Kvalitativní analýza hepatitidy C

Share Tweet Pin it

Zanechat odpověď

Kvalitativní analýza polymerázové řetězové reakce - PCR pro hepatitidu C určuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v těle. V laboratoři se studuje struktura RNA, v níž se virus nachází. Pokud je zjištěn virus C, je nutné podstoupit léčbu, protože zanedbávaná jaterní choroba vede k vážným následkům. Kvalitativní PCR se provádí po zotavení za účelem potvrzení nepřítomnosti protilátek. Jmenován a pro preventivní vyšetření. Při nízké koncentraci patogenu v krvi nemůže PCR (kvalitativní) detekovat nic, protože diagnostický systém má své prahy citlivosti. V případě počátečního stadia onemocnění nebo mírné formy je PCR nakonec diagnostikována pomocí ultrazvuku.

Co je RNA virus?

Termín RNA viru hepatitidy C (nebo RNA viru hepatitidy C) se nazývá samotné onemocnění jater. Virus C se váže na zdravou tělesnou buňku a proniká dovnitř. Časem se šíří po celém těle, je to jen dostat se do krve. Výsledkem je, že patogen proniká játry, spojí se s buňkami a tvrdě pracuje. Hepatální buňky (hepatocyty) pracují pod jeho vlivem, podstupují změny a z tohoto zahynou. Čím delší je virus C v játrech, tím více buněk zemře. Postupně se rozvíjejí nebezpečné nemoci, které vedou ke zhoubné degeneraci a smrti.

Infekce jater s tímto typem viru se nemůže projevit jakýmkoliv způsobem externě. Po mnoho let nebo desítek let se nakažená osoba cítí naprosto zdravá a pouze náhodná vyšetření nejčastěji odhaluje patologii. Při darování krve na hepatitidu se zkoumá část řetězce RNA (ribonukleové kyseliny), která je součástí lidského genu (DNA). Výsledky laboratorního výzkumu by neměly být používány pro sebe-léčbu, protože to je pouze indikátor. Lékař určí přesný obraz a další diagnózu.

Po dokončení: svědectví o studii

Pro potvrzení HCV je přiřazena PCR analýza (polymerázová řetězová reakce). Studie PCR pomáhají najít patogenní materiál ve struktuře RNA a předepisovat účinnou terapii. Jsou jmenováni v následujících případech:

  • identifikace příznaků zánětu jater;
  • screeningové studie prevence;
  • vyšetření osob v kontaktu;
  • diagnóza hepatitidy smíšeného původu (definice hlavního patogenu);
  • Stanovení úrovně aktivity reprodukce viru v chronické formě;
  • cirhóza jater;
  • k určení účinnosti předepsané léčby.
Studie PCR jsou určeny lékařem k určení účinnosti průběhu léčby hepatitidy.

Existuje kvalitativní i kvantitativní analýza PCR. Kvantitativní PCR ukazuje procento RNA s nosiči viru v krvi a kvalitativní PCR indikuje přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pozitivní ukazatel kvality (přítomnost hepatitidy C RNA) také vyžaduje kvantitativní studium. Vysoká koncentrace patogenu hepatitidy C je spojena s rizikem přenosu, tj. S kontaminací ostatních. Nízké množství je lépe zacházeno. Množství RNA virů v krvi nesouvisí s intenzitou onemocnění. Analýza PCR se provádí také v případě terapie interferonem, aby se předepsal trvání a složitost průběhu léčby.

Vlastnosti kvalitativní analýzy PCR pro hepatitidu C

Kvalitativní analýza s indexem polymerázové řetězové reakce je přiřazena všem pacientům, kteří mají v krvi protilátky proti hepatitidě C. Kdo se zotavil a získal zpět, měl by být opětovně testován. Doporučuje se předat analýzu hepatitidy B, pak v případě pozitivního závěru a na hepatitidě D. Také kvalitativně analyzovaná reakce by měla být provedena ve spojení s jinými krevními testy. Analýzy ukazují kompletní obraz šíření viru.

Z výsledků testů bude vidět pouze pozitivní test na hepatitidu C nebo negativní, tj. Přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pokud je závěr "zjištěn", pak je virus aktivně i nadále aktivní. Označení "nebylo nalezeno" označuje nepřítomnost viru nebo jeho malé množství. S tímto indikátorem bychom měli vzít v úvahu skutečnost, že analytická citlivost diagnostických systémů je odlišná a hepatitida C RNA může být stále v krvi, ale v analýze se nezjistila.

Zvláště citlivá metoda PCR s ultra-hepatitidou C se odhaluje i v nepatrných množstvích. Používá se hybridizační fluorescenční studie, která je mnohonásobně vyšší než standardní PCR systémy. Metoda se používá v několika případech:

  • podezření na skryté formy hepatitidy C;
  • Diagnostika PCR nebyla patogenem potvrzena, ale existují protilátky;
  • v případě využití;
  • identifikovat počáteční stadium infekce.
Zpět na obsah

Vysvětlení analýzy

Konečné rozhodnutí v diagnóze je ovlivněno PCR dekódováním HCV, zejména s ultrametodou. Hlavním nedostatkem tohoto výzkumu je přísné dodržování sterilních podmínek pro vzorek a materiály. Malá odchylka někdy ukazuje nepřesné závěry analytika, komplikuje diagnózu a následnou léčbu. Analýza PCR pro stanovení RNA viru hepatitidy ne vždy ukazuje obraz choroby s důvěrou, někdy jsou připuštěny nepřesnosti v obou směrech.

Při diagnostice viru hepatitidy se doporučuje provést komplexní vyšetření.

Norma indikátorů

Absence JgM protilátek proti RNA ve virové hepatitidě C je považována za normu při analýze polymerázové řetězové reakce. Současně zjištění sérologické analýzy naznačují přítomnost protilátek proti viru C a to je také v mezích normy. Kvalitativní definice neukazuje intenzitu onemocnění, pouze odhaluje příčinný účinek hepatitidy C v RNA. Taková analýza se opakuje po ošetření, aby se potvrdilo skutečné uzdravení.

Odchylky

Pokud jsou přítomny protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to rozvoj infekce. Nemoc je akutní nebo chronická, projevuje se v různých fázích. Pokud dojde k poklesu počtu protilátek, bude analýza indikovat dosažení výsledků léčby během regenerace. Existují extrémně vzácné případy falešně pozitivních nálezů v diagnostice. Objevují se u žen během těhotenství a u lidí s jinými infekčními nemocemi.

Analýza PCR pro hepatitidu

PCR na hepatitidě C

  1. RNA hepatitidy C ( „PCR-kvalita“) - detekce v analýze krve je důkazem akutní nebo chronické hepatitidy C se určí z ve 2. týdnu infekce, se před anti-HCV, což umožňuje diagnostikovat onemocnění v časných stádiích. Stanovení RNA se provádí u pacientů s klinickou akutní hepatitidou B a u pacientů s pozitivním testem na hepatitidu.
  2. RNA hepatitidy C ("Kvantitativní PCR") - virové zátěž - jeden z indikátorů účinnosti antivirové terapie a jejího hodnocení (změnou úrovně z počáteční hodnoty). Kvantitativní charakterizace obsahu hepatitidy C RNA je důležitá pro hodnocení účinnosti antivirové terapie a má prognostický význam pro stanovení chronicity. Pacienti s vysokou virovou zátěží (vysoké množství RNA) před léčbou reagují horší na léčbu.
  3. RNA hepatitidy C (genotypy 1, 2, 3) - Druh léčby závisí na typu a účinnosti. Onemocnění způsobené virem genotypu 1 je nejpříznivější z hlediska prognózy účinnosti terapie. Podle současných doporučení by měl být před zahájením antivirové léčby proveden krevní test pro genotypizaci hepatitidy C.
  4. RNA hepatitidy C (rozšířené genotypizace la, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - na území Ruska cirkulují subtypy 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a. Hepatitida C, způsobená virem genotypů 1 a 4, je nejvíce nepříznivá z hlediska prognózy.
  5. Ultrasenzivní PCR pro hepatitidu C (kvalitativní metoda) - Analýza se používá k diagnostice onemocnění v časných stádiích infekce, je optimální pro testování krve a vyhodnocení reakce na antivirové léčby. Tato studie i v případě, nezjištěných protilátky proti hepatitidě typu C, se doporučuje provádět pacientů s onemocněním jater nespecifikovaných důvodů, c získané imunitní nedostatečnosti, nebo přijímání imunosupresivní terapií.
  6. Ultrasenzivní PCR pro hepatitidu C (kvantitativní metoda) - jedinečná analýza s vysokou citlivostí (10 IU / ml) pro stanovení RNA viru hepatitidy C v kvantitativním vyjádření. Studie se používá k monitorování účinnosti léčby.

PCR na hepatitidě B

  1. DNA z hepatitidy B (kvalitativní analýza) - index reprodukce viru hepatitidy B. Nejprve se objeví v krvi, v průměru 1 měsíc po infekci. V některých případech je to jediný marker latentní infekce HBV. Stanovení DNA viru umožňuje diagnostikovat hepatitidu B způsobenou mutantními kmeny, u kterých nejsou detekovány jiné markery infekce.
  2. DNA z hepatitidy B (kvantitativní analýza) - Koncentrace DNA (virové zátěž) je jedním z testů používaných k určení fáze chronické hepatitidy B a účinnosti antivirové terapie. Analýza probíhá před a během léčby.
  3. Genotypizace hepatitidy B - nemoci způsobené různými genotypy viru se mohou v klinickém průběhu a výsledku lišit. Hepatitida B, způsobená virem genotypu C, často trvá chronickým průběhem a má vysoké riziko transformace na cirhózu jater nebo hepatocelulárního karcinomu. Pacienti infikovaní virem genotypu A lépe reagují na léčbu.
  4. Ultrasenzivní DNA-PCR pro hepatitidu B (kvalitativní metoda) - předá je za včasné zjištění nemoci. Vysoce informující ve studiích krve dárce. Může být použita k potvrzení spontánního nebo léčivého odběru viru z lidského těla.
  5. Ultrasenzivní PCR pro hepatitidu C (kvantitativní metoda) - diagnostiku DNA viru hepatitidy B v kvantitativním vyjádření. Byla provedena analýza účinnosti léčby.
  6. Stanovení mutací rezistence na antivirotika lamivudin, telbivudin, entecavir, adefovir, tenofovir (společně s analýzou "kvantitativní DNA pro hepatitidu B"). Aby bylo možné předložit analýzu, je nezbytné, aby pacienti s chronickou hepatitidou B byli před zahájením antivirové terapie a během podávání léků. Výsledek obsahuje informace o dostupnosti rezistence viru hepatitidy B k antivirovým lékům:
    • R - virus je rezistentní na antivirové léčivo (byly detekovány rezistenční mutace tohoto léku);
    • S - virus hepatitidy B je citlivý na drogu (norální hodnota, mutace rezistence nejsou detekovány);
    • I - příčinou infekce může být rezistence k tomuto léku.

Co je analýza PCR a virové zátěže?

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je laboratorní metoda pro stanovení DNA a RNA. Poprvé to testovala téměř půl století americká Cary Mullisová. Tento přecitlivělý test je schopen určit nosič genomu z jedné zdrojové molekuly obsažené v krvi, slinách nebo kůži.

Metoda PCR má velké vyhlídky, nachází se nejen v lékařství, ale také v genetickém inženýrství a kriminalistice. S jeho pomocí, klony a vytváření nových typů DNA, určit stupeň příbuznosti. Na epitelu nalezeném na místě činu zřídíte zločince.

Analýza PCR pro hepatitidu - co to je a proč to dělá?

Proč je analýza PCR nezbytná pro podezření na hepatitidu C, co to je?

Virus hepatitidy C - RNA obsahující virus, má 6 genotypů a až 500 podtypů. Ze všech hepatitid má tento virus nejvyšší mutační schopnost a překonává ochrannou bariéru imunitního systému. Z celkového počtu případů hepatitidy virus C způsobil 70% chronických případů a 30% cirhózy a rakoviny jater.

Podstata metody: část vyšetřovaného genu za pomoci speciálních enzymů a podmínek je nucena reprodukovat ve zkumavce. PCR analýza umožňuje určit kmen viru, bez něhož není možné provést účinnou léčbu: každý genotyp je odlišně citlivý na antivirové léky. Existují dva typy PCR:

Antivirová terapie potřebuje konstantní monitorování, aby bylo možné včas napravit léčbu, pro tyto účely se také používá polymerázová řetězová reakce.

Kvalitativní a kvantitativní PCR

PCR kvalitativní na hepatitidě C dává odpověď: Existuje kmen viru C v pacientově krvi a který z nich. Genotypizace je nezbytná k objasnění diagnózy, prognózy onemocnění a určení načasování léčby.

Podle přijatelné klasifikace je gen označen číslem a podtyp je označen malým latinským písmem.

Speciální léčivo založené na přírodních látkách

Cena drogy

Zpětná vazba na léčbu

První výsledky se projeví po týdnu užívání

Více o přípravě

Pouze jednou denně, vždy 3 kapky

Návod k použití

Dekódování tabulky genotypů viru C:

  • Genotyp 1a, 1b, 1c
  • Genotyp 2a, 2b, 2c, 2d
  • Genotyp 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotyp 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotyp 5 a
  • Genotyp 6 a

Nejběžnější genotypy jsou 1,2,3. V Rusku jsou 1a, 1b, 2 a 3 kmeny viru C.

Genotyp viru 1b je obtížněji léčen, než u ostatních, v 90% přechází do chronické formy, z nichž 30% se regeneruje do rakoviny nebo cirhózy jater.

Genotypy 2a a 3a mají stupeň chronizace 33-50%, jsou citlivější na antivirovou terapii.

Při potvrzení přítomnosti viru se kvantifikuje PCR pro hepatitidu C, která počítá počet molekul RNA v laboratorním vzorku pacienta.

Vysvětlení analýzy

Kvalitativní PCR analýza má dvě odpovědi:

PCR negativní znamená, že patogen ve vzorcích krve není detekován.
Pozitivní odpověď naznačuje opak: RNA jednoho nebo jiného genotypu viru S.

Pravděpodobnost spolehlivosti výsledku je 95%. Zbývajících 5% je chyba kvůli chybě osoby. Tato možnost je povolena vzhledem k vysokým požadavkům na provádění výzkumu:

  • pravidla pro skladování činidel;
  • příslušná kvalifikace zdravotnického personálu;
  • čistota biomateriálu.

Souprava PCR samotná má 100% diagnostickou přesnost.

Kvantitativní PCR RNA hepatitidy C vám umožňuje určit virovou zátěž na těle pacienta. Použití:

  • je specifikována fáze onemocnění (akutní, chronická);
  • je stanovena účinnost antivirové léčby;
  • potřeba biopsie jater je vyjasněna.

V některých případech pacient necítí žádné známky onemocnění, zatímco metoda PCR vykazuje infekci HCV. To znamená, že onemocnění je v rané fázi vývoje nebo v chronické formě. K objasnění diagnózy je zapotřebí více výzkumu, jak co nejdříve zahájit antivirovou léčbu.

Virová zátěž u hepatitidy C

Virové zatížení ukazuje aktivitu viru hepatitidy, jak aktivně dochází k jejímu rozmnožování.

Co to je?

Kvantitativní PCR na hepatitidě C se měří v mezinárodních jednotkách na ml nebo IU / ml, což znamená, kolik kopií ribonukleové kyseliny specifického kmene viru C bylo nalezeno v 1 ml testované krve.

Co je považováno za vysoké, jak nízké?

Analýza virové zátěže umožňuje stanovit přítomnost virové RNA v koncentraci 50 IU / ml. Virová zátěž je normální - to je, když není pomocí PCR detekována žádná molekula HCV RNA.

Tabulka virové zátěže:

  • nízká koncentrace od 600 IU / ml 3 x 104 IU / ml;
  • průměrná koncentrace od 3 * 104 IU / ml do 8 * 105Mm;
  • Vysoká - hladina vyšší než 8 * 105 IU / ml.

Nízká virová zátěž - je to signál, že léčba je správně zvolena a prognóza pro léčbu hepatitidy C je příznivá.

Vysoká koncentrace virových buněk že onemocnění je v akutní fázi. Krví pacienta je nebezpečným zdrojem infekce.

Virová zátěž, jejíž indikátory jsou na průměrné úrovni, charakterizuje buď chronickou fázi TUV, nebo může mít dva vývojové trendy: zvýšit nebo snížit.

Na jeho konci - za 6 měsíců se provádí kontrolní PCR.

Náklady na diagnostiku PCR

Následující příznaky by měly vyvolat obavy:

  • obecná slabost;
  • změna barvy kůže, oční sklera, výtok;
  • nevolnost;
  • snížená chuť k jídlu;
  • bolest ve svalech a kloubech;
  • tíha v pravém hypochondriu;
  • zvýšené hladiny AST a ALT v krvi.

Při kontaktu s infikovanými pacienty se v předoperačním období doporučuje také vyšetření hemodialýzou.

Veřejné klinické ordinace provádí krevní test PCR bez poplatku, pokud se k němu přistupuje odborník na infekční onemocnění nebo hepatolog.

Placené služby pro diagnostiku PCR jsou poskytovány ve všech hlavních ruských městech. Náklady závisí na typu testu, dostupném vybavení, načasování a dalších faktorech.

Kvalitativní analýza PCR v Moskvě a Petrohradu bude stát od 600 do 900 rublů. V regionech - od 300 do 800 rublů.

Definice virové zátěže hepatitidy C bude stát 17 000-22 000 rublů. U dalších typů infekcí je cena kvantitativní studie 1200-10000 rub.

Výhody a nevýhody metody PCR

Jaké jsou výhody metody polymerázové řetězové reakce v porovnání s jinými diagnostickými metodami?

  1. Široká nabídka aplikací. Pomocí PCR pomocí standardního vybavení můžete identifikovat jakýkoli virus.
  2. Přesnost detekce patogenů. Při použití různých kombinací enzymů a analytických technik se dosáhne 100% specifikace studie pro indikovanou infekci.
  3. Vysoká citlivost. Tato technika umožňuje detekovat přítomnost jedné molekuly viru v krvi.
  4. Účinnost. Kvalitativní analýza je připravena za několik hodin, kvantitativní - po dvou dnech.
  5. Diagnostika viru v inkubačním období. Při PCR se patogen nezjišťuje přítomností protilátek, jestliže již existuje imunitní reakce těla, ale před zahájením patologického procesu, což usnadňuje léčbu.

Nevýhody PCR jsou důsledkem jejích výhod:

  • Čistota testu vyžaduje nejvyšší stupeň čistoty, včetně vzduchu v laboratoři, aby "cizí" DNA nevstoupila do vzorku;
  • vysoké nároky na zaměstnance, provádění vzorkování a analýzy biomateriálu.

Pomocí diagnostiky PCR

Polymerázová řetězová reakce (PCR) v molekulární biologii se nazývá experimentální metoda detekce virů. Umožňuje významně zvýšit koncentraci určitých fragmentů nukleové kyseliny (DNA) ve vzorcích biologického materiálu, což umožňuje určit (rozpoznat) a počítat je.

Analýza se provádí následovně. Genetický materiál (vzorek krve), který potenciálně může obsahovat požadovaný gen, se zavede do zkumavky. Tam jsou také umístěny primery - chemicky syntetizované malé délky požadovaného genu.

Do nádoby je také přidána DNA nebo RNA polymeráza, která je schopna vytvořit řetězec nukleové kyseliny, který je zcela identický s původním řetězcem. Sada čtyř volných nukleotidů, speciální stavební materiál pro RNA nebo DNA, z nichž jedna obsahuje radioaktivní částice fosforu, se také zavádí do výsledné kompozice.

Výsledná směs se zahřeje na teplotu 95 až 96 ° C, kvůli níž se obě spirály DNA, které se v obvyklém stavu překrývají, rozplývají. Poté se preparát ochladí, v tomto okamžiku se primery připojují k požadované oblasti virového genomu, aniž by RNA (nebo DNA) znovu vytvořila dvojitou šroubovice.

Během chlazení polymeráza vyhledává volný řetězec nukleotidů. Pro fungování tohoto enzymu je nutný jediný řetězec nukleotidů. Vzhledem k tomu, že polymeráza klouže podél řetězce DNA (jako prsten pomocí lana), nemůže pracovat na dvojité šroubovice.

Poté se provádí opakovaný cyklus zahřívání, díky kterému jsou nukleotidové řetězce odděleny. Pro každý z těchto cyklů PCR se množství požadovaného genu hepatitidy ve vzorku zvyšuje v geometrické progresi a zbytek genetického materiálu se produkuje lineárně.

Po čištění roztoku nukleotidových zbytků a oddělení DNA řetězců parametrem molekulové hmotnosti od elektroforézy je snadné určit, zda požadovaný gen existuje ve zkušebním vzorku nebo ne.

Výhody PCR

Laboratorní studie používající metodu PCR umožňuje získat ještě více informací než jednoduše přítomnost RNA viru. Při stanovení parametru úrovně radioaktivního záření je možné určit, jaké množství genetického materiálu bylo původně obsaženo ve studovaném vzorku. V případě hepatitidy určit míru virové zátěže.

Další výhodou této metody je velmi vysoká citlivost CR reakce. Je mnohem vyšší než klasické metody detekce virů. V ideálním případě pro identifikaci požadovaného genu je pro PCR dostatečný pouze jeden virus ve vzorku.

Navíc PCR je zcela specifická. Jeho primery jsou vytvořeny tak, aby plně odpovídaly jedinečným částem požadovaných genů, které nemá žádná jiná sekvence. Obě otisky prstů jsou jedinečné a v každém genu existují jedinečné sekvence nukleotidů.

Kvalitativní analýza PCR

Kvalitativní analýza pouze odhaluje přítomnost viru v krvi. Tento test by měl být proveden u všech pacientů, u kterých bylo zjištěno, že mají v krvi protilátky proti hepatitidě C. Výsledkem může být pouze jedna ze dvou hodnot: "zjištěna" nebo "nebyla zjištěna". U zdravého člověka by norma (referenční hodnota) neměla být "zjištěna".

Existuje také speciální interpretace takových výsledků provedeného kvalitativního výzkumu:

  • Výsledek je "objeven". To znamená, že ve vzorku biologického materiálu, se kterým bylo nalezeno RNA fragmentu, který je specifický pro viru hepatitidy C V důsledku toho je skutečnost, že u pacienta s infekci virem hepatitidy B s C-li výsledek kvalitativní PCR je „objevil“, znamená to, že virus opakování a v tomto okamžiku infikuje nové jaterní buňky v těle.
  • Výsledek je "nezjištěn". Takové rozhodnutí ukazuje, že ve vzorku biologického materiálu získaný fragment RNA není v laboratoři, která je specifická pro HCV RNA buď stejné koncentraci patogenu infekce ve vzorku byla pod hranicí citlivosti testu detekován.

V akutní fázi RNA viru hepatitidy C mohou kvalitativní studie s použitím PCR techniky odhalit po 1-2 týdnech bezprostředně po infekci těla, tj. Dlouho před vznikem protilátek proti samotné hepatitidě.

Nespolehlivé výsledky analýz takového šetření lze získat u:

  • kontaminovaný biomateriál;
  • přítomnost heparinu v krvi pacienta;
  • přítomnost ve vzorku chemických nebo bílkovinných látek (inhibitorů), které ovlivňují různé složky PCR.

Pro kvalitativní analýzu PCR není nutná zvláštní příprava pacienta pro studium. Venózní krev se používá jako materiál.

Hodnocení výsledků

Kvalitativní testy PCR mají určitý stupeň citlivosti a v závislosti na přesnosti výzkumu a úroveň vybavení v laboratoři se může pohybovat mezi 10 a 500 IU / ml.

To znamená, že pokud je virus ve vzorku krve přítomen ve velmi nízké koncentraci (nižší než prahová citlivost daného laboratoře), pacienta pacienta lze určit jako "nezjištěný". Z tohoto důvodu je při provádění kvalitativní analýzy PCR s nízkou úrovní viremie (nízká koncentrace viru) například u pacientů podstupujících antivirovou terapii velmi důležité znát práh citlivosti tohoto diagnostického systému.

Varianty diagnostických systémů

Pro kontrolu virologické odpovědi se doporučuje antivirová léčba používat diagnostické systémy s prahem citlivosti minimálně 50 IU / ml. Tato kritéria jsou splněny, například: analyzátory COBAS Ampicolor HCV test (c přesnost 50 IU / ml) a RealBest HCV RNA (s citlivostí 15 IU / ml).

Podle doporučení WHO pro vytvoření konečné diagnóze hepatitidy C, musí být založeno pouze na základě trojitého detekce RNA viru ve vzorcích séra od pacienta s žádnými jinými druhy hepatitidy markeru.

Kromě metod PCR se pro detekci HCV RNA u pacientů používá také studie TMA (metoda transkripční amplifikace). Má nejlepší citlivost (5 až 10 IU / ml), ale u nás tato metoda testování ještě není příliš častá.

Rozsah zjištěných změn virů

Toto kvalitativní stanovení přítomnosti RNA viru hepatitidy C v séru umožňuje určit několik genotypů tohoto viru. V současné době vede věda více než šest genotypů tohoto viru, stejně jako asi 10 podtypů onemocnění.

Vírusy 1, 2, 3 genotypů jsou běžné v naší zemi. Laboratoře mohou identifikovat následující genotypy: 1a a 1b, 2a, 2b a 2c, a 3, 4, 5a a 6 bez ohledu na podtypy. Pro všechny modifikace viru je specificita detekce 100%.

Kvantitativní analýza PCR

Pomocí kvantitativního testu PCR se určí koncentrace viru hepatitidy ve vzorcích krve (virové zátěž). Tento test viremie (koncentrace viru) umožňuje určit počet jednotek specifického genetického materiálu (nejvíce virové RNA), který je detekován v určité míře. V tomto případě určete jeho koncentraci v 1 ml, což odpovídá 1 cu. viz

Kvantitativní parametry analýzy jsou vyjádřeny na obrázcích pro toto použití jako jednotky měřicích mezinárodních jednotek (IU) na mililitr (ml), označené jako ME / ml. Nyní v některých laboratořích může být množství viru stanoveno v jiných jednotkách: počet kopií na ml je označen jako kopie / ml.

  • Na hepatitidě C se taková kvantitativní analýza PCR provádí těsně před zahájením léčby. Pak na 1., 4., 12. a 24. týdnu. Hodnocení v 12. týdnu je orientační, umožňuje určit účinnost terapie.
  • Příprava na analýzu. Pro kvantitativní analýzu PCR není nutná zvláštní příprava pacienta pro studii. Půl hodiny před odběrem byste neměli kouřit. Venózní krev se používá jako laboratorní materiál.

Hodnocení výsledků

U různých laboratorních testovacích systémů existují pro tento ukazatel různé přepočítací koeficienty v IU / ml. V průměru se používá konverzní parametr, ve kterém jsou 4 kopie / ml = 1 IU / ml. To znamená, že pokud laboratoř dává výsledek analýzy PCR 2,4 * 10 6 kopií / ml, pak by měl být tento parametr rozdělen na 4 a dostaneme 6 x 105 5 IU / ml.

Vysoká zátěžová hladina 800 000 IU / ml je považována za vysokou, což je přibližně ekvivalentní indexu 3 000 000 kopií / ml. Nízkou viremii podle některých autorů odpovídají parametry kvantitativní PCR nižší než 400 000 IU / ml.

V důsledku kvantitativního testu nelze konečné výsledky doručit ve formě digitální hodnoty, ale: "pod měřicím rozsahem" nebo "nezjištěným".

  • Hodnocení: "pod měřicí rozsah". To naznačuje, že kvantitativní test nedokázal detekovat virovou RNA viru hepatitidy C, ale samotný virus je přítomen v těle ve velmi malých koncentracích. To je indikováno dodatečným kvalitativním testem, který potvrzuje přítomnost viru.
  • Hodnocení: "nezjištěno". Tento výsledek naznačuje, že kvantitativní test nezjistil virus ve vzorku RNA.

Parametr virové zátěže určuje nejprve stupeň infekčnosti onemocnění, úroveň "infekčnosti" pacienta. Čím vyšší je koncentrace viru pacienta, tím větší je pravděpodobnost jeho přenosu jiným lidem. Například při sexu se špatnou osobou nebo vertikální cestou. Takový kvantitativní indikátor také pomáhá určit účinnost léčby pacienta.

Provádění kvantitativní analýzy PCC je důležité pro antivirovou terapii, vyhodnocení jejího úspěchu a plánování trvání kurzu. Takže s rychlou reakcí těla na léčbu a nízkým stupněm viremie může být trvání terapie sníženo.

Při pomalém snížení kvantitativního parametru PCR by měla být antivirová léčba prodloužena nebo upravena. Pokud je úroveň virové zátěže nízká, pak je to příznivý faktor terapie, je-li vysoká, pak je použitá metoda léčby neúčinná a drogy nebo metody jejich užívání by měly být změněny.

PCR testy pro přesnou diagnostiku hepatitidy C

Pro diagnostiku "chronické virové hepatitidy C (CVHC)" je zapotřebí komplexní lidské vyšetření, které zahrnuje klinické, laboratorní a instrumentální studie. Důležitá z hlediska diagnózy pro stanovení správné diagnózy je metoda PCR - polymerázová řetězová reakce.

Co ukazuje tato analýza a proč je potřeba?

Pomocí této laboratorní metody je detekována RNA viru hepatitidy C v lidské krvi. Spolu s enzymovou imunotestou (ELISA) protilátek proti viru se k diagnostice CVHC a genotypu jejího patogenu používá PCR. Tato studie je jednou z nejnovějších metod laboratorní diagnostiky. Jeho spolehlivost ve CVHC je více než 97%, což je považováno za velmi dobrý ukazatel pro výzkum.

Existují tři PCR krevní testy pro CVH: kvalitativní, kvantitativní a genotypizaci viru. První studie (kvalitativní analýza) o viru ji detekuje v krvi, a proto se používá pouze pro diagnostiku.

Druhá (kvantitativní) studie určuje stupeň virové zátěže na těle, takže se používá k monitorování účinnosti léčby.

Třetí PCR (genotypizace) objasňuje diagnózu, stanovuje genotyp viru, což je velmi důležité pro správnou antivirovou léčbu.

Podstatou technologie polymerázové řetězové reakce je použití enzymů, které opakovaně množí genetický materiál patogenu v biomateriálu. Během této replikace se zkumavka s krví několikrát zahřívá a ochladí se na teplotu potřebnou k urychlení enzymatické reakce. V důsledku těchto manipulací se počet virových genomů mnohonásobně množí, což umožňuje detekci i v minimálním množství.

Diagnostika PCR má mnoho výhod oproti jiným laboratorním testům:

  • vysoká citlivost - 97-98%;
  • zaručuje analytickou specifičnost (identifikuje přesně patogen, který se nachází, nikoliv jeho související kmen);
  • rychlost (pro dosažení závěru není nutné více než 2 dny).

Tři typy PCR testů

Kvalita PCR analýza je předepsána pro všechny pacienty, kteří mají ELISA s protilátkami proti HCVG viru. Po kvalitní PCR lze získat dvě varianty odpovědi: "RNA je detekována" nebo "RNA není detekována". K detekci minimálního množství viru v krvi jsou potřebné testovací systémy s citlivostí alespoň 50 IU / ml. Pokud je koncentrace viru v krvi pacienta menší, než diagnostika může určit, výsledek studie může být falešně negativní. Aby se zabránilo takové diagnostické chybě, musí být diagnostické laboratoře PCR opatřeny vysoce citlivými zkušebními systémy. V laboratoři "Invitro" se například používají testy s citlivostí 15 IU / ml. Informace o citlivosti zkušených laboratorních pracovníků musí poskytnout pacientům a lékařům první požadavek.

Kvantitativní Analýza PCR určuje stupeň viremie, tj. Koncentraci patogenu v krvi, virovou zátěž. Výsledek této studie, na rozdíl od kvalitativní PCR, je vyjádřen v číslech, například 2 × 10 × 6 IU / ml, což znamená 2 miliony mezinárodních jednotek na 1 ml krve. Některé laboratoře používají jiný ukazatel - počet kopií / ml. Tyto dva ukazatele lze snadno převést: 1 mezinárodní jednotka se rovná 4 kopiím RNA. Takže 2 x 10 x 6 IU / ml by znamenalo, že v krvi pacienta bylo nalezeno 8 × 10 x 6 kopií virové RNA v 1 ml, tj. 8 milionů kopií v 1 ml krve.

Genotypizace Je definice jednoho ze šesti genotypů viru. Genotyp příčinného činidla závisí na klinickém obrazu, rychlosti vývoje komplikací z jater a na prognóze dalšího života pacienta. Genotyp viru je velmi důležitý již ve fázi diagnostiky, protože kombinace léků a trvání terapeutického kursu, který bude pacientovi přidělen, závisí na jeho správném stanovení.

Nicméně i tento zdánlivě "ideální" laboratorní výzkum má své nevýhody:

  • v průběhu výzkumu dochází k replikaci genetického materiálu všech patogenů, dokonce i neživých, což může způsobit deformaci výsledku. Proto k provedení kontroly účinnosti s PCR se opakovaná analýza provádí nejdříve 2 měsíce po předchozím, takže mrtvé viry mohou "opustit" tělo pacienta;
  • část virového genomu, která je určena testovacími systémy, může být teoreticky přítomna v jiných virech nebo mikroorganismech, takže existuje pravděpodobnost falešně pozitivní odpovědi;
  • viry se rychle mění. Někdy je míra a stupeň mutace viru tak vysoký, že testovací systém přestává chytit svůj genom. V důsledku toho je možný falešně negativní výsledek.

Pro zmírnění těchto nevýhod, výrobci testovacích systémů laboratorní diagnostiky PCR se neustále plnění jejich testů, včetně křížové reakce a citlivost na genotypu viru.

Jak udělat analýzu PCR pro hepatitidu C?

Aby mohla být studie PCR spolehlivá, je třeba přísně dodržovat pravidla přípravy pro její chování:

  • Studie se provádí na prázdném žaludku (glukóza, tuky, minerály, které vstupují do krve z potravy, mohou ovlivnit rychlost a kvalitu enzymové reakce);
  • mezera mezi posledním jídlem a výběrem krve pro analýzu by měla být nejméně 8 hodin;
  • v předvečer studie je zakázáno užívat alkohol a jíst tučné pokrmy, jejichž doba je prodloužena;
  • den před odjezdem do laboratoře by se nemělo vyhnout silnému fyzickému a emocionálnímu stresu;
  • až do doby odběru vzorků krve nedoporučujeme kouřit.

Aby se zabránilo výskytu falešných závěrů, musí potenciální pacient přijít do laboratoře o něco dříve, než bude provedeno odběr krve. Trvá 15-20 minut, než se člověk usmrtí, uklidní. Adrenalin, přítomný v krvi po rychlém procházce, může ovlivnit výsledek vyšetření.

Pokud pacient podstoupí nějaké léky k analýze, měl by o tom informovat lékaře. Je možné, že některé z nich budou muset být nějakou dobu opuštěny (pokud je to možné).

Výsledky PCR analýzy pro hepatitidu C

Lékař-laboratoř laboratoře laboratoře, která provedla analýzu, se zabývá rozlíšením výsledků. Dekódování je definice odchylky získaného výsledku od normy. Míra indikátorů je stanovena přímo výrobcem zkušebního systému, který laboratoř používá pro diagnostiku. Proto není překvapující, že v některých laboratořích je virální zátěž stanovena v IU / ml a v jiných - v kopii / ml.

Po přijetí závěru musí být schopen správně interpretovat. Interpretace výsledků studie by se měla zabývat ošetřující lékař pacienta s hepatitidou C teprve po objektivní, instrumentální a laboratorní vyšetření pacienta, lékař může získat dostatek údajů k příslušnému interpretaci výsledků PCR.

Hodnocení kvalitativní analýzy zpravidla nezpůsobuje potíže ani u pacientů. Výsledkem může být pouze jeden: "zjištěný" nebo "nezjištěn". Druhá z nich je norma.

Ukazatele kvantitativní analýzy jsou obtížnější interpretovat. Ukazuje stupeň virové zátěže pacienta. Dokonce ani u hepatologů neexistuje konsensus o tom, jak zacházet s detekovanou viremií. Většina lékařů má tendenci věřit, že by mělo být zváženo vysoké zatížení vyšší než 8 × 10 * 5 IU / ml. Velmi vysoké zatížení je považováno za více než 1 × 10 × 7 IU / ml a nízké zatížení je nižší než 4 × 10 × 5 IU / ml.

Stupeň virové zátěže naznačuje virulenci (agresivitu) viru: čím více jeho množství v krvi, tím rychleji se mohou vyvinout komplikace z jater. Vysoká koncentrace viru v krvi těhotné ženy zvyšuje pravděpodobnost jeho proniknutí přes hematoplacentární bariéru k plodu. Viremie také ovlivňuje účinnost léčby: při nízkých počtech je účinnost léčby vyšší než u vysoké.

Aby byla jistá spolehlivost analýzy PCR pro hepatitidu C, je třeba upřednostňovat pouze ty laboratoře, které se osvědčily. Cenová politika v tomto případě by neměla hrát primární roli.

Studie PCR pro hepatitidu C: typy, indikace, přepis

Virová hepatitida C je vážné onemocnění, které se objevuje při poškození jater. U osmdesáti procent pacientů přechází do chronické formy. Vírus se množí v jaterních buňkách - hepatocytech - a způsobuje jejich smrt. Mrtvé tkáně jsou nahrazeny ložisky pojivové tkáně, fibróza se vyvíjí.

S rozvojem fibrózy jater, je schopen plnit svou funkci, začíná cirhóza, což je nebezpečné pro jeho komplikací: zvyšující se tlak v portální žíle, gastrointestinální krvácení, poruchy srážlivosti krve, mentální změny kvůli poškození mozku jádra toxických produktů.

Příčinou onemocnění je infekce virem z rodiny Flaviviridae, což je typ viru RNA. To znamená, že genetický materiál, kterým jsou syntetizovány proteiny patogenu, je kódován molekulou ribonukleové kyseliny. Infekce nastává skrze krev, sexuálně a od těhotné ženy až po plod. Bohužel mezi infekcí a počátkem produkce protilátek může proběhnout poměrně velká doba - od dvou týdnů do šesti měsíců. To neumožňuje stanovení infekce metodou enzymového imunoanalýzy a zahájením léčby v časných stádiích.

Co je analýza PCR?

PCR je metoda molekulární analýzy, která umožňuje detekci genetického materiálu patogenu již v prvním týdnu po infekci za použití polymerázové řetězové reakce. Studie má vysokou specificitu, přesnost a umožňuje nejen stanovit přítomnost nebo nepřítomnost viru, ale i jeho koncentraci a genotyp.

Pro studii si vezměte pacientovu krev, v níž se může potenciálně nalézt RNA viru. Krev se přidá primerů - uměle syntetizované krátké délce části požadovaného genu a RNA polymerázu - speciální enzym, který násobí množství genetického materiálu patogenu. Pomocí speciálního přístroje se provádí několik cyklů vytápění a chlazení. Materiál je pak analyzován a porovnán se známými virovými geny, na základě kterých se dospěje k závěru o přítomnosti nebo nepřítomnosti infekce.

Typy PCR analýzy pro hepatitidu C

Existují tři typy analýzy PCR:

  1. Kvalitativní analýza PCR. První fáze studie. Umožňuje vám identifikovat genetický materiál viru v krvi.

  • Kvantitativní analýza PCR. Umožňuje určení virové zátěže - koncentrace genetického materiálu patogenu v jednom mililitru krve. Tato studie se provádí před zahájením léčby a poté v první, čtvrté, dvanácté a (pokud je kurz dlouhý) ve dvacátém čtvrtém týdnu léčby, aby se vyhodnotila jeho účinnost.

  • Genotypizace. Příčinný faktor hepatitidy C se často a rychle mění. Na planetě bylo nalezeno sedm variant genotypu tohoto viru. V Rusku jsou společné první, druhé a třetí typy. Každý z genotypů má jinou rezistenci k terapii, například účinnost léčby prvního typu je šedesát procent a pro druhý a třetí dosahuje osmdesát pět. Proto, aby bylo možné vybrat vhodná léčiva a předepsat dostatečnou dobu trvání léčby, je nutné přesně určit, jaký typ viru je pacient infikován.
  • Indikace pro analýzu PCR pro hepatitidu C

    Studie PCR je předepsána v následujících případech:

    • kontakt s nemocnou, která by mohla vést k infekci;
    • pozitivní imunoanalýza spojená s enzymem;
    • příznaky jaterní cirhózy: změny velikosti jater, zvětšení sleziny, výskyt podkožního žilního plexu na břiše;
    • výskyt příznaků poškození jater: bolesti na pravé straně břicha, zožnění kůže;
    • zvýšená aktivita ALT a AST v biochemické analýze krve;
    • před zahájením léčby k určení virové zátěže;
    • sledovat účinnost antivirové léčby;
    • po dokončení léčby k monitorování relapsu;
    • v přítomnosti diagnostikované hepatitidy B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater.

    Dekódování studie PCR pro hepatitidu C

    Dekódování analýzy PCR a enzymového imunoanalýzy pro hepatitidu C by mělo být řešeno specialistou na hepatologii nebo na infekční nemoci. Analýza výsledků PCR je nezbytná v kombinaci s biochemickým vyšetřením krve, biopsií a ultrazvukem. Pouze kvalifikovaný lékař bude schopen analyzovat výsledky studií a na základě nich předepsat správnou léčbu.

    Dekódování kvalitativní analýzy.

    Genetický materiál patogenu byl nalezen v analyzovaném biologickém materiálu. Infekce je potvrzena.

    Neexistuje žádná infekce nebo množství RNA patogenu je pod hranicí citlivosti.

    Dekódování kvantitativní analýzy.

    Normální postava pro zdravé lidi. To znamená, že v testovaném materiálu není přítomna žádná RNA hepatitidy C nebo její koncentrace je pod prahem citlivosti studie.

    Koncentrace RNA je nižší než rozsah kvantifikace. Takové výsledky jsou interpretovány velmi opatrně, korelují je s údaji jiných studií, často provádějí druhou studii.

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za nízkou. Obvykle snížení množství viru znamená, že terapie je úspěšná.

    Více než 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za vysokou.

    Více než 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Množství RNA je nad horní hranicí rozsahu kvantifikace. Závěry o stupni virové zátěže s tímto výsledkem nejsou možné. Obvykle se v takových případech opakuje test s ředěním vzorku krve.

    Dekódování genotypizace.

    Byla detekována RNA specifického genotypu

    V biomateriálu je detekován virus hepatitidy C specifického genotypu a podtypu. Výsledek je kódován římskými číslicemi a latinkou, například - 1a, 2b. Existuje sedm genotypů a šedesát sedm podtypů, ale v Rusku existují pouze tři první typy.

    RNA virové hepatitidy C byla detekována

    V krvi se RNA nachází v Rusku vzácným genotypem, který nelze přičíst prvnímu, druhému nebo třetímu typu. Je zapotřebí více výzkumu.

    Tento výsledek naznačuje, že pacient je zdravý, nebo že úroveň RNA patogenu je příliš malá.

    Situace je možná, pokud je analýza PCR pro hepatitidu C negativní a enzymový imunotest detekuje protilátky proti viru. To znamená, že pacient měl v akutní formě hepatitidu C a uzdravil se. Přibližně dvacet případů infekce vede k spontánnímu vyléčení, pokud tělo pacienta vykazuje dostatečnou odolnost proti infekci.

    Navzdory skutečnosti, že PCR je velmi přesná analýza, její výsledky mohou být zkresleny v následujících situacích:

    • krev byla transportována do laboratoře za nevhodných podmínek, teplotní režim byl porušen;
    • byl vzorek biomateriálu kontaminován;
    • v krvi byly zbytky stop heparinu a dalších antikoagulancií;
    • Ve zkoumané látce byly inhibitory - látky, které zpomalují nebo zastavují polymerázovou řetězovou reakci.

    Výhody PCR v porovnání s jinými metodami

    1. Diagnóza v počátečních fázích. PCR detekuje genetický materiál vyvolávajícího onemocnění. Pomocí analýzy imunofluorescence lze stanovit pouze imunoglobuliny - látky, které organismus produkuje v reakci na infekci. V případě infekce způsobené hepatitidou C může být interval mezi infekcí a nástupem imunitní odpovědi několik týdnů a měsíců, kdy bude ELISA neúčinná. PCR poskytne odpověď už v prvním týdnu po infekci.

  • Nízká pravděpodobnost chyby. Ve studovaném materiálu se určuje genetický materiál, který je charakteristický pouze pro jeden typ patogenů. To vám umožňuje vyloučit falešné výsledky. Při ELISA jsou možné chyby, protože stejný druh protilátek lze uvolnit proti různým virům - takové protilátky se nazývají zkřížené reakce.

  • Vysoká citlivost. PCR může detekovat RNA patogenu i v minimálních množstvích. To umožňuje identifikovat skryté infekce.
  • Jak se připravit na dodávku krve pro výzkum PCR

    Pro analýzu PCR se pro hepatitidu C sbírá venózní krev. Obvykle se z pacientovy žíly najednou odeberou dvě části krve: první se odešle pro PCR a druhá pro ELISA. To se provádí, aby bylo možné přesněji posoudit, jak špatně je pacient infikován tímto virem a jak proti němu bojuje imunita.

    Obvykle jsou pro pacienta vyžadována následující pravidla:

    • vyšetření krve se odebere ráno;
    • přestávka mezi posledním jídlem a dodávkou krve by měla být osm až deset hodin;
    • dva nebo tři dny před analýzou se musíte vzdát smažených a mastných potravin a alkoholu;
    • po dobu čtyřiadvaceti hodin před analýzou by se pacient měl vyhnout fyzické námaze: nemají váhy, nechodí do tělocvičny nebo do bazénu.

    Náklady na krevní test a PCR pro hepatitidu C

    Hepatitida C je zánětlivá patologie, při níž jsou postiženy jaterní buňky. Onemocnění se rozvíjí v důsledku proniknutí viru hepatitidy C (HVC) do lidského těla.

    Forma onemocnění může být akutní nebo chronická.

    Nejčastěji se příznaky akutní formy nemoci, většina pacientů nejsou k dispozici, někdy nemoc je doprovázena bolestí v břiše, snížená výkonnost, zvýšená únava, nechutenství porucha, tmavý odstín moči, zabarvení stolice, žloutnutí kůže a sliznic, bolesti kloubů. Tyto příznaky se obvykle objevují po 6-8 týdnech po infekci, ale může také objevit v průběhu šesti měsíců.

    S rozvojem takových jevů je nutné aplikovat na zdravotnickou instituci a podrobit se komplexnímu vyšetření celého organismu. V rámci lékařské prohlídky se provádí krevní test na hepatitidu C.

    Dnes s pomocí moderních diagnostických technik je možné identifikovat tuto patologii v počáteční fázi vývoje, což významně zvyšuje šance na úplné vyléčení této nemoci.

    Analýza hepatitidy C je povinná pro následující skupiny lidí:

    • ženy v období nesení dítěte;
    • osoby se známkami hepatitidy;
    • zaměstnanci zdravotnických zařízení;
    • potenciální dárci orgánů a krve;
    • drogově závislých, HIV infikovaných osob, osob, které vedou neporušený intimní život.

    Seznam potřebných studií

    Jaké testy mám provést u hepatitidy C? Pro přesnou diagnostiku onemocnění, identifikaci příčin a určení stavu jaterního parenchymu je nutné provést následující studie:

    • obecná analýza moči a krve;
    • biochemická analýza krve;
    • PCR analýza;
    • krevní test na detekci protilátek proti HVC;
    • krevní test dostupných protilátek proti vlastním jaterním buňkám;
    • jaterní biopsii.

    Výklad krevního testu pro hepatitidu C provádí odborník. Zvažme jednotlivé metody výzkumu podrobněji a také pochopíme, jaký druh analýzy hepatitidy C je nejpřesnější.

    Obecná analýza

    Při provedení obecné krevní testy na hepatitidu C můžete posoudit stav pacienta. Změny v krevním obraze nejsou vnímány jako specifické příznaky hepatitidy, ale s touto chorobou existují porušení jako:

    • koncentrace hemoglobinu, destiček a leukocytů se snižují;
    • zvyšuje se obsah lymfocytů;
    • koagulace krve je narušena;
    • rychlost sedimentace erytrocytů (ESR) se zvyšuje.

    Obecná analýza moči umožňuje detekovat ve svém složení urobelin - pigment žluči, který se objevuje v moči jako důsledek poruchy jater.

    Biochemická analýza

    Biochemická analýza krve u hepatitidy C nám umožňuje identifikovat takové porušení jako:

    • zvýšil obsah jaterních enzymů (alanin transamináza - ALT a aspartátaminotransferáza - AST), které vstupují do krevního řečiště s poškozením hepatocytů. V normálním stavu by tyto ukazatele u mužů neměly být vyšší než 37 IU / l, u žen - ne vyšší než 31 IU / l. Zvýšená koncentrace ALT a AST u hepatitidy C, která je asymptomatická, je často jediným příznakem této nemoci. Kromě toho hladina v krvi zvyšuje hladinu glutamyltranspeptidázy alkalické fosfatázy (normálně nejvýše 150 IU / l).
    • je překročen obsah bilirubinu (jak celkový, tak přímý) v krvi. Pokud je hladina žlutého pigmentu v séru vyšší než 27-34 umol / l, dochází žloutenka (až do 80 mol / l v jednoduchým způsobem, 86-169 pmol / l - mírné, nad 170 mmol / l - závažná forma).
    • Snížila úroveň albuminů, koncentrace gama globulinů se naopak zvýšila. Gama globuliny se skládají z imunoglobulinů - protilátek, které chrání tělo před patogeny.
    • zvýšená koncentrace triglyceridů v krvi.

    PCR studie

    Pomocí metody PCR lze diagnostikovat patogen. Provedení této analýzy umožňuje detekovat virus v krvi, i když jeho množství je minimální. Analýza PCR pro hepatitidu C vám umožní identifikovat stávající infekci v krvi po uplynutí 5 dnů od doby infekce, tj. Dlouho před objevením protilátek.

    Pokud je výsledek krevní testu na hepatitidu C metodou PCR pozitivní, znamená to přítomnost aktivní infekce v těle. Pomocí této metody lze provést kvalitativní a kvantitativní studium HVC RNA.

    V průběhu kvalitativní analýzy PCR pro hepatitidu C je možné detekovat existující virus v lidském těle.

    Takový diagnostický postup se provádí, pokud je v krvi zjištěna anti-HVC.

    Přepis analýzy pro hepatitidu C obsahuje informace, že infekce v těle je buď detekována, nebo není detekována. V normálním stavu nejsou patologické látky v krvi detekovány.

    Pokud analýza hepatitidy C dává pozitivní výsledek, znamená to, že patogenní mikroorganismus je kontinuálně rozdělen a ovlivňuje jaterní buňky.

    Výsledky takové analýzy mohou být nespolehlivé, je možné v následujících případech:

    • kontaminace použitého biomateriálu;
    • pokud je v krvi heparin;
    • v přítomnosti chemických nebo bílkovinných látek (inhibitorů) v zkoumaném biomateriálu, které ovlivňují prvky PCR.

    Kvantitativní analýza pro hepatitidu C poskytuje informace o množství viru obsaženého v krvi, tj. Určuje virovou zátěž. Tento termín znamená množství HVC RNA přítomné v krvi (např. 1 ml). Při interpretaci kvantitativní analýzy hepatitidy C je tato hodnota vyjádřena v digitálním ekvivalentu měřeným v IU / ml.

    Krev pro PCR u hepatitidy C se užívá před terapeutickými opatřeními. Po analýze je provedena v 1, 4, 12 a 24 týdnech. Studie ve 12. týdnu je orientační a provádí se k posouzení účinnosti probíhajících léčebných postupů.

    Pokud je analýza hepatitidy C v těhotenství pozitivní a virové zatížení je překročeno, riziko přenosu patogenů z nemocné matky na dítě se několikrát zvyšuje. Také při zvýšených hodnotách virového zatížení je provádění terapeutických opatření obtížné.

    Podle analýzy hepatitidy C, pokud je virální zátěž vyšší než 800 000 IU / ml, pak je vysoká. Pokud jsou hodnoty nižší než 400 000 IU / ml, je úroveň virové zátěže považována za nízkou.

    Analýza hepatitidy C pomocí metody PCR je považována za nejpřesnější a má několik výhod oproti dalším možnostem výzkumu, a to:

    • přímou diagnózu patogenu. Při provádění tradičních studií je stanovena přítomnost proteinových markerů, které jsou produkty vitální aktivity patogenních látek. Říká jen, že infekce je přítomna v krvi. Když se analýza hepatitidy C provádí pomocí metody PCR, je možné určit typ příčinného činitele nebezpečné patologie.
    • specifičnosti metodiky. Během tohoto postupu je v biomateriálu identifikována jedinečná oblast DNA, která odpovídá pouze jednomu typu patogenu. To umožňuje minimalizovat pravděpodobnost získání nespolehlivých výsledků.
    • vysoká citlivost. Při analýze PCR lze detekovat minimální množství viru. To je důležité, pokud jsou identifikovány podmíněně patogenní látky, které jsou hrozbou pouze v případě, že je jejich úroveň zvýšena.
    • při použití této techniky lze v jednom vzorku biomateriálu detekovat několik patogenů.
    • je možné detekovat skryté infekce. Kromě toho vám analýza umožňuje diagnostikovat patogeny, které žijí uvnitř buněk a mají vysokou antigenní variabilitu.

    Pokud jsou výsledky studie pozitivní, pak jsou stopy viru nalezeny v biomateriálu, pak síť v těle má infekci.

    Negativní analýza PCR pro hepatitidu C znamená, že v biomateriálu nejsou žádné stopy infekce.

    Imunologické vyšetření

    Tato metoda vám umožňuje identifikovat protilátky proti všem typům viru hepatitidy, stejně jako protilátky proti jaterním buňkám vašeho těla, které jsou podporovány rozvojem autoimunitní hepatitidy.

    Výsledky získané během studie jsou relevantní po dobu 3 měsíců, pak byste měli znovu podat krev na hepatitidu C.

    Je také možné provádět expresní výzkum pomocí speciálních testovacích proužků. Tato analýza umožňuje stanovit protilátky proti viru v krvi a slinách. Takový postup lze provést nezávisle doma.

    Biopsie jater

    K provedení takové analýzy se provede prvek jaterního parenchymu a provede se histologická studie výsledného biomateriálu. To nám umožňuje posoudit stav orgánu: identifikovat zánětlivé, nekrotické ložiska, stadium fibrózy a podobně.

    Dnes se používají testy, které nahrazují histologickou analýzu jaterního parenchymu.

    Pro hodnocení stupně poškození jater a intenzity zánětu použijte specifické biomarkery žilní krve. Pomocí funkce Fibrotest je možné posoudit rozsah šíření fibrózních tkání.

    Při provádění testu Actitest lze získat informace o intenzitě patologických procesů v jaterním parenchymu. Pomocí Steatotestu můžete diagnostikovat tukovou degeneraci jaterní tkáně a posoudit stupeň tohoto procesu. Fibromax se skládá ze všech výše uvedených testů a může zahrnovat některé další studie.

    Příprava na studium

    Jaké testy se provádějí pro hepatitidu C a jak se provádí tento typ výzkumu, zjistili jsme. Je stejně důležité vědět, jak se připravit na analýzu.

    Chcete-li získat spolehlivé výsledky, doporučujeme dodržovat následující požadavky:

    • Analýzy týkající se hepatitidy C by měly být podávány ráno, na prázdném žaludku. V poslední době byste měli jíst nejméně 8 hodin před testem.
    • Odběr vzorků biomateriálu lze provést ve dne nebo večer. V takovém případě je důležité, aby mezi posledním jídlem a analýzou proběhlo nejméně 5-6 hodin.
    • Před donášením krve do hepatitidy C, čaje, kávy, džusu nebo jiných nápojů je třeba vyřadit, je povolena pouze voda.
    • 48 hodin před zahájením studie je nutné vyloučit spotřebu mastných, smažených potravin a nápojů obsahujících alkohol.
    • Nejméně hodinu před provedením testu se musíte zdržet kouření.
    • Analýzu neprovádějte bezprostředně po ultrazvuku, instrumentálním, radiologickém vyšetření, masáži nebo fyzioterapii.
    • den před zahájením studie, aby se vyloučilo užívání léků a intenzivní fyzická aktivita. Emoční stres je také kontraindikován.
    • 15 minut před testem se doporučuje držet v klidném stavu.

    Postup odběru vzorků krve

    Kde projít test na hepatitidu C? Sběr biomateriálu pro další výzkum se provádí v laboratoři zdravotnického zařízení nebo v domě pacienta.

    Krev z žíly se užívá následovně:

    • S pomocí speciálního svazku zabaleného kolem předloktí pacienta je přerušen tok krve žil. Díky takovým manipulacím se žíly naplní krví a budou znatelnější, což výrazně usnadní proces vkládání jehly.
    • Oblast pokožky, kde bude jehla zavedena, je opatrně ošetřena alkoholem nebo kapalinou obsahující alkohol.
    • Jehla je opatrně vložena do žíly a potom je k ní připojena zkumavka speciálně navržená pro sběr krve.
    • ihned poté, co je jehla vložena do žíly, vytlačovací krunýř je odstraněn z pacientovy ruky.
    • po získání potřebného objemu krve pro analýzu je jehla postupně odstraněna z žíly.
    • musí být v místě injekce aplikován sterilní vaty nebo gázový tampón ponořený do alkoholu.
    • aby se zabránilo nástupu hematomu, měl by se tampón stlačit s určitou námahou na oblast zasunutí jehly, ohýbat rameno u loketního kloubu a držet ho několik minut. Takové akce také pomáhají rychle zastavit krev.

    Vzhledem k dobré technice interní administrace je tento postup absolutně bezpečný a čitelný neznamená bolestivé pocity.

    Ve vzácných případech je po odběru vzorků krve možný opuch žíl. Tento jev se nazývá "flebitida". Problém bude zmírněn kompresí (ne horké), měl by být aplikován na zduřené oblasti pokožky několikrát denně.

    Mohou se vyskytnout určité problémy i v případě poruchy krvácení. Užívání aspirinu, warfarinu a jiných léků k ředění krve může vyvolat krvácení. Proto před provedením analýzy musíte odmítnout užívání jakýchkoli léků. Pokud nelze léčbu zrušit, měli byste o tom informovat odborníka.

    Termíny a ceny

    Kolik analýzy se provádí u hepatitidy C? Výsledky krevního testu na hepatitidu mohou být připraveny během několika hodin a během několika dní (obvykle ne více než 8 dní). Doba trvání přípravy výsledků závisí na typu viru a zvolené metodě analýzy. Výzkum prováděný metodou PCR je rychlejší. Výsledky v tomto případě budou připraveny během několika hodin.

    Kolik je analýza pro hepatitidu C? V závislosti na klinice a složitosti studie se cena procedury může pohybovat od 400 do 11000 rublů.

    Je třeba poznamenat, že může trvat několik týdnů k vytvoření dostatečného objemu protilátek proti HVC. Proto v rané fázi vývoje patologie může být výsledek studie falešně negativní.

    Navíc získání nepřesných údajů je možné, pokud je analýza špatně provedena a jsou porušeny přepravní podmínky pro přijatý biomateriál (vzorky by měly být dodány do laboratoře maximálně 2 hodiny po odběru krve).

    Pokud je výsledek studie pozitivní, musíte okamžitě konzultovat lékaře infekční nemoci. Specialista provede další vyšetření a předepíše vhodnou léčbu.

    Může být vyléčen z hepatitidy C bez vedlejších účinků?

    Dnes, moderní léky a nové generace sofosbuvir Daklatasvir s 97-100% pravděpodobností navždy tě uzdraví z hepatitidy C. Nejnovějším lék je k dispozici v ruštině na oficiální představitel indického farmgiganta Zydus Heptiza. Objednané zboží bude doručeno kuriérem do 4 dnů, platba po obdržení. Získejte zdarma poradenství v oblasti využití moderních léků, stejně jako dozvědět se o tom, jak si můžete zakoupit na oficiálních stránkách Zydus dodavatele v Rusku.


    Související Články Hepatitida