se v takových případech opakuje test s ředěním vzorku krve.
Dekódování genotypizace.
Byla detekována RNA specifického genotypu
V biomateriálu je detekován virus hepatitidy C specifického genotypu a podtypu. Výsledek je kódován římskými číslicemi a latinkou, například - 1a, 2b. Existuje sedm genotypů a šedesát sedm podtypů, ale v Rusku existují pouze tři první typy.
RNA virové hepatitidy C byla detekována
V krvi se RNA nachází v Rusku vzácným genotypem, který nelze přičíst prvnímu, druhému nebo třetímu typu. Je zapotřebí více výzkumu.
Tento výsledek naznačuje, že pacient je zdravý, nebo že úroveň RNA patogenu je příliš malá.
Situace je možná, pokud je analýza PCR pro hepatitidu C negativní a enzymový imunotest detekuje protilátky proti viru. To znamená, že pacient měl v akutní formě hepatitidu C a uzdravil se. Přibližně dvacet případů infekce vede k spontánnímu vyléčení, pokud tělo pacienta vykazuje dostatečnou odolnost proti infekci.
Navzdory skutečnosti, že PCR je velmi přesná analýza, její výsledky mohou být zkresleny v následujících situacích:
- krev byla transportována do laboratoře za nevhodných podmínek, teplotní režim byl porušen;
- byl vzorek biomateriálu kontaminován;
- v krvi byly zbytky stop heparinu a dalších antikoagulancií;
- Ve zkoumané látce byly inhibitory - látky, které zpomalují nebo zastavují polymerázovou řetězovou reakci.
Výhody PCR v porovnání s jinými metodami
- Diagnóza v počátečních fázích. PCR detekuje genetický materiál vyvolávajícího onemocnění. Pomocí analýzy imunofluorescence lze stanovit pouze imunoglobuliny - látky, které organismus produkuje v reakci na infekci. V případě infekce způsobené hepatitidou C může být interval mezi infekcí a nástupem imunitní odpovědi několik týdnů a měsíců, kdy bude ELISA neúčinná. PCR poskytne odpověď už v prvním týdnu po infekci.
Jak se připravit na dodávku krve pro výzkum PCR
Pro analýzu PCR se pro hepatitidu C sbírá venózní krev. Obvykle se z pacientovy žíly najednou odeberou dvě části krve: první se odešle pro PCR a druhá pro ELISA. To se provádí, aby bylo možné přesněji posoudit, jak špatně je pacient infikován tímto virem a jak proti němu bojuje imunita.
Obvykle jsou pro pacienta vyžadována následující pravidla:
- vyšetření krve se odebere ráno;
- přestávka mezi posledním jídlem a dodávkou krve by měla být osm až deset hodin;
- dva nebo tři dny před analýzou se musíte vzdát smažených a mastných potravin a alkoholu;
- po dobu čtyřiadvaceti hodin před analýzou by se pacient měl vyhnout fyzické námaze: nemají váhy, nechodí do tělocvičny nebo do bazénu.
Kvalitativní a kvantitativní analýza PCR pro hepatitidu C: negativní, pozitivní, dekódování
Hepatitida C - virová onemocnění jater způsobené HCV Flavivirus, v němž struktura obsahuje molekulu ribonukleové kyseliny (RNA) (z viru hepatitidy anglicky C.). RNA nese genetický kód viru. Jeho přítomnost umožňuje analýzu PCR pro hepatitidu C.
HCV je nebezpečí pro člověka a to tzv sérologická okno (doba mezi infekcí a vzhledu reakce imunitního systému), může být dostatečně dlouhý - od několika týdnů do šesti měsíců.
To nezjistí infekci a začne léčbu včas.
V závislosti na individuálních vlastnostech hostitelského těla se HCV může projevit v akutní formě a může se také vyvinout jako chronické onemocnění, které bude vyžadovat dlouhodobou a nákladnou léčbu. Při detekci protilátek proti HCV se provádí řada laboratorních testů, včetně PCR pro hepatitidu C. Tento test se provádí u všech lidí, v jejichž krvi byly nalezeny protilátky proti HCV.
Co je analýza PCR?
Laboratorní analýza PCR pro hepatitidu C - studie biologického materiálu k identifikaci přítomnosti flavaviru.
Polymerázová řetězová reakce (jak je zkratka dešifrována) ukazuje kvantitativní hodnotu virového poškození organismu, jeho kvalitativní charakteristiky a také genotyp viru obsahujícího RNA.
Na základě jejich základů a na základě dalších analýz je určen způsob a doba trvání léčby, stejně jako epidemiologický faktor (riziko přenosu na jiný nosič).
Co je analýza RNA pro hepatitidu C?
PCR s hepatitidou C se také nazývá analýza RNA (HCV RNA), protože není známa. Flavavirus obsahuje částice RNA s velikostí virionu 30-60 nm. Jednou z charakteristik tohoto mikroorganismu je vysoká tendence k mutacím.
Každý z poddruhů (genotypů) viru má odlišný odpor, který způsobuje různé metody léčby a povahu další prognózy pro pacienta.
Biologický materiál (žilní krve) je řešeno půst a obvykle testovány PCR v reálném čase (vysoce citlivé v reálném čase, diagnostika ke stanovení dolní meze 15 IU / ml za použití automatického režimu uzavřený systém).
Existují další testy, například COBAS AMPLICOR s citlivostí 50-100 IU / ml. U každé laboratorní studie je důležitá prahová citlivost, tj. schopnost činidla detekovat minimální koncentraci viru v biologickém materiálu.
Druhy analýzy hepatitidy C pomocí metody PCR
PCR pro hepatitidu C zahrnuje tři důležité složky:
- kvalitativní analýza;
- kvantitativní analýza;
- genotypizace.
Tyto testy mohou určit povahu viremie, stejně jako genetické znaky patogenu. V závislosti na citlivosti diagnostického systému se test provádí jednou a někdy se provede druhý test s citlivějším činidlem pro potvrzení nebo vylepšení výsledků.
Vysoce kvalitní PCR na hepatitidě C
Analýza PCR pro kvalitu hepatitidy C je dalším běžným názvem pro test polymerázové řetězové reakce. Standardní citlivost testu, která umožňuje detekci přítomnosti virové léze, je v rozmezí 10-500 IU / ml.
Negativní analýza PCR pro hepatitidu C ukazuje, že koncentrace viru v krvi pacienta je pod prahem vnímavosti diagnostického systému.
Pokud kvalitativní PCR poskytla odpověď "nezjištěnou", je pro následnou léčbu důležité znát práh citlivosti činidla.
Bílkovinné frakce na flavavirus se objevují mnohem později.
Kvantitativní PCR s hepatitidou C
PCR kvantitativní hepatitida C je indikátorem virové zátěže, která odráží hladinu koncentrace RNA z FLA v těle. Jedná se o ukazatel, který ukazuje, kolik fragmentů virové RNA je obsaženo na jeden kubický centimetr krve. PCR hepatitidy výsledků Kvantitativní zkouška C RNA v konvenčním systému jsou uvedeny v mezinárodních jednotkách na ml (IU / ml), a mohou být zaznamenány v různými způsoby, například - 1,7 ppm nebo 1,700,000 IU / ml.
Kvantitativní PCR diagnostika hepatitidy C se podává pacientům před zahájením antivirové terapie a ve 12. týdnu léčby k vyhodnocení výsledků vybraného způsobu boje proti HCV. Virové zatížení umožňuje identifikovat tři důležité ukazatele onemocnění:
- infekčnost, tj. stupeň rizika přenosu viru z jednoho nosiče na jiný (čím vyšší je koncentrace RNA z FLA, tím vyšší je pravděpodobnost infekce jiné osoby, například během sexuálního kontaktu);
- metoda a účinnost léčby;
- trvání a prognóze antivirové terapie (čím vyšší je virální zátěž, tím trvá léčba delší).
Kvantitativní PCR diagnostika hepatitidy C závisí na typu laboratorního testu a prahu jeho citlivosti. Dolní hranice normy je obvykle považována za až 600 000 IU / ml, průměrná hodnota je v rozmezí 600 000-700 000 IU / ml. Výsledky z 800 000 IU / ml a výše jsou považovány za vysoké hladiny viru obsahujícího RNA.
Genotypizace
S ohledem na vysokou mutační aktivitu HCV v přírodě je důležité stanovit ve fázi testování, který genotyp viru je v krvi pacienta. Celkově je na planetě zaznamenáno 11 genotypů viru hepatitidy C, které zahrnují mnoho poddruhů. Na území Ruské federace jsou 1, 2 a 3 běžné.
PCR RNA hepatitidy C spolu s genotypizací je velmi důležitou složkou analýzy, protože umožňuje lékaři určit rezistenci (rezistenci) viru, vybrat vhodné léky a předepsat průběh léčby.
Genotypování také umožňuje nepřímo určit stav jater. Například genotyp 3 HCV je často doprovázen steatózou, v níž se tuk akumuluje v buňkách těla.
Krevní test PCR pro hepatitidu C by měl poskytnout číslo, které určuje genotyp. V laboratorních odpovědích může být napsáno "ne psáno" - a to znamená, že v lidské krvi je virus, který není určen testovacím systémem. To může znamenat, že genotyp není pro danou zeměpisnou oblast netypický. V tomto případě je nutné znovu provést analýzu s vyšší citlivostí diagnostického systému.
Dekódování analýzy PCR pro hepatitidu C
Test PCR pro hepatitidu C lze kvantifikovat na základě výše uvedených údajů. Při obdržení výsledků laboratorních testů jsou obvykle uvedeny následující údaje:
- "Nalezeno" / "nebylo nalezeno" (vysoce kvalitní PCR pro hepatitidu C);
- množství frakcí obsahujících RNA, například 831,680 IU / ml (kvantitativní PCR test);
- číslo, které určuje HCV genotyp, například - 1, 2, 3, 4;
- název testu je nejčastěji v reálném čase.
Nejdůležitější v rozluštění analýzy PCR pro hepatitidu C je druhá položka, která ukazuje virovou zátěž určující prognózu, způsob a trvání léčby.
Pokud je analýza PCR pro hepatitidu C negativní a pozitivní ELISA - co to znamená?
Pro dešifrování laboratorních testů je důležité kontaktovat odborníka na hepatologii nebo infekční onemocnění, který vysvětlí informace získané v souladu s typem diagnostického systému a prahem jeho citlivosti. V lékařské praxi je mnoho údajů o krevních testech, které mohou vést člověka bez lékařského vzdělání ke zmatku.
Například, v případě, že test na HCV PCR negativní a pozitivní ELISA, může to znamenat, že v tomto okamžiku v krvi pacienta není HCV, ale před tím, než trpěl akutní formy hepatitidy C. Předpokládá se, že pozitivní-linked immunosorbent assay (ELISA), ukazuje, že v krvi se objevují protilátky po vpádu viru v minulosti. Ale v moderní lékařské praxi ELISA analýza není dostatečně spolehlivé a často dává neobvyklé výsledky, takže lékaři použít jako primární screening. Při diagnostice onemocnění se specialisté řídí právě pomocí PCR testů.
Užitečné video
V následujícím videu je velmi podrobné a zajímavé říci, co je základem metody PCR, jak se provádí analýza:
Závěr
Venózní krev se obvykle užívá k analýze PCR s hepatitidou C. Nejčastěji dochází k dvojímu odběru vzorků biologického materiálu - ELISA a přímo k testu PCR. Pro správné výsledky zkoušek je nutné dodržovat hlavní pravidla laboratorního odběru vzorků biologického materiálu:
- krev pro analýzu se podává ráno na prázdném žaludku;
- mezi jídlem a krví by měla trvat nejméně 8 hodin;
- Před provedením testu byste měli také vyloučit alkohol a smažené potraviny;
- Během dne, než předáte krev, musíte se vyvarovat vysoké fyzické námahy.
Výsledky vyšetření krve jsou obvykle připraveny následující den.
Kvalitativní analýza hepatitidy C
Zanechat odpověď
Kvalitativní analýza polymerázové řetězové reakce - PCR pro hepatitidu C určuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v těle. V laboratoři se studuje struktura RNA, v níž se virus nachází. Pokud je zjištěn virus C, je nutné podstoupit léčbu, protože zanedbávaná jaterní choroba vede k vážným následkům. Kvalitativní PCR se provádí po zotavení za účelem potvrzení nepřítomnosti protilátek. Jmenován a pro preventivní vyšetření. Při nízké koncentraci patogenu v krvi nemůže PCR (kvalitativní) detekovat nic, protože diagnostický systém má své prahy citlivosti. V případě počátečního stadia onemocnění nebo mírné formy je PCR nakonec diagnostikována pomocí ultrazvuku.
Co je RNA virus?
Termín RNA viru hepatitidy C (nebo RNA viru hepatitidy C) se nazývá samotné onemocnění jater. Virus C se váže na zdravou tělesnou buňku a proniká dovnitř. Časem se šíří po celém těle, je to jen dostat se do krve. Výsledkem je, že patogen proniká játry, spojí se s buňkami a tvrdě pracuje. Hepatální buňky (hepatocyty) pracují pod jeho vlivem, podstupují změny a z tohoto zahynou. Čím delší je virus C v játrech, tím více buněk zemře. Postupně se rozvíjejí nebezpečné nemoci, které vedou ke zhoubné degeneraci a smrti.
Infekce jater s tímto typem viru se nemůže projevit jakýmkoliv způsobem externě. Po mnoho let nebo desítek let se nakažená osoba cítí naprosto zdravá a pouze náhodná vyšetření nejčastěji odhaluje patologii. Při darování krve na hepatitidu se zkoumá část řetězce RNA (ribonukleové kyseliny), která je součástí lidského genu (DNA). Výsledky laboratorního výzkumu by neměly být používány pro sebe-léčbu, protože to je pouze indikátor. Lékař určí přesný obraz a další diagnózu.
Po dokončení: svědectví o studii
Pro potvrzení HCV je přiřazena PCR analýza (polymerázová řetězová reakce). Studie PCR pomáhají najít patogenní materiál ve struktuře RNA a předepisovat účinnou terapii. Jsou jmenováni v následujících případech:
- identifikace příznaků zánětu jater;
- screeningové studie prevence;
- vyšetření osob v kontaktu;
- diagnóza hepatitidy smíšeného původu (definice hlavního patogenu);
- Stanovení úrovně aktivity reprodukce viru v chronické formě;
- cirhóza jater;
- k určení účinnosti předepsané léčby.
Existuje kvalitativní i kvantitativní analýza PCR. Kvantitativní PCR ukazuje procento RNA s nosiči viru v krvi a kvalitativní PCR indikuje přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pozitivní ukazatel kvality (přítomnost hepatitidy C RNA) také vyžaduje kvantitativní studium. Vysoká koncentrace patogenu hepatitidy C je spojena s rizikem přenosu, tj. S kontaminací ostatních. Nízké množství je lépe zacházeno. Množství RNA virů v krvi nesouvisí s intenzitou onemocnění. Analýza PCR se provádí také v případě terapie interferonem, aby se předepsal trvání a složitost průběhu léčby.
Vlastnosti kvalitativní analýzy PCR pro hepatitidu C
Kvalitativní analýza s indexem polymerázové řetězové reakce je přiřazena všem pacientům, kteří mají v krvi protilátky proti hepatitidě C. Kdo se zotavil a získal zpět, měl by být opětovně testován. Doporučuje se předat analýzu hepatitidy B, pak v případě pozitivního závěru a na hepatitidě D. Také kvalitativně analyzovaná reakce by měla být provedena ve spojení s jinými krevními testy. Analýzy ukazují kompletní obraz šíření viru.
Z výsledků testů bude vidět pouze pozitivní test na hepatitidu C nebo negativní, tj. Přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pokud je závěr "zjištěn", pak je virus aktivně i nadále aktivní. Označení "nebylo nalezeno" označuje nepřítomnost viru nebo jeho malé množství. S tímto indikátorem bychom měli vzít v úvahu skutečnost, že analytická citlivost diagnostických systémů je odlišná a hepatitida C RNA může být stále v krvi, ale v analýze se nezjistila.
Zvláště citlivá metoda PCR s ultra-hepatitidou C se odhaluje i v nepatrných množstvích. Používá se hybridizační fluorescenční studie, která je mnohonásobně vyšší než standardní PCR systémy. Metoda se používá v několika případech:
- podezření na skryté formy hepatitidy C;
- Diagnostika PCR nebyla patogenem potvrzena, ale existují protilátky;
- v případě využití;
- identifikovat počáteční stadium infekce.
Vysvětlení analýzy
Konečné rozhodnutí v diagnóze je ovlivněno PCR dekódováním HCV, zejména s ultrametodou. Hlavním nedostatkem tohoto výzkumu je přísné dodržování sterilních podmínek pro vzorek a materiály. Malá odchylka někdy ukazuje nepřesné závěry analytika, komplikuje diagnózu a následnou léčbu. Analýza PCR pro stanovení RNA viru hepatitidy ne vždy ukazuje obraz choroby s důvěrou, někdy jsou připuštěny nepřesnosti v obou směrech.
Při diagnostice viru hepatitidy se doporučuje provést komplexní vyšetření.
Norma indikátorů
Absence JgM protilátek proti RNA ve virové hepatitidě C je považována za normu při analýze polymerázové řetězové reakce. Současně zjištění sérologické analýzy naznačují přítomnost protilátek proti viru C a to je také v mezích normy. Kvalitativní definice neukazuje intenzitu onemocnění, pouze odhaluje příčinný účinek hepatitidy C v RNA. Taková analýza se opakuje po ošetření, aby se potvrdilo skutečné uzdravení.
Odchylky
Pokud jsou přítomny protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to rozvoj infekce. Nemoc je akutní nebo chronická, projevuje se v různých fázích. Pokud dojde k poklesu počtu protilátek, bude analýza indikovat dosažení výsledků léčby během regenerace. Existují extrémně vzácné případy falešně pozitivních nálezů v diagnostice. Objevují se u žen během těhotenství a u lidí s jinými infekčními nemocemi.