ANF ​​320, homogenní typ

Share Tweet Pin it

Dobrý den! Před rokem dcera (19) přenese reaktivní artritidu, akutní raektsiyu yersinióza (certifikované, IgA byly vysoké, byla klinika také zacházeno Nasonova SRI). V souvislosti s diagnózou byly provedeny všechny souběžné testy a ukázány lékaři. Protilátky proti dDNA byly 1,04; ANF ​​1: 320. Lékař o tom nic neřekl. O rok později jsem se zvedl o ANF. Teď se všichni znovu zaregistrovali, čekáme. Všechny testy (celková krev, c-reaktivní protein, celá biochemie, moč) jsou normální. Protilátky proti dDNA 0,74. ANF ​​ještě není připraven. Asi před třemi lety v létě na čele byly vyrážky s krusty, byly měsíc. Existuje citlivost na slunce, na hrudníku může projít skvrna. Nemohu se soustředit na život a práci z vzrušení při čekání na ANF. Řekněte mi, prosím, co bychom měli dělat, v případě - pokud je to pozitivní? Žijeme v Moskvě, naši revmatologové od minulého roku nemají důvěru. Pokud se máme zacházet - že půjdeme do Moskvy. Díky předem!

Ve službě AskRight je k dispozici online konzultace s revmatologisty o problémech, které vás znepokojují. Lékaři-odborníci provádějí konzultace nepřetržitě a bezplatně. Zeptejte se své otázky a získejte odpověď hned!

Antinukleární faktor na buňkách HEp-2

Metoda výzkumu pomocí lidských epiteliálních buněk HEp-2, která umožňuje detekci antinukleárních protilátek, je jedním z markerů systémových onemocnění pojivové tkáně.

Ruské synonymy

ANF, antinukleární protilátky, antinukleární protilátky (ANA).

Angličtina Synonyma

Antinukleární protilátky (ANA), Hep-2 substrát, ANA-Hep2, fluorescenční protinádorová detekce protilátek (FANA).

Metoda výzkumu

Nepřímá imunofluorescenční reakce.

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Nekuřte po dobu 30 minut před dávkováním krve.

Obecné informace o studii

Stanovení antinukleárního faktoru (ANF) je "zlatým standardem" pro detekci antinukleárních protilátek (ANA) a diagnostikou autoimunitních onemocnění.

Patogeneze systémových onemocnění pojivových tkání (NWST) úzce souvisí s poruchami v imunitním systému a zvýšenou tvorbou protilátek ke strukturám vlastních buněk. Autoprotilátky proti složek buněčných jader - antinukleární protilátky - interagují s nukleovými kyselinami a proteiny jádra, cytoplazmatických antigenů, což se projevuje tím, zánětlivých změn tkání a orgánů, bolesti kloubů a svalů, těžkou únavou, ztrátou hmotnosti, kožní změny. ANA se vyskytují u mnoha autoimunitních onemocnění, ale jsou typické pro systémový lupus erythematodes (SLE). ANA vyskytují se u více než 90% pacientů s systémových onemocnění pojivové tkáně, je v současné době je popsáno kolem 200 druhů, které jsou spojeny jedním názvem - antinukleární faktor.

Při určování ANF metodou nepřímého fluorescence se častěji používá prokládaná linie epiteliálních buněk lidského hrtanového adenokarcinomu HEp-2. Buňky Hep-2 jsou velmi vhodným substrátem pro laboratorní testy, protože mají velké jádro a rostou v jedné vrstvě na sklenicích. Ana jsou detekována při vazbě na intracelulární antigeny buněk HEp-2.

Ve studii byly epitheliální buňky HEp-2 pěstovány na skle, fixovány a inkubovány se zředěným krevním sérem pacienta. Po odstranění přebytku séra se buňky inkubují s protilátkami značenými fluoresceinem, pak se znovu promyjí a zkoumají fluorescenčním mikroskopem. To určuje titr protilátek a typ luminiscence. Titr větší než 1: 160 je považován za smysluplný. V případě exacerbace revmatických onemocnění překročí 1: 640 av období remisí klesne na 1: 160-1: 320. Čím více protilátek, tím vyšší je titr. Podle typu luminiscence lze stanovit cíle antinukleárních protilátek, které mají velký klinický význam a určují taktiku pro další vyšetření pacienta. Hlavní jsou periferní, granulární (jemné / hrubé), nukleární, centromerické a cytoplazmatické typy barvení jádra. Každý typ luminiscence se vyznačuje velmi charakteristickými rysy, které umožňují rozlišit jednu variantu od druhé.

Homogenní (difúzní) barvení je spojeno s přítomností protilátek k dvojvláknové DNA, histonům a je charakteristické pro SLE a lupus erythematosus.

Periferní záře je způsobena periferní distribucí chromatinu v jádře, je spojena s protilátkami proti DNA a je specifická pro SLE. Tento typ luminiscence je důležitý pro rozlišení od barvení jaderné membrány, ke které dochází při autoimunitních onemocněních jater.

Granulované (skvrnité, síťované) barvení se vyskytuje nejčastěji a je nejméně specifické, je zjištěno u mnoha autoimunitních onemocnění. Autoantigeny jsou v tomto případě nukleoproteinové komplexy v jádru (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigeny a PCNA).

Velmi vysoké titry ANF s velkým granulovaným typem luminiscence často naznačují smíšené onemocnění pojivové tkáně.

Nukleární (nukleární) barvení je způsobeno tvorbou protilátek ke složkám nukleolu (RNA polymeráza-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), je zjištěna při sklerodermii, Sjogrenově nemoci. ANA je někdy zvýšena u endokrinních onemocnění (diabetes mellitus 1. typu, thyroiditis, hypertyreóza, vícenásobné endokrinní syndrom), kožní onemocnění (lupénka, pemfigus), těhotenství, po transplantaci orgánů a tkání u pacientů na hemodialýze.

Centromerická luminiscence se objevuje v přítomnosti protilátek proti centromery chromozomů a je charakteristická pro formu sklerodermie - syndrom CREST.

Cytoplazmatický typ luminiscence je spojen s protilátkami proti tRNA syntetázě, zejména s Jo-1, který je charakteristický pro dermatomyozitidu a polymyositidu. Tento typ barvení se také zjišťuje v přítomnosti protilátek proti jiným cytoplazmatickým komponentům při autoimunitní hepatitidě, primární biliární cirhóze.

Simultánní detekce různých typů luminiscence signalizuje přítomnost různých typů protilátek.

U zdravých lidí, to může být zjištěno melkogranulyarnoe záře při nízké, střední nebo vysoké titry ANA, ale normálně hrubé a homogenní typy záře by neměla být stanovena.

V závislosti na výsledcích hodnocení typu luminiscence se rozvíjí další taktika léčby pacienta a přidělují se další studie specifikující spektrum ANA.

Na co se používá výzkum?

  • Diagnostikovat systémová onemocnění pojivové tkáně.
  • Pro diferenciální diagnostiku revmatických onemocnění.
  • Hodnocení účinnosti léčby autoimunitních onemocnění.
  • Monitorování progrese systémových onemocnění pojivové tkáně.

Kdy je přiřazena studie?

  • S příznaky autoimunitního onemocnění (prodloužená horečka, bolest kloubů, únava, ztráta hmotnosti, změna kůže).
  • Při identifikaci změn, které jsou charakteristické pro systémové onemocnění pojivové tkáně (zvýšená ESR, hladina C-reaktivních proteinů, cirkulující imunitní komplexy).

Co znamenají výsledky?

Příčiny zvýšení titru ANP na buňkách HEp-2:

  • Systémový lupus erythematodes (v 95% případů),
  • dermatomyositida / polymyositida,
  • systémová sklerodermie (v 60-90% případů),
  • Sjogrenův syndrom (ve 40-70% případů)
  • zmíněné onemocnění pojivové tkáně (Sharpeův syndrom),
  • Raynaudův syndrom,
  • diskoidní lupus,
  • lupus erythematosus,
  • revmatoidní artritida,
  • nekrotizující vaskulitidu,
  • infekční mononukleóza,
  • leukemie,
  • maligní novotvary (zejména lymfomy),
  • těžká myasthenia gravis,
  • infekční endokarditida,
  • chronická autoimunní hepatitida,
  • primární biliární cirhóza jater,
  • tuberkulóza,
  • pneumokoniózy,
  • intersticiální fibróza plic.

Antinukleární faktor (HEp-2)

Milí pacienti! Katalog analýz je v současné době ve fázi vyplňování informací a obsahuje samy o sobě ne všechny studie provedené naším centrem. Odbočky endokrinologického centra provádějí více než 700 typů laboratorních testů. Zde najdete úplný seznam.

Zkontrolujte prosím informace o ceně služeb a přípravy k analýze na telefonním čísle (812) 344-0-344, +7 953 360 96 11. Po dodání z krevních testů, prosím mějte na paměti, náklady na oplocení biomateriálu.

Připraveno k registraci: 0 analýz

  • Kód výzkumu: 331
  • Doba trvání: 5-6 dní (kromě soboty, neděle)
  • Náklady na analýzu 960 rub.

Metoda výzkumu pomocí lidských epiteliálních buněk - HEp-2, která umožňuje identifikovat antinukleární protilátky, považované za jeden z markerů takzvaných systémových onemocnění pojivového tkáně.

Detekce antinukleárního faktoru (nebo ANF) je druh "zlatého standardu" pro detekci antinukleárních protilátek (nebo ANA) a rozpoznání autoimunitních onemocnění.

Patogenetické mechanismy systémových onemocnění pojivové tkáně (nebo SZST) korelovala s poruchami ve fungování imunitního systému a zvýšení produkce protilátek proti vlastní struktury buněk. Tzv autoprotilátky proti složkám buněčného jádra - antinukleární protilátky - interagují s nukleovými kyselinami, proteiny, jádra, cytoplazmatické antigeny, což vede k zánětlivé změny v různých tkání, orgánů, bolesti svalů a kloubů, na změny kůže, úbytek tělesné hmotnosti, vyjádřeno únavu. Antinukleární protilátky jsou detekovány v mnoha onemocnění autoimunitní povahy, ale nejtypičtější systémového lupus erythematodes (SLE nebo). ANA jsou registrovány ve více než 90% osob se SZST; V současné době asi 200 popsaných druhů, Spojené společným názvem „protijaderné faktoru“.

Když je antinukleární faktor detekován nepřímou fluorescenční metodou, častěji se používá rozšířená epiteliální buněčná linie lidského adenokarcinomu laryngeálního (nebo HEp-2). Jeho buňky jsou velmi vhodným substrátem pro laboratorní výzkum, protože mají relativně velké jádro a rostou v jedné vrstvě na skle. Antinukleární faktor je detekován, když je vytvořena vazba s intracelulárními antigeny HEp-2 buněk.

Ve studii HEp-2 buňky byly pěstovány na skleněná sklíčka jsou vystaveny fixaci a inkubovány se zředěným pacientova krevního séra. Po odstranění přebytečné buňky byly inkubovány s sérových protilátek, značený fluoresceinem, který pole se opět propláchne se a pak studoval pomocí fluorescenčního mikroskopu, s detekcí při této titru, a typ luminiscence. Podstatné ve vztahu k uznávaným diagnostickým titr větší než 1: 160. V případě akutních revmatických onemocnění titrovat větší než 1: 640, je-li remise sníží na rozmezí 1: 160 až 1: 320. Se zvyšujícím se množstvím titru protilátek také zvýšena. Typ emise umožňuje vytvoření cílové antinukleární protilátky; to je důležité z klinického hlediska, a může určit strategii pro další vyšetření pacienta. Vyzařují různé typy barvení jader (např. Periferní, granulovaný, nukleolární, centromericky, cytoplazmatické).

Pro každý typ luminiscence jsou velmi charakteristické rysy, které umožňují jejich odlišení od sebe.

Homogenní barvení (difuzní) je spojeno s přítomností protilátek proti dvojvláknové deoxyribonukleové kyselině (DNA), histonům a je neodmyslitelné v systémové červené a lupus léků.

Periferní luminiscence je způsobena periferní distribucí v chromatinovém jádru, je spojena s protilátkami proti deoxyribonukleové kyselině specifickou pro systémový lupus erythematosus. Tento typ luminiscence je důležitý pro rozlišení od zbarvení jádrové membrány, ke které dochází při autoimunitních onemocněních jater.

Granulární barvení se najčastěji vyskytuje, je nejméně specifické, vyskytuje se u mnoha autoimunitních onemocnění. Autoantigeny jsou v tomto případě nukleoproteinové komplexy v jádře (Sm, U1-RNP a některé další).

Velmi vysoké titry antinukleárního faktoru s velkým granulovaným typem luminiscence často naznačují smíšené onemocnění pojivové tkáně.

Jádra (nebo nukleolární) barvení je vzhledem k tvorbě protilátek proti složek jadérka (např. PHK polymeráza-1, NOR, některé další); To je detekován v případě sklerodermie, Sjögrenův nemoci. Tvorba antinukleární protilátky v několika případech se zvyšuje v některých endokrinních patologických stavů (jako je diabetes prvního typu, zánět štítné žlázy, hypertyreóza, vícenásobné endokrinní syndrom), kožní léze (pemfigus, psoriáza), během těhotenství, po transplantaci tkání a orgánů, u pacientů hemodialýza.

Centromerická luminiscence je detekována v přítomnosti protilátek proti centromérům chromozomů; je charakteristická pro určitou formu sklerodermie - tzv. CREST syndrom.

Cytoplasmatický typ luminiscence. Je spojen s protilátkami proti tRNA syntetázě, vyskytuje se u dermatomyozitidy, polymyositidy. Tento typ barvení se také projevuje v přítomnosti protilátek proti jiným složkám cytoplazmy v případě autoimunní hepatitidy s primární biliární cirhózou.

Detekce různých typů luminiscence současně indikuje přítomnost různých typů protilátek.

Ve studii zdravých jedinců lze detekovat jemnou granulární luminiscenci v případě nízkých, středních nebo vysokých titrů antinukleárních protilátek, avšak hrubé nebo homogenní typy luminescence by neměly být detekovány.

Po vyhodnocení typu luminiscence jsou stanoveny další taktiky léčby a mohou být provedeny další studie k objasnění spektra antinukleárních protilátek.

30 minut před podáním krve se kouření zastaví.

Existují pouze některé procesy, stavy a nemoci, u kterých je účel této analýzy vhodný.

Studie antinukleárního faktoru (HEp-2) může být provedena k identifikaci systémových onemocnění pojivové tkáně (CSTD); s cílem diagnostické diferenciace revmatických onemocnění; zhodnotit účinnost pokračující léčby autoimunitních onemocnění; sledovat průběh NWFP.

Níže jsou uvedeny pouze některé možné procesy, stavy a onemocnění, při kterých je detekován antinukleární faktor (HEp-2). Je třeba mít na paměti, že výsledek výzkumu nemusí být vždy dostatečně specifickým a dostatečným kritériem pro vyvození závěru. Předkládané informace v žádném případě neslouží účelům sebe-diagnostiky a samoléčení. Konečná diagnóza je stanovena pouze lékařem v kombinaci s výsledky jiných metod výzkumu.

Možné příčiny zvýšení titr antinukleárních faktor: Systém lupus erythematodes (SLE), systémové sklerodermie, dermatomyozitida nebo polymyozitidou, smíšené onemocnění pojivové tkáně (tzv smíšené onemocnění pojivové tkáně), Sjogrenův syndrom, diskoidní lupus, Raynaudův syndrom, revmatoidní artritida, dávkování erythematosus, infekční mononukleóza, nekrotizující vaskulitida, některé malignity (např. lymfom, leukémie), infekční endokarditida, myasthenia gravis, primární biliární cirhóza, chronická auto imunní proti hepatitidě, pneumokoniózy, intersticiální plicní fibróza, tuberkulóza.

Faktory, které mohou ovlivnit výsledek studie

Falešně pozitivní výsledek - to může být spojeno s následujícími faktory: věk starší než 60-65 let zkoumali (pozorována u 10-37% všech případů); Použití řady léků, které mohou být zodpovědné za vznik léku erythematosus (např. thiazidová diuretika, tetracykliny, sulfonamidy, streptomycin, reserpin, chinidin, propiluratsil, prokainamid, primidon, fenytoin, fenylbutazon, penicilin, perorální antikoncepce, methyldopa, soli lithia, isoniazid, hydralazin, griseofulvin, soli zlata a řada dalších). Falešně negativní výsledek může někdy vést kortikosteroidy (např. Prednison, dexamethason, metipred).

U 5% všech případů systémového lupus erythematosus je možné získat negativní výsledek studie (ANP-negativní systémový lupus erythematodes). V takových případech je diagnóza protilátek proti antigeny SS (Ro) nutná k objasnění diagnózy.

Pozitivní výsledek studie ne vždy slouží jako absolutní důkaz přítomnosti autoimunitního onemocnění. U mnoha zdravých jedinců (3-13%) se titr antinukleárního faktoru zvyšuje a může dosáhnout hodnoty 1: 320.

Výsledky studie by měly být interpretovány ve spojení s klinickými údaji, stejně jako s dalšími laboratorními indikátory.

V případě dosažení pozitivního výsledku se doporučuje stanovit specificitu antinukleárních protilátek pomocí imunoblotu.

Antinuclear faktor: jaká analýza ukazuje

V medicíně rozlišují specifické podmínky, v nichž ochranné buňky začnou napadat vlastní organismus, autoimunitní onemocnění. Většina těchto onemocnění se vyskytuje v chronické formě a je potenciálně nebezpečná, protože mohou způsobit vážné problémy v práci některých orgánů a systémů. To často vede k postižení a vážným důsledkům.

Možnosti moderní medicíny jsou skvělé a je možné odhalit všechny tyto změny v rané fázi a zahájit léčbu včas. Jednou z nejčastějších studií, které se používají k diagnostice těchto stavů, je analýza pro antinukleární protilátky, zkráceně ANA.

Popis

Analýza ANA je nejvíce informativním způsobem diagnostiky pro podezření na jakékoli autoimunitní onemocnění, Obecně jde o onemocnění pojivových tkání. Existuje však i přítomnost protilátek v maligních procesech, infekční atd.

Největší citlivost protilátek proti těmto onemocněním:

  1. Systémový lupus erythematodes.
  2. Revmatoidní artritida.
  3. Nemoci Sjogrenu.

Tyto buňky lze nalézt také u přibližně jedné třetiny pacientů s chronickou hepatitidou.

Růst indikátorů ovlivňuje různé faktory. Zvláště malárie, leukémie, infekční mononukleóza a mnoho dalšího.

Spolu s detekcí ANA během studie je důležité posoudit hladinu takových imunoglobulinů jako jsou IgA, IgM, IgG. Identifikace těchto složek v krvi u pacientů může naznačovat vyšší pravděpodobnost vzniku revmatických patologií a kolagenóz.

Pokud nebyl zjištěn vztah mezi obsahem protilátek a příznaky, samotná existence ANA v krvi naznačuje volbu správné taktiky léčby. Dlouhodobé uchovávání vysokých titrů svědčí o neuspokojivém stavu věcí. Snížení těchto titrů hovoří o odpuštění patologie, mnohem méně často o bezprostřední smrti.

Tyto protilátky však mohou být detekovány u určitého procenta zdravých jedinců a titry ANF mohou přesáhnout normu.

Indikace pro studii

Léčba výsledků správný lékař je imunolog a absolvent, v závislosti na oblasti léze.

Indikace pro tuto studii jsou:

  1. Identifikace systémových onemocnění, stejně jako autoimunitních poruch bez zjevných příznaků.
  2. Detekce systémového lupus erythematosus a jeho komplexní studie, výběr strategie léčby.
  3. Identifikace lékového lupusu.
  4. Přítomnost určitých klinických projevů, jako je dlouhodobá horečka bez patrné příčiny, křehkost kloubů a jejich bolestivost, kožní vyrážka, bolesti svalů, vysoká únava.
  5. Příznaky symptomatických projevů smíšených chorob: onemocnění kůže a vnitřních orgánů, křečové stavy, zvýšené teplotní indexy.
  6. Podávání léků na disopyramid, hydralazin a další.

Typy zkoušek

Existují dva způsoby, jak detekovat protilátky v krvi. První technika se nazývá nepřímá imunofluorescenční mikroskopie. V přítomnosti protilátek se budou vážit na specifické jaderné antigeny. Používají se prvky osvětlené v samostatném světelném spektru. Pod mikroskopem je možné určit typ luminiscence.

Více o tom, co je myofasciální syndrom a jak se s ním léčí přečtěte si zde.

Tato metoda je považována za nejlepší pro stanovení hodnoty antinukleárních protilátek. Technika byla také dána druhému názvu - lupus test-band.
Druhou metodou diagnostiky je enzymová imunotest. Její význam spočívá v tom, že protilátky v krvi se dostanou do vztahu s antigenem a nakonec roztok změní svůj odstín.

Je důležité zdůraznit, že pozitivní screening nemůže být jediným důvodem pro diagnózu.

Další studie je povinná, pomocí níž lze nemoc určit v rané fázi. V případě negativního screeningu lze předpokládat, že nedošlo k porušení. To však nevylučuje autoimunitní onemocnění pacienta.

Krev je darována antinukleárnímu faktoru společně s dalšími analýzami. Konečný výsledek je ovšem ovlivněn příjmem některých léků a přítomností patologických stavů pacienta v chronickém a akutním průběhu. Chcete-li rozebrat všechny tyto okamžiky, odborník vám pomůže, poté zjistí správnou diagnózu a poradí, jak postupovat dále.

Interpretace výsledků

Při kvalitativním výzkumu lze získat následující výsledky:

  • nižší než 0,9-negativní, norma;
  • hodnoty od 0,9 do 1,1 - pochybné;
  • více než 1,1 - pozitivní.

Pacienti se často ptají na otázku: je antinukleární faktor 1: 160 normální nebo ne? Vše nad tímto ukazatelem překračuje normu.

Přečtěte si také: Jak léčit epiduritu páteře

Je také třeba poznamenat, že nesprávná příprava a některé nuance mohou ovlivnit výsledky:

  1. Porušení principů přípravy.
  2. Nedodržení pravidel injekčního algoritmu lékařem.
  3. Přijetí určitých farmaceutických výrobků.
  4. Diagnóza uremie může také narušit výsledky.

Pozitivní screening antinukleární protilátky může indikovat přítomnost takových onemocnění, jako lupus, slinivky patologie, přítomnost funkčních poruch štítné žlázy, onemocnění jater, Sjogrenův syndrom, plicní tkáně, kloubů a více. Pouze lékař může interpretovat výsledky a jmenovat další léčbu.

Během dekódování této studie stojí za zvážení, že v případě záporných hodnot není vyloučena pravděpodobnost nemoci.

Jak se podrobněji aplikuje Alesan krém na klouby zde popsáno

Pokud je screening těchto protilátek pozitivní bez doprovodných příznaků, je nutné podrobit se důkladnějšímu vyšetření.

Jak se správně připravit na studium

Venózní krev působí jako materiál pro analýzu.

Vlastnosti přípravku:

  1. Materiál se užívá na prázdný žaludek. Po posledním jídle musí projít alespoň 8 hodin. Je povoleno pít kvalitní filtrovanou vodu bez plynu.
  2. Před dvěma hodinami, než začne krvácet Kouření a užívání nikotinových přípravků jsou vyloučeny.
  3. Několik dní před spácháním manipulace Spotřeba alkoholických nápojů a energie je vyloučena, je zakázáno provádět těžkou fyzickou práci.
  4. Dvě týdny musí být plně vyloučení léčiv, zejména hormony, antibiotika a další léky.
  5. Pro potvrzení studie je důležité opakujte screening během dvou týdnů.

Výsledky očekávejte do 48 hodin po ukončení procedury. Příjem dat v nouzovém pořadí je možné do 3 hodin.

Závěr

Z tohoto článku jste si uvědomili, jaká je krev pro analýzu ANF a co to je. Ne všechny protilátky lze v této studii zjistit z důvodu jejich nadbytku. Aby se minimalizovala možnost zavádějících výsledků, je nutné provést komplexní studii spolu s dalšími metodami.

Absence vysokých titrů ANF neznamená, že pacient nemá žádné systémové nemoci, stejně jako pozitivní výsledek nemůže být jednoznačným argumentem pro diagnózu.

Analýza krve, co to je

Antinukleární faktor na buňkách HEp-2

Antinukleární faktor na buňkách HEp-2

Metoda výzkumu pomocí lidských epiteliálních buněk HEp-2, která umožňuje detekci antinukleárních protilátek, je jedním z markerů systémových onemocnění pojivové tkáně.

ANF, antinukleární protilátky, antinukleární protilátky (ANA).

Antinukleární protilátky (ANA), Hep-2 substrát, ANA-Hep2, fluorescenční protinádorová detekce protilátek (FANA).

Nepřímá imunofluorescenční reakce.

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Nekuřte po dobu 30 minut před dávkováním krve.

Obecné informace o studii

Stanovení antinukleárního faktoru (ANF) je "zlatým standardem" pro detekci antinukleárních protilátek (ANA) a diagnostikou autoimunitních onemocnění.

Patogeneze systémových onemocnění pojivových tkání (NWST) úzce souvisí s poruchami v imunitním systému a zvýšenou tvorbou protilátek ke strukturám vlastních buněk. Autoprotilátky proti složek buněčných jader - antinukleární protilátky - interagují s nukleovými kyselinami a proteiny jádra, cytoplazmatických antigenů, což se projevuje tím, zánětlivých změn tkání a orgánů, bolesti kloubů a svalů, těžkou únavou, ztrátou hmotnosti, kožní změny. ANA se vyskytují u mnoha autoimunitních onemocnění, ale jsou typické pro systémový lupus erythematodes (SLE). ANA vyskytují se u více než 90% pacientů s systémových onemocnění pojivové tkáně, je v současné době je popsáno kolem 200 druhů, které jsou spojeny jedním názvem - antinukleární faktor.

Při určování ANF metodou nepřímého fluorescence se častěji používá prokládaná linie epiteliálních buněk lidského hrtanového adenokarcinomu HEp-2. Buňky Hep-2 jsou velmi vhodným substrátem pro laboratorní testy, protože mají velké jádro a rostou v jedné vrstvě na sklenicích. Ana jsou detekována při vazbě na intracelulární antigeny buněk HEp-2.

Ve studii byly epitheliální buňky HEp-2 pěstovány na skle, fixovány a inkubovány se zředěným krevním sérem pacienta. Po odstranění přebytku séra se buňky inkubují s protilátkami značenými fluoresceinem, pak se znovu promyjí a zkoumají fluorescenčním mikroskopem. To určuje titr protilátek a typ luminiscence. Titr větší než 1: 160 je považován za smysluplný. V případě exacerbace revmatických onemocnění překročí 1: 640 av období remisí klesne na 1: 160-1: 320. Čím více protilátek, tím vyšší je titr. Podle typu luminiscence lze stanovit cíle antinukleárních protilátek, které mají velký klinický význam a určují taktiku pro další vyšetření pacienta. Hlavní jsou periferní, granulární (jemné / hrubé), nukleární, centromerické a cytoplazmatické typy barvení jádra. Každý typ luminiscence se vyznačuje velmi charakteristickými rysy, které umožňují rozlišit jednu variantu od druhé.

Homogenní (difúzní) barvení je spojeno s přítomností protilátek k dvojvláknové DNA, histonům a je charakteristické pro SLE a lupus erythematosus.

Periferní záře je způsobena periferní distribucí chromatinu v jádře, je spojena s protilátkami proti DNA a je specifická pro SLE. Tento typ luminiscence je důležitý pro rozlišení od barvení jaderné membrány, ke které dochází při autoimunitních onemocněních jater.

Granulované (skvrnité, síťované) barvení se vyskytuje nejčastěji a je nejméně specifické, je zjištěno u mnoha autoimunitních onemocnění. Autoantigeny jsou v tomto případě nukleoproteinové komplexy v jádru (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigeny a PCNA).

Velmi vysoké titry ANF s velkým granulovaným typem luminiscence často naznačují smíšené onemocnění pojivové tkáně.

Nukleární (Nukleolární) barvení vzhledem k protilátkové složky jadérka (PHK polymeráza-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), zjištěné v sklerodermie, Sjogrenův choroby. ANA je někdy zvýšena u endokrinních onemocnění (diabetes mellitus 1. typu, thyroiditis, hypertyreóza, vícenásobné endokrinní syndrom), kožní onemocnění (lupénka, pemfigus), těhotenství, po transplantaci orgánů a tkání u pacientů na hemodialýze.

Centromerická luminiscence se objevuje v přítomnosti protilátek proti centromery chromozomů a je charakteristická pro formu sklerodermie - syndrom CREST.

Cytoplazmatický typ luminiscence je spojen s protilátkami proti tRNA syntetázě, zejména s Jo-1, který je charakteristický pro dermatomyozitidu a polymyositidu. Tento typ barvení se také zjišťuje v přítomnosti protilátek proti jiným cytoplazmatickým komponentům při autoimunitní hepatitidě, primární biliární cirhóze.

Simultánní detekce různých typů luminiscence signalizuje přítomnost různých typů protilátek.

U zdravých lidí, to může být zjištěno melkogranulyarnoe záře při nízké, střední nebo vysoké titry ANA, ale normálně hrubé a homogenní typy záře by neměla být stanovena.

V závislosti na výsledcích hodnocení typu luminiscence se rozvíjí další taktika léčby pacienta a přidělují se další studie specifikující spektrum ANA.

Na co se používá výzkum?

  • Diagnostikovat systémová onemocnění pojivové tkáně.
  • Pro diferenciální diagnostiku revmatických onemocnění.
  • Hodnocení účinnosti léčby autoimunitních onemocnění.
  • Monitorování progrese systémových onemocnění pojivové tkáně.

Kdy je přiřazena studie?

  • S příznaky autoimunitního onemocnění (prodloužená horečka, bolest kloubů, únava, ztráta hmotnosti, změna kůže).
  • Při identifikaci změn, které jsou charakteristické pro systémové onemocnění pojivové tkáně (zvýšená ESR, hladina C-reaktivních proteinů, cirkulující imunitní komplexy).

Co znamenají výsledky?

Příčiny zvýšení titru ANP na buňkách HEp-2:

  • Systémový lupus erythematodes (v 95% případů),
  • dermatomyositida / polymyositida,
  • systémová sklerodermie (v 60-90% případů),
  • Sjogrenův syndrom (ve 40-70% případů)
  • zmíněné onemocnění pojivové tkáně (Sharpeův syndrom),
  • Raynaudův syndrom,
  • diskoidní lupus,
  • lupus erythematosus,
  • revmatoidní artritida,
  • nekrotizující vaskulitidu,
  • infekční mononukleóza,
  • leukemie,
  • maligní novotvary (zejména lymfomy),
  • těžká myasthenia gravis,
  • infekční endokarditida,
  • chronická autoimunní hepatitida,
  • primární biliární cirhóza jater,
  • tuberkulóza,
  • pneumokoniózy,
  • intersticiální fibróza plic.

Co je to typické?

U SLE, lupus erythematodes, systémové sklerodermie, chronické aktivní hepatitidy

U SLE, Sjögrenova syndromu, smíšeného onemocnění pojivové tkáně, revmatoidní artritidy

Pro polymyositidu / dermatomyozitidu, sklerodermu, Sjogrenův syndrom, SLE

Pro CREST syndromu (kůže kalcifikace, Raynaudova syndromu, jícnu dysfunkce, acroscleroderma, telangiectasias)

Pro dermatomyozitidu / polymyositidu, autoimunní onemocnění jater, primární biliární cirhózu

Co může ovlivnit výsledek?

  • Falešně pozitivní výsledek podporuje:
    • věk nad 60-65 let (v 10-37% případů);
    • podávání léků, které mohou vést k drogové erythematosus (acetazolamid, karbidopa, hydrochlorothiazid, chlorpromazin, klofibrát, ethosuximid, solí zlata, griseofulvin, hydralazin, isoniazid, lithium, methyldopa, perorální antikoncepce, penicilin, fenylbutazon, fenytoin, primidon, prokainamid, propiluratsil, chinidin, reserpin, streptomycin, sulfonamidy, tetracykliny, thiazidová diuretika).
  • Použití glukokortikosteroidů (prednisolon, dexamethason, metipred) někdy vede k falešně negativnímu výsledku.
  • V 5% případů SLE je možný negativní výsledek této analýzy (ANF-negativní SLE). V takových situacích, abychom objasnili diagnózu, je nutné stanovit protilátky proti antigenům SS (Ro).
  • Pozitivní výsledek testu není absolutním důkazem přítomnosti autoimunitního onemocnění. U zdravých lidí, v 3-13% případů je titr ANF zvýšený a dosahuje 1: 320.
  • Výsledky testu by měly být vyhodnoceny ve spojení s klinickými údaji a dalšími laboratorními indikátory.
  • Pokud se pro stanovení specifičnosti imunoblotu ANA doporučuje pozitivní výsledek studie.
  • Protilátky k dvojvláknové DNA (anti-dsDNA), screening
  • Protilátky proti jaderným antigenům (ANA), screening
  • Protilátky na extrahovatelný jaderný antigen (ENA screen)
  • Protilátky proti kardiolipinu, IgG a IgM
  • Antinukleární protilátky (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, cent-B, Jo-1, aby histonů, nukleozómům, ribo P, AMA-M2), imunoblot
  • Obecný krevní test (bez vzorce leukocytů a ESR)
  • Rychlost sedimentace erytrocytů (ESR)
  • Antistreptolysin O
  • C-reaktivní protein, kvantitativně
  • Reumatoidní faktor
  • Cirkulační imunitní komplexy (CEC)
  • C3 složka komplementu
  • C4 komplement

Kdo jmenuje studii?

  • Wilson D. McGraw-Hill Manuál laboratorních a diagnostických testů 1. Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 s.
  • Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Vzorek pro antinukleární protilátku-HEp-2 je kritickým parametrem pro osoby s pozitivní antinkleární protilátkou a pro pacienty s autoimunitními revmatickými onemocněními. Arthritis Rheum. 2011 Jan; 63 (1): 191-200.
  • Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Antinucleární protilátky a jejich detekční metody při diagnostice onemocnění pojivové tkáně: cesta revidovaná. Diagn Pathol. 2009 Jan 2; 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Antinukleární faktor na buňkách HEp-2: studie v laboratoři KDLmed

Metoda výzkumu pomocí lidských epiteliálních buněk HEp-2, která umožňuje detekci antinukleárních protilátek, je jedním z markerů systémových onemocnění pojivové tkáně.

ANF, antinukleární protilátky, antinukleární protilátky (ANA).

Antinukleární protilátky (ANA), Hep-2 substrát, ANA-Hep2, fluorescenční protinádorová detekce protilátek (FANA).

Nepřímá imunofluorescenční reakce.

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Nekuřte po dobu 30 minut před dávkováním krve.

Obecné informace o studii

Stanovení antinukleárního faktoru (ANF) je "zlatým standardem" pro detekci antinukleárních protilátek (ANA) a diagnostikou autoimunitních onemocnění.

Patogeneze systémových onemocnění pojivových tkání (NWST) úzce souvisí s poruchami v imunitním systému a zvýšenou tvorbou protilátek ke strukturám vlastních buněk. Autoprotilátky proti složek buněčných jader - antinukleární protilátky - interagují s nukleovými kyselinami a proteiny jádra, cytoplazmatických antigenů, což se projevuje tím, zánětlivých změn tkání a orgánů, bolesti kloubů a svalů, těžkou únavou, ztrátou hmotnosti, kožní změny. ANA se vyskytují u mnoha autoimunitních onemocnění, ale jsou typické pro systémový lupus erythematodes (SLE). ANA vyskytují se u více než 90% pacientů s systémových onemocnění pojivové tkáně, je v současné době je popsáno kolem 200 druhů, které jsou spojeny jedním názvem - antinukleární faktor.

Při určování ANF metodou nepřímého fluorescence se častěji používá prokládaná linie epiteliálních buněk lidského hrtanového adenokarcinomu HEp-2. Buňky Hep-2 jsou velmi vhodným substrátem pro laboratorní testy, protože mají velké jádro a rostou v jedné vrstvě na sklenicích. Ana jsou detekována při vazbě na intracelulární antigeny buněk HEp-2.

Ve studii byly epitheliální buňky HEp-2 pěstovány na skle, fixovány a inkubovány se zředěným krevním sérem pacienta. Po odstranění přebytku séra se buňky inkubují s protilátkami značenými fluoresceinem, pak se znovu promyjí a zkoumají fluorescenčním mikroskopem. To určuje titr protilátek a typ luminiscence. Titr větší než 1: 160 je považován za smysluplný. V případě exacerbace revmatických onemocnění překročí 1: 640 av období remisí klesne na 1: 160-1: 320. Čím více protilátek, tím vyšší je titr. Podle typu luminiscence lze stanovit cíle antinukleárních protilátek, které mají velký klinický význam a určují taktiku pro další vyšetření pacienta. Hlavní jsou periferní, granulární (jemné / hrubé), nukleární, centromerické a cytoplazmatické typy barvení jádra. Každý typ luminiscence se vyznačuje velmi charakteristickými rysy, které umožňují rozlišit jednu variantu od druhé.

Homogenní (difúzní) barvení je spojeno s přítomností protilátek k dvojvláknové DNA, histonům a je charakteristické pro SLE a lupus erythematosus.

Periferní záře je způsobena periferní distribucí chromatinu v jádře, je spojena s protilátkami proti DNA a je specifická pro SLE. Tento typ luminiscence je důležitý pro rozlišení od barvení jaderné membrány, ke které dochází při autoimunitních onemocněních jater.

Granulované (skvrnité, síťované) barvení se vyskytuje nejčastěji a je nejméně specifické, je zjištěno u mnoha autoimunitních onemocnění. Autoantigeny jsou v tomto případě nukleoproteinové komplexy v jádru (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigeny a PCNA).

Velmi vysoké titry ANF s velkým granulovaným typem luminiscence často naznačují smíšené onemocnění pojivové tkáně.

Nukleární (Nukleolární) barvení vzhledem k protilátkové složky jadérka (PHK polymeráza-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), zjištěné v sklerodermie, Sjogrenův choroby. ANA je někdy zvýšena u endokrinních onemocnění (diabetes mellitus 1. typu, thyroiditis, hypertyreóza, vícenásobné endokrinní syndrom), kožní onemocnění (lupénka, pemfigus), těhotenství, po transplantaci orgánů a tkání u pacientů na hemodialýze.

Centromerická luminiscence se objevuje v přítomnosti protilátek proti centromery chromozomů a je charakteristická pro formu sklerodermie - syndrom CREST.

Cytoplazmatický typ luminiscence je spojen s protilátkami proti tRNA syntetázě, zejména s Jo-1, který je charakteristický pro dermatomyozitidu a polymyositidu. Tento typ barvení se také zjišťuje v přítomnosti protilátek proti jiným cytoplazmatickým komponentům při autoimunitní hepatitidě, primární biliární cirhóze.

Simultánní detekce různých typů luminiscence signalizuje přítomnost různých typů protilátek.

U zdravých lidí, to může být zjištěno melkogranulyarnoe záře při nízké, střední nebo vysoké titry ANA, ale normálně hrubé a homogenní typy záře by neměla být stanovena.

V závislosti na výsledcích hodnocení typu luminiscence se rozvíjí další taktika léčby pacienta a přidělují se další studie specifikující spektrum ANA.

Na co se používá výzkum?

  • Diagnostikovat systémová onemocnění pojivové tkáně.
  • Pro diferenciální diagnostiku revmatických onemocnění.
  • Hodnocení účinnosti léčby autoimunitních onemocnění.
  • Monitorování progrese systémových onemocnění pojivové tkáně.

Kdy je přiřazena studie?

  • S příznaky autoimunitního onemocnění (prodloužená horečka, bolest kloubů, únava, ztráta hmotnosti, změna kůže).
  • Při identifikaci změn, které jsou charakteristické pro systémové onemocnění pojivové tkáně (zvýšená ESR, hladina C-reaktivních proteinů, cirkulující imunitní komplexy).

Co znamenají výsledky?

Příčiny zvýšení titru ANP na buňkách HEp-2:

  • Systémový lupus erythematodes (v 95% případů),
  • dermatomyositida / polymyositida,
  • systémová sklerodermie (v 60-90% případů),
  • Sjogrenův syndrom (ve 40-70% případů)
  • zmíněné onemocnění pojivové tkáně (Sharpeův syndrom),
  • Raynaudův syndrom,
  • diskoidní lupus,
  • lupus erythematosus,
  • revmatoidní artritida,
  • nekrotizující vaskulitidu,
  • infekční mononukleóza,
  • leukemie,
  • maligní novotvary (zejména lymfomy),
  • těžká myasthenia gravis,
  • infekční endokarditida,
  • chronická autoimunní hepatitida,
  • primární biliární cirhóza jater,
  • tuberkulóza,
  • pneumokoniózy,
  • intersticiální fibróza plic.

Co je to typické?

U SLE, lupus erythematodes, systémové sklerodermie, chronické aktivní hepatitidy

U SLE, Sjögrenova syndromu, smíšeného onemocnění pojivové tkáně, revmatoidní artritidy

Pro polymyositidu / dermatomyozitidu, sklerodermu, Sjogrenův syndrom, SLE

Pro CREST syndromu (kůže kalcifikace, Raynaudova syndromu, jícnu dysfunkce, acroscleroderma, telangiectasias)

Pro dermatomyozitidu / polymyositidu, autoimunní onemocnění jater, primární biliární cirhózu

Co může ovlivnit výsledek?

  • Falešně pozitivní výsledek podporuje:
    • věk nad 60-65 let (v 10-37% případů);
    • podávání léků, které mohou vést k drogové erythematosus (acetazolamid, karbidopa, hydrochlorothiazid, chlorpromazin, klofibrát, ethosuximid, solí zlata, griseofulvin, hydralazin, isoniazid, lithium, methyldopa, perorální antikoncepce, penicilin, fenylbutazon, fenytoin, primidon, prokainamid, propiluratsil, chinidin, reserpin, streptomycin, sulfonamidy, tetracykliny, thiazidová diuretika).
  • Použití glukokortikosteroidů (prednisolon, dexamethason, metipred) někdy vede k falešně negativnímu výsledku.
  • V 5% případů SLE je možný negativní výsledek této analýzy (ANF-negativní SLE). V takových situacích, abychom objasnili diagnózu, je nutné stanovit protilátky proti antigenům SS (Ro).
  • Pozitivní výsledek testu není absolutním důkazem přítomnosti autoimunitního onemocnění. U zdravých lidí, v 3-13% případů je titr ANF zvýšený a dosahuje 1: 320.
  • Výsledky testu by měly být vyhodnoceny ve spojení s klinickými údaji a dalšími laboratorními indikátory.
  • Pokud se pro stanovení specifičnosti imunoblotu ANA doporučuje pozitivní výsledek studie.
  • Protilátky k dvojvláknové DNA (anti-dsDNA), screening
  • Protilátky proti jaderným antigenům (ANA), screening
  • Protilátky na extrahovatelný jaderný antigen (ENA screen)
  • Protilátky proti kardiolipinu, IgG a IgM
  • Antinukleární protilátky (anti-SM, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, cent-B, Jo-1, histony, nukleozómy, ribo P, AMA-M2), imunoblot
  • Obecný krevní test (bez vzorce leukocytů a ESR)
  • Rychlost sedimentace erytrocytů (ESR)
  • Antistreptolysin O
  • C-reaktivní protein, kvantitativně
  • Reumatoidní faktor
  • Cirkulační imunitní komplexy (CEC)
  • C3 složka komplementu
  • C4 komplement

Kdo jmenuje studii?

  • Wilson D. McGraw-Hill Manuál laboratorních a diagnostických testů 1. Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 s.
  • Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Vzorek pro antinukleární protilátku-HEp-2 je kritickým parametrem pro osoby s pozitivní antinkleární protilátkou a pro pacienty s autoimunitními revmatickými onemocněními. Arthritis Rheum. 2011 Jan; 63 (1): 191-200.
  • Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Antinucleární protilátky a jejich detekční metody při diagnostice onemocnění pojivové tkáně: cesta revidovaná. Diagn Pathol. 2009 Jan 2; 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Antinukleární protilátky. Obecné informace

AHA je heterogenní skupina aAT reagující s různými složkami jádra. Standardní testovací metoda pro stanovení ANA je nepřímá imunofluorescence reakce (NRIF) za použití jako substrátu hluboce zmražené řezy ze myš nebo krysích jater (ledviny) nebo buněčné linie HEp-2 (laryngeální rakoviny lidské epiteliální buňky). Použití standardizovaných HEp-2 buněk je výhodné, protože umožňuje výrazně zvýšit citlivost metody a spolehlivě popsat různé typy záře jádra. Pokud je metoda ANA testována metodou NERIF, jsou tradičně označovány jako antinukleární faktory (ANF).

ANF ​​je základní screeningové laboratorní testy používané pro diagnostiku systémových revmatických chorob. Studie ANF je velmi užitečná pro diagnózu SLE a SS, diagnostiky N a PM / mm, prognózu a pro sledování toku juvenilní chronické artritidy, a Raynaudův fenomén. Pozitivní výsledky stanovení ANF považovány za povinné diagnostická kritéria pro léčiva erythematosus, smíšené onemocnění pojivové tkáně (SZST), autoimunitní hepatitida a ukázalo diagnostickou a prognostickou hodnotu u RA, roztroušená skleróza, onemocnění štítné žlázy, infekce, idiopatická trombocytopenická purpura a fibromyalgie. Frekvence detekce ANF se zvyšuje s věkem, zejména u žen.

U pacientů s pozitivním určení ANA doporučuje provést potvrzující testy - stanovení ANA jednotlivé jaderné a cytoplazmatické antigeny (ds DNA, Sm, SS-A / Ro, SS-B La, Scl-70, CHP /) za použití metody ELISA, IB, RID, RIA a další.

Antinucleární faktor (ANF, HEp-2) s definicí typu luminiscence (v krvi)

Antinukleární protilátky (ANA, ANA, antinukleární protilátky, antinukleární faktor-ANF) - postup NIF na buněčné linii HEp-2 s určení typu emisí. - míra autoimunních onemocnění pojivové tkáně. ANA je skupina autoprotilátek proti proteinů a jiných složek (včetně DNA) jsou v jádrech buněk. Hlavní indikace pro použití: diagnóza vyloučení - systémový lupus erythematodes (předpokládá se, že ANA vyskytují ve 90% případů SLE, jinými slovy, negativní výsledek s pravděpodobností 90% vyloučit diagnózu SLE), diferenciální diagnózy systemické pojivové tkáně (systémový lupus erythematodes, sklerodermie, nodulární periarteritida, dermatomyositida), chronická aktivní hepatitida.

V současné době existuje více než 200 druhů popsaných ANA namířené proti nukleových kyselin, histonů, bílkoviny jaderné membrány, spliceosomu komponenty, ribonukleoroteinov, jadérek a centromerických proteinů. Tímto způsobem poškozují pojivové tkáně, což přispělo k zavedení definice antinukleárního faktoru jako testu systémových onemocnění pojivového tkáně. Termínem "antinukleární faktor" se rozumí test pro detekci antinukleárních protilátek nepřímou imunofluorescenci.

Jeden způsob, jak odhalit antinukleární faktoru v krvi (protijaderné protilátky) je metoda nepřímé imunofluorescence za použití séra pacienta na buňkách tkáně transplantabilní linie Hep 2-lidské buňky (buňky, epiteliální karcinom hrtanu linie Hep-2, obsahující různé jaderné antigeny) za použití značeného konjugátu s lidskými protilátkami. Jako substráty mohou být použity i jiné buněčné linie lidských, ale díky dobré morfologie a snadnost kultivace je Hep-2 linie se stala uznávanou substrát nepřímá imunofluorescence. Detekční metoda Tan ANF byla vyvinuta v roce 1982, za použití substrátu transplantabilní lidský epiteloidní buněčné linie Hep-2. Tato buněčná linie odvozená od lidského adenokarcinomu hrtanu, je hlavní polyploidní neorogovevayuschy ploché epitelové buňky, které tvoří monovrstvy na skle. Pacient séra byly inkubovány s substrátem hedvábného papíru, kde jsou antinukleární protilátky ze séra pacienta (pokud je přítomen), spojeného s příslušným nukleární antigen. vazebná místa protilátky se detekují za použití anti-lidského antiséra značený fluoresceinem. Výsledkem reakce se vyhodnotí mikroskopií s použitím fluorescenčního mikroskopu a vizuální posouzení povahy luminiscence vázaných protilátek. Mezi výhody HEp-2 (v porovnání s živočišných tkání zmrazených řezech), je možno uvést vysokou frekvenci buněčného dělení, který umožňuje detekci protilátek na antigeny exprimované pouze na buněčné dělení a absence buněčné matrix tkáně, což brání zobrazování konkrétní luminiscence ve srovnání s histologických řezech. V některých onemocnění, jako je například SLE, systémové sklerodermie (systémová skleróza), některé infekce, imunitní systém vnímá pacientů jádra (jaderné proteiny) vlastní tkáňové buňky jako cizí a produkuje protilátky k němu (antinukleární protilátky - AHA). V tomto případě se k poškození pojivové tkáně, což usnadnilo zavedení antinukleárních faktor určující jako test pro systémová onemocnění pojivové tkáně.

Při interpretaci dat je třeba mít na paměti, že spektrum AHA zahrnuje velkou skupinu autoprotilátek k DNA, nukleoproteinům, histonům, jaderným ribonukleoproteinům a dalším jaderným složkám. Cílem testu je proto detekovat různé protilátky proti složkám jádra a cytoplazmy, které byly poprvé detekovány pomocí SLE. Další diagnostická kritéria pro test byly rozšířeny v souvislosti s detekcí těchto protilátek a dalších onemocnění spojivového tkáně.

Screeningové testy pro stanovení celkového ANA běžně používaný sadu těchto antigenů jsou hlavní markerů autoimunitních onemocnění pojivové tkáně a SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, SM, RNP / Sm, J01, centromerní antigeny B. Základní používá v moderních souprav pro detekci jaderných IgG třídy protilátek jsou reprezentované následující sady:

  1. 1. SS-A (Ro) - nukleární ribonukleoproteiny (polypeptidy). Protilátky proti nim jsou zjištěny často v systémové sklerózy (60% případů), Sjogrenův syndrom (70%) a v SLE (30% případů). Předpokládá se, že v případě zjištěno, že protilátky v krvi těhotných žen, to je indikátorem rizika zvýšení neonatální syndromu volchanochnopodobnogo u novorozenců (neonatální lupus syndrom). Tyto protilátky matky procházejí placentou a způsobují poškození plodu, což vede k hemolytické anémii a trombocytopenii. Závažné následky zahrnují poškození systému vedení srdce dítěte (až po konstantní kardiostimulátor). Bylo konstatováno, že ženy, které v průběhu těhotenství je významný titr protilátek byla detekována, bez zjevných klinických příznaků dále rozvíjet co nebo autoimunitní onemocnění, včetně SLE.
  2. 2. SS-B (La) - nukleární proteiny. Protilátky proti nim jsou detekovány až u 60% případů s Sjogrenovým syndromem a u 15% případů s SLE.
  3. 3. Scl-70 je proteinový enzym, který se podílí na výměně nukleových kyselin (topoizomeráza-1). Protilátky k tomuto proteinu jsou nejspecifické u systémové sklerodermie (až do 70% případů).
  4. 4. Dvouřetězcová DNA - přirozená DNA. Protilátky proti DNA jsou nejčastěji v SLE (až 80% případů) a prakticky nejsou stanoveny u revmatoidní artritidy a sklerodermie.
  5. 5. RNP / Sm - komplex RNP / Sm antigenů sestává z U1-ribonukleoproteinů: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; a také od Sm polypeptidů: SmA |, SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Protilátky proti těmto antigenům jsou nejvíce specifické pro smíšené onemocnění pojivových tkání - tj. v přítomnosti příznaků sklerodermie, revmatoidní artritida, lupus, polymyositida (asi 95%) a v menší míře pro SLE (30% případů).
  6. 6. Jo-1 - enzymová syntetáza aminoacyltransportní RNA. Autoanalýzy proti tomuto proteinu jsou diagnosticky významné při myositidě (polymyositida / dermatomyositida).
  7. 7. CENP-B (centromery) - Antitsetromernyh k detekci protilátek (anti-Centromera B), diagnostikovat CREST syndrom (syndrom aktivní je kombinace kůže kalcinóza, Raynaudův syndrom, jícnu dysmotilita, sklerodaktylie, telangiectasias). CREST syndrom provedení se týká systémové sklerodermie (systémová skleróza). Tyto protilátky u pacientů s prokázanou příznivého průběhu systémovou sklerózou a mluví o malých lézí vnitřních orgánů.
  8. 8. Hep-2 buňky - buňky lidského karcinomu hrtanu epiteliální linie Hep-2, který obsahuje mnoho různých jaderné antigeny, včetně antigenu SS-A (Ro) a centromer antigeny. Protilátky proti Hep-2 se vyskytují u pacientů s polymyositidou a dermatomyozitidou až do 90% případů.
  9. 9. Mitochondrie (PDC) - komplex PDC - pyruvát dehydrogenázy. Velká skupina antimitochondriální protilátek jsou protilátky, které byly vytvořené na enzymy komplexu pyruvát dehydrogenázy, který se nachází v mitochondriích buněk a zapojených do oxidační dekarboxylaci pyruvátu.

Často se objevuje ANA s biliární cirhózou.

AHA obvykle nepřechází do živých buněk, a proto je neškodná. Ale někdy vytvářejí komplexy antigen-protilátka, které způsobují poškození tkáně (jako například u SLE, poškození ledvin). V souvislosti s postižením mnoha orgánů v patologickém procesu je diagnostická hodnota definice AHA malá a výsledky analýzy pouze částečně potvrzují klinická data.

Kromě reumatických onemocnění se ANA nachází také v chronické aktivní hepatitidě až do 50% případů. Vzhled (nízké titry) je možný u zánětlivých onemocnění, onkologických a virových infekcí.

  • Srovnávací frekvence detekce antinukleárních protilátek.


Předchozí Článek

Antivirová terapie hepatitidy B

Následující Článek

Diagnóza viru hepatitidy C

Související Články Hepatitida