Antigen proti HIV: co to představuje, jakou roli hraje diagnostika?

Diagnostika viru imunitní nedostatečnosti se provádí různými způsoby. Nejoblíbenější nedávno přijaté ultra-citlivé testovací systémy. S jejich pomocí lze toto onemocnění identifikovat již v nejranějších stádiích. Pro tento účel se používá antigeny HIV, jejichž přítomnost v těle zaručuje nepříjemnou a nebezpečnou diagnózu. Pro jeho detekci je použito několik různých studií.

Proč je odpověď na antigenní protilátky HIV 1, 2 nejspolehlivějším indikátorem přítomnosti viru imunitní nedostatečnosti?

Test na virus viru imunitní nedostatečnosti ve veřejných léčebných zařízeních je bezplatný. Vyrábí se však ve dvou fázích v případě, že je to nutné. Zpočátku HIV není testován na HIV. První analýza přítomnosti nebo nepřítomnosti této nemoci je zaměřena na detekci protilátek. Jedná se o test ELISA. Analýza imunoenzymu umožňuje identifikovat osoby, u kterých není zaručeno, že jsou infikovány virem imunodeficience (v případě, že test byl proveden podle všech pravidel).

A také podmíněně infikované. Proč podmíněně? Faktem je, že protilátky proti HIV 1,2, na rozdíl od AH tohoto viru, jsou sekretovány v těle a z jiných důvodů. O čem přesně mluvíme. Za prvé, je to možné s onemocněními imunitního systému. V případě problémů s tímto životně důležitým systémem produkuje tělo protilátky jako ochranu, které jsou určeny enzymovou imunotestou, stejně jako ty, které se objevují v tomto nebezpečném onemocnění. Pokud se výsledek testu ELISA zdá být pozitivní, je pacientovi doporučena další studie, která je založena na detekci reakce AH-AT typu 1,2. Na klinikách se nejčastěji používá imunitní blot. Jedná se o nejběžnější typ analýzy pro detekci viru imunodeficience. S jeho pomocí je antigen a protilátky proti HIV 1 a 2 nejen detekovány, ale také testovány na pevnost reakce.

Jaký je antigen p24 vůči HIV?

Předtím, než mluvíme o tom, jaké metody lze detekovat HIV antigen, je třeba vysvětlit, co to je. Vědci zjistili, že hypertenze, která je označena na formě analýz a laboratorní označení p24 kapsidu je retrovirus. Jednoduše řečeno, jedná se o protein viru imunodeficience. Stanovení antigenu HIV není možné bez detekce protilátek prvního a druhého typu. Koneckonců, AH jsou silně vázány na protilátky. Jsou vytvořeny v těle, imunitní odpovědi na výskyt protilátek, které jsou samy o druh „vetřelců“, jejichž cílem je destrukcí imunitního systému a produkce nebezpečných biologického materiálu.

AT a AG na HIV 1 a 2 typy jsou odhaleny ve vzájemné reakci. První vykonává roli cizích molekul v lidském těle. Ty slouží jako druh vývojářů proteinů nebo polysacharidů. V případě viru imunitní nedostatečnosti vyvolává AH imunitní odpověď. Proto jsou v medicíně a vědě spojené se studiem této nemoci klasifikovány jako imunogeny.

P24 antigen HIV 1 a typu 2 se detekuje pouze komplexním studiem biologického materiálu. Nejčastěji se pro analýzu používá žilní krve. V některých případech je to vhodné pro spermie nebo sekreční tekutinu vylučovanou ženskými pohlavními orgány. Kombinovaná analýza HIV antigenů se provádí třemi známými způsoby. O čem konkrétních studiích mluvíme? Jedná se o imunoterapii, kombinovaný test (hiv combo HIV) a imunochemiluminiscenční analýzu. Každá z nich by měla být projednána zvlášť.

Imunitní skvrna: protilátky a antigeny proti HIV 1 a 2

Jak již bylo uvedeno výše, imunitní blot je jedním z nejběžnějších testů, které detekují antigen na HIV. Jak se vyrábí? Zpočátku pacient vezme krev z žíly. Zkouška se provádí na prázdném žaludku. Před třiceti čtyřiceti minutami se pacientovi nedoporučuje kouřit. Podstata studie spočívá v tom, že pokud má člověk virovou imunodeficienci typu 1 nebo typu 2, reakce antigen-protilátka je stabilní a nerozpustná. Biologický materiál subjektu je nejprve štěpen ve speciálním činidle a poté umístěn na pás, který je zpravidla blistr s polystyrenovými buňkami. Přidáním speciálních činidel, laboratorní technik, nejprve zkontroluje, zda dojde k této reakci, poté pomocí opakovaných myje krevní vyvozuje závěry o tom, jak odolná je. To nám dovoluje pochopit, zda v těle existuje virus viru imunitní nedostatečnosti, který je v budoucnu nejdůležitějším faktorem diagnostiky.

HIV testování AG-AT, produkované imunoterapií, se doporučuje podat nejdříve čtyři až pět týdnů po údajné infekci. Navzdory skutečnosti, že tento test je systém čtvrté generace, není příliš citlivý a má chybu několika procent (dva až tři).

Nadměrná citlivost: Hiv duo HIV (combo) protilátky 1, 2 typy

Kombinace testu HIV (hiv) ag-ab (AG-AT), na rozdíl od imunologického blotování, je přecitlivělá. Odborníci z oblasti medicíny se domnívají, že jeho použití je vhodné již dva týdny po údajné infekci. Zaměřuje se na studium specifických protilátek, které jsou jakousi imunitní odpovědí lidského těla na intervenentu, jako je virus imunodeficience, stejně jako AH p24. Hiv duo HIV protilátky typu 1 a 2 jsou také zaměřeny na detekci protilátek proti tomuto nebezpečnému onemocnění. S jeho pomocí je možné nejen detekovat je v krvi, ale také určit typ nemoci.

Kombinovaný test HIV kombinovaného antigenu. S jeho pomocí se také testuje reakce antigen-protilátka, což naznačuje přítomnost strašlivého onemocnění v těle.

Imunochemiluminiscenční analýza: hiv 1,2 combo HIV-AT-AG IHLA

Test HIV na HIV je také přecitlivělý. Jádrem takového vyšetřování je druh reakce AG-AT. Specifičnost metody je asi devadesát dva procent, zatímco její spolehlivost je od devadesát osm do devadesát devět. Z toho lze konstatovat, že v takové analýze existuje chyba, ale je poměrně malá. A pokud je to nutné, může se snadno překrýt opakovaným testováním. Tato analýza se používá po dvou až třech týdnech po údajné infekci.

Tento kombo test na HIV je zaměřen na studium žilní krve v případě kontroly přítomnosti viru imunodeficience v těle. Při identifikaci dalších onemocnění a patologií se používá moč nebo sekreční tekutina, která se uvolňuje z pohlavních orgánů. AT a AG k viru imunodeficience s IHL jsou také testovány na reakci. Za tímto účelem se používají speciální činidla a pás s buňkami. Výzkum provedený v několika fázích umožňuje rychle a přesně stanovit diagnózu nebo ji vyvrátit.

Všechny výše popsané způsoby diagnostiky viru imunitní nedostatečnosti prostřednictvím stabilní reakce AT-AG jsou účinné. Odcházejí se pouze z hlediska povolených podmínek studie. Lékař by měl rozhodnout, která metoda by měla být použita.

Antigenu P24 v séru

Ar p24 v séru obvykle chybí.

Arp24 je protein z HIV nukleotidové stěny. Stádia primárních projevů po infekci HIV je důsledkem nástupu replikačního procesu. Ag224 se v krvi objevuje 2 týdny po infekci a může být detekován ELISA během 2 až 8 týdnů. Po 2 měsících od nástupu infekce zmizí Ar p24 z krve. Dále v klinickém průběhu infekce HIV je zaznamenáno druhé zvýšení obsahu proteinu p24. Patří k období vzniku AIDS. Stávající ELISA testovací soupravy pro detekci p24 Ag se používá pro časnou detekci HIV v dárců krve a dětí, stanovení prognózy a sledování léčby onemocnění. Metoda ELISA má vysokou analytickou citlivost, která umožňuje detekci Ar p24 viru HIV-1 v krevním séru v koncentracích 5 až 10 pg / ml a menší než 0,5 ng / ml, HIV-2, a specifičnosti. Je však třeba poznamenat, že obsah Arp24 v krvi je předmětem individuálních změn, což znamená, že s touto studií lze identifikovat pouze 20-30% pacientů v časném období po infekci.

Protilátky proti p24 Ag třídy IgM a IgG v krvi se objeví, počínaje ve 2. týdnu, dosahuje vrcholu během 2-4 týdnů a udržuje se v jiném čase úroveň - IgM protilátek po dobu několika měsíců, mizí do jednoho roku od infekce, a Ig IgG mohou trvat léta.

Vznik tříd AT v různých stádiích infekce HIV je uveden na obr.

Obr. Vznik tříd AT v různých stádiích infekce HIV

Obr. Vznik tříd AT v různých stádiích infekce HIV

Metody diagnostiky infekce HIV

V současné době nové diagnostické technologie umožňují odhalit etiologické a patogenetické příčiny mnoha onemocnění a radikálně ovlivnit výsledky léčby. Snad nejvíce působivé výsledky zavedení těchto technologií do klinické praxe byly dosaženy v oblasti imunologie a diagnostiky infekčních onemocnění.

Testovací systémy založené na imunoenzymech a imunochemiluminiscenční analýze umožňují detekovat protilátky různých tříd, které významně zvyšují informačnou hodnotu klinické, analytické citlivosti a specifičnosti pro diagnostiku infekčních onemocnění. Je třeba poznamenat, že nejvýznamnější úspěchy v diagnostice infekcí souvisejí se zavedením metody polymerázové řetězové reakce do laboratorní praxe, která je považována za "zlatý standard" při diagnostice a hodnocení účinnosti léčby řady infekčních onemocnění.

, Krevní plazma, skřípání, mohou být použity v séru biopsie, pleurální nebo mozkomíšní mok (CSF) pro studium jiném biologickém materiálu. V první řadě, laboratorní diagnostika infekcí techniky zaměřen na detekci onemocnění, jako je virová hepatitida B, C, D, cytomegalovirem infekce, infekce, sexuálně přenosných infekcí (gonorrheal, chlamydie, mykoplazmy, Ureaplasma), tuberkulóza, HIV a další.

HIV infekce - onemocnění způsobené virem lidské imunitní nedostatečnosti (HIV), dlouho přetrvávající lymfocytů, makrofágů, buněk nervové tkáně, což vyvíjí pomalu progresivní poškození imunitního a nervového systému organismu, projevující se sekundární infekce, nádory, subakutní encefalitidy a dalších patologických změny.

Infekční agens, - lidské imunodeficience 1 a typu 2 (HIV-1, HIV-2) - patří do rodiny retrovirů, podčeledi pomalých virů. Viriony jsou kulovité částice o průměru 100-140 nm. Virové částice má vnější fosfolipidové povlak obsahující glykoproteiny (strukturální bílkoviny) s určitou molekulovou hmotností, měřené v kilodaltonů. HIV-1 - a gpl60, gpl20, gp41. Vnitřní obal viru, potahování jádra, jak je znázorněno proteiny se známou molekulovou hmotností - P17, P24, p55 (HIV-2 obsahuje gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

Složení genomu HIV zahrnuje RNA a enzymovou reverzní transkriptázu (revertázu). Za účelem propojení genomu retroviru s genomem hostitelské buňky dochází nejprve syntézou DNA na matrici virové RNA pomocí revertázy. Potom je provirovou DNA vložena do genomu hostitelské buňky. HIV má významnou antigenní variabilitu výrazně vyšší než variabilita viru chřipky.

U lidí, hlavním cílem HIV je T-lymfocyty, nesoucí na povrchu největší počet CD4 receptory. Po vstupu HIV do buňky prostřednictvím jeho reverzní transkriptázy vzorované syntetizuje RNA, DNA viru, který je integrován do genetického aparátu hostitelské buňky (CD4 lymfocyty), a zůstává tam pro život ve stavu proviru. Kromě T-limfotsitovhelperov postižených makrofágů, B lymfocytů, gliových buněk střevní sliznice a některé další buňky. Důvodem pro snížení počtu T-lymfocytů (CD4 + buňky) je nejen přímý cytopatický účinek viru, ale také k jejich fúzi s neinfikovanými buňkami. Spolu s lézemi T lymfocytů u pacientů s HIV infekcí je třeba poznamenat, polyklonální aktivaci B-lymfocytů se zvýšením syntézy všech tříd imunoglobulinů, zvláště IgG a IgA, a následné vyčerpání imunitního systému karty. Porucha regulace imunitních procesů projevuje zvýšenou hladinou a-interferonu, p2-mikroglobulinu, snížené hladiny IL-2. V důsledku dysfunkce imunitního systému, zejména ve snížení počtu T-lymfocytů (CD4) na 400 buněk na 1 ml krve nebo méně, existují podmínky pro nekontrolované replikace HIV s výrazným zvýšením počtu virionů v různých prostředích organismu. V důsledku zničení mnoha částí imunitního systému člověka, infikovaného HIV, je vystavena na patogeny různým infekcím.

Na pozadí rostoucí imunodeprese se objevují závažné progresivní nemoci, které se nevyskytují u osoby s normálně fungujícím imunitním systémem. Jedná se o onemocnění, která Světová zdravotnická organizace (WHO) definovala jako indikátory AIDS nebo AIDS-indikátory.

Onemocnění indikátorů AIDS

První skupina - onemocnění inherentní pouze u těžké imunodeficience (CD4 úroveň 74,100 kopií / ml téměř všichni pacienti rozvinou klinický obraz AIDS (Senior D., Holden E., 1996).

Pravděpodobnost vývoje AIDS je 10,8krát vyšší u lidí s HIV-1 v krvi> 10 000 kopií / ml než u osob s HIV-1 v krvi 20 000 kopií / ml (PCR). Vyhodnocení výsledků antiretrovirové terapie u lidí infikovaných HIV se provádí za účelem snížení hladiny HIV RNA HIV séra.

Při účinné léčbě by měla hladina viremie během prvních 8 týdnů klesnout 10krát a měla by být pod limitem citlivosti metody (PCR) (

Tabulka přepisu výsledků testu HIV

Zvláštní pozornost je v současné době věnována diagnostice HIV (lidské imunodeficience viru) u lidí. Detekce onemocnění v počáteční fázi pomůže zahájit léčbu dříve a to významně ovlivní životnost pacienta.

Po provedení testu HIV je interpretace výsledků obvykle pozitivní nebo negativní. V tomto případě existuje primární diagnóza a sekundární diagnóza. Na primární - osobní kontrola prostřednictvím IFA. V případě potřeby se provede opakovaný krevní test na HIV. Co znamená pozitivní a negativní výsledek? Jak se provádí přepis testu HIV? Proč člověk, který není alkoholikem a alkoholikem, má trvalého sexuálního partnera a dešifruje analýzu viru imunitní nedostatečnosti, přináší pozitivní, ale pochybný výsledek?

O HIV

Kauzální agens choroby jsou 1. a 2. typu. Po dlouhou dobu jejich přítomnost v osobě zůstává bez povšimnutí, pak je imunita postižena nejdříve a pak další lidské systémy.

Hlavní metodou laboratorní diagnostiky viru imunodeficience jsou protilátky proti HIV. Imunoenzymní analýza (ELISA) je základem metody, je citlivá (99,5% a vyšší) a specifická (99,8% a vyšší). Kromě toho je při diagnostice HIV pomocí EIA stanoven antigen p24.

Každý testovací systém má různé ukazatele, v souvislosti s nimž určují různé struktury proteinů v obálkách viru. HIV patogeny jsou dvou podtypů: 1. a 2. nebo HIV-1 a HIV-2. Virové částice vypadají jako sférický tvar, který má vnější fosfolipidovou membránu. Pro první subtyp má následující molekulární hmotnost: gp120, gp41, gp160. Druhý podtyp obsahuje gp105, gp36, gp140. Pro vnitřní plášť viru je také známá molekulová hmotnost. Pro první subtyp je to p55, p17, p24. Pro 2. - p16, p25, p55.

Pro každý testovací systém pro určení viru existují tři základní sady proteinů.

Výsledky ELISA mohou být obecně:

• negativní;
• falešně pozitivní;
• falešně negativní;
• pochybné nebo nejisté.

Diagnostické metody identifikují antigeny, protilátky.

O normálním výsledku

Norm - co to znamená? Pokud je test HIV negativní, považuje se za normální.

1. Nejnovější generace testovacích systémů ELISA může stanovit přítomnost protilátek proti HIV a proteinovým částicím. Pokud je analýza normální, pak krev nenachází protilátky a částice bílkovin patogenu. Ale je přesné říci, že osoba je zdravá na základě tohoto může být, pokud před předáním to nebylo žádné riziko infekce na 3 měsíce. V opačném případě znovu po určité době musíte test zopakovat.

Byly případy, kdy byl HIV zjištěn pouze po 6 měsících. Pokud je výsledek záporný a došlo k kontaktu s pacienty infikovanými HIV, je třeba spolehlivost opakovat po třech, čtyřech a šesti měsících. Stává se, že metoda ELISA dala negativní výsledek a osoba má jasně podezření na přítomnost příznaků HIV, pak se doporučuje znovu provést test. Chybný výsledek je možný kvůli časnému načasování analýzy nebo kvůli lidskému faktoru.

2. Pokud je výsledek s imunoblottem negativní, je v současné době nejspolehlivější analýzou.

Pokud má člověk virus imunitní nedostatečnosti a výsledek je negativní, pak je to pravděpodobně lékařská chyba, která může nastat v jakékoli fázi testu. Pokud je výsledek imunoblotu ve třech a šesti měsících negativní, pak se nemusíte bát, to znamená normu. A až po negativní reakci imunoblotu bude vydán certifikát, že test HIV je negativní.

3. Výzkum PCR u dospělých, kdy se diagnostikuje virus imunodeficience, se používá extrémně vzácně a tato metoda se používá u nově narozených dětí.

Norma se také považuje za negativní výsledek.

4. Podle sociologického výzkumu mnoho lidí používá rychlý test na HIV. Při pohledu na negativní pás se lidé uklidní a odmítají jít do zdravotnického zařízení, i když jsou všechny známky HIV infekce. Ale musíte vědět, že přesnost expresního testu je osmdesát pět procent. Navíc můžete doma provést chybné jednání nebo porušit podmínky jejího ukládání. Je stále velmi pravděpodobné, že výsledek je nesprávný. Dokonce 8 hodin před testováním ovlivní výsledek testu minerální alkalická voda. Proto skutečnost, že virus člověka je nedostatečný v osobě na základě výslovného testu, i když je negativní, není v žádném případě vždy pravdivým tvrzením.

Vysvětlení analýzy

Po provedení testování se lidé často diví, jak dešifrovat výsledek výzkumu, co dělat, pokud se pozitivní výsledek pro HIV vyskytne.

1. Pokud ELISA prokázala přítomnost všech nebo téměř všech protilátek proti antigenům podle tohoto testovacího systému, znamená to pozitivní HIV test. Pokud je odpověď po druhém imunoanalýze enzymu v séru pozitivní, měl by být proveden imunoblot. Dešifrování jeho výsledků bude správnější. Pokud enzymová imunotest poskytne pozitivní výsledek, další analýza imunoblotu také prokázala přítomnost HIV, pak je konečný výsledek. Při rozkládání analýz je nutné vědět, že je stanoven pozitivní test HIV:

• od 60% do 65% 28 dnů po infekci;
• v 80% - za 42 dnů;
• v 90% - za 56 dní;
• u 95% za 84 dnů.

Pokud je odpověď na HIV pozitivní, pak to bude znamenat, že jsou detekovány protilátky proti viru. Abyste se vyhnuli falešně pozitivní reakci, musíte znovu otestovat, nejlépe dvakrát. Pokud jsou protilátky proti imunodeficienci detekovány, pokud jsou dva testy podávány ze dvou, nebo pokud jsou ve dvou z nich uvedeny tři testy, považuje se výsledek za pozitivní.

Antigen p24 může být detekován v krvi po 14 dnech od data infekce. Při použití enzymatického imunoanalýzy se tento antigen detekuje od 14 do 56 dnů. Po 60 dnech už není v krvi. Teprve tehdy, když tělo tvoří AIDS, dochází opět k růstu tohoto proteinu p24 v krvi. Systémy enzymatických imunosorbentů se proto používají k detekci HIV v prvních dnech infekce nebo ke zjištění, jak probíhá onemocnění a řídí proces léčby. Vysoká citlivost analytické imunologický test detekuje p24 antigenu v biologickém materiálu v první HIV podtyp v koncentraci 5 až 10 pg / ml, s druhým HIV podtyp od 0,5 ng / ml a menší.

2. Na základě pochybných výsledků ELISA znamenalo, že diagnóza někde chybu, obvykle něco zmatená zdravotnický personál nebo osoba, která má příznaky infekce, a výsledek je negativní, že je podezřelý, ten poslal pro opětovnou analýzu změny.

3. Falešně pozitivní výsledek je výsledek, kdy byly provedeny krevní testy v následujících podmínkách pacienta:

• těhotenství;
• pokud má člověk hormonální pozadí;
• s prodlouženou imunodepresí.

Jak rozdělit analýzu v tomto případě? Falešně pozitivní výsledek je kladen, pokud je zjištěn alespoň jeden protein.

Vzhledem k tomu, že antigen p24 je vysoce závislá na individuálních změnách, pak je v této první fázi infekce zjištěno použití této metody od 20% do 30% pacientů.

Na parametrech po polymerázové řetězové reakci

Pomocí této metody se HIV RNA a DNA detekují téměř okamžitě po infekci. Neexistuje však definitivní diagnóza, musí být potvrzena jinými metodami. "Pomozte mi rozluštit výsledek PCR." - Docela často slyšíte takovou žádost. Co je v tomto případě napsáno, pokud je nalezen virus imunodeficience? V reakci na výsledek analýzy provedené pomocí PCR je uveden počet kopií RNA v mililitrech krve. Tabulka níže ukazuje výsledek v závislosti na kvantitativních charakteristikách v krvi.

Co to znamená: máte (nedetekovatelné) protilátky proti HIV

Jednou z nejspolehlivějších studií na HIV je ELISA (enzymová imunotest). K detekci přítomnosti viru imunitní nedostatečnosti v krvi se provádí testování protilátek. Mám se starat, jestli nebyly nalezeny? Co znamená pozitivní ELISA?

Co jsou protilátky proti HIV v krvi

Pokud do lidského těla vstoupí patogenní virus, začne imunitní systém produkovat protilátky proti HIV. Pokud se takovéto vazby na bílkoviny objeví ve zkušebním vzorku krve, je to poplachový signál. Existuje vysoká pravděpodobnost, že osoba je nakažena nebezpečným virem. Zjištěný antigen HIV p24 ukazuje, že nedávno došlo k infekci virem imunodeficience. Antigen je organická hmota. Jeho množství v krvi klesá, protože tělo produkuje protilátky. Počet protilátek na jednotku krve umožňuje předpovědět vývoj onemocnění.

Další důležitou vlastností je virové zátěž (koncentrace virových buněk v 1 ml krevní plazmy). Čím větší je hodnota tohoto indikátoru, tím silnější je imunitní systém potlačen. Nemůže zabránit reprodukci viru.

Po jaké době se objeví protilátky proti HIV

Imunoenzymová analýza HIV se provádí 3 až 4 týdny po možné infekci. Učinit to dříve je bezvýznamné, protože protilátky se dosud nevytvořily nebo byly příliš málo. Pokud dojde k infekci a v krvi není žádná protilátka proti HIV, pak se takový test nazývá falešně negativní. Pro konečnou diagnózu není primární pozitivní reakce testů HIV dostatečná. Zárukou spolehlivosti studií je přezkoumání. Nová diagnóza se provádí po 3 měsících a po šesti měsících. Pokud jsou všechny výsledky pozitivní, jsou naplánovány další testy.

Určené pojmy jsou průměrné. V každém jednotlivém případě je časování jiné. Pokud by část infikovaného biomateriálu, která se dostala do vnitřního prostředí těla, byla velká, ochranné proteiny - protilátky - se mohou tvořit za týden. To je možné s transfuzí infikované krve. V 0,5% případů může být HIV detekován až po uplynutí jednoho roku. K tomu dochází, pokud je počet virových buněk velmi malý.

Čas, kdy se v těle infikované osoby objevují protilátky:

• v 90 - 95% případů - 3 měsíce po údajné infekci;
• v 5 - 9% případů po 6 měsících;
• v 0,5 - 1% případů - později.

Sazby ukazatelů přítomnosti protilátek

Protilátky nebo imunoglobuliny se vytvářejí, když cizí viry a bakterie vstupují do těla, stejně jako jakékoli škodlivé organické sloučeniny. Pro každou virovou buňku existuje antagonista. Vytváří se jedinečné dvojice: cizí buňka + imunoglobulin. Po identifikaci protilátek přítomných v těle se lékaři dozvídají o virech, které vyvolaly jejich výskyt. Imunoglobuliny jsou rozděleny do 5 skupin:

1. IgA - jsou odpovědné za imunitní reakci při nachlazení, zánětech kůže, všeobecné intoxikaci;
2. IgE - jsou určeny k boji proti parazitům;
3. IgM je strážcem těla. "Oni" napadají "virové buňky, jakmile vstoupí do krve;
4. IgD - zatímco směr jejich činnosti není znám. Takové imunoglobuliny nejsou větší než 1%;
5. IgG - poskytuje odolnost v dlouhém průběhu onemocnění, je zodpovědný za ochranu plodu v děloze a je hlavní bariérou proti virům u novorozenců. Zvýšení hladin IgG v krvi může znamenat vývoj HIV.

Normální IgG (gigamol na litr)

Děti od 7,4 do 13,6 g / l

Dospělí od 7,8 do 18,5 g / l

K identifikaci protilátek proti HIV se provádí kvantitativní analýza. Negativní výsledek je normou pro zdravou osobu. Pozitivní test naznačuje průnik virových částic do těla, proti kterým jsou syntetizovány ochranné imunoglobuliny.

Pokud je ve sloupci "protilátky" v pořadí "+", je ještě příliš brzy na to, aby byly shrnuty, jsou naplánovány další studie. HIV infekce není vždy příčinou pozitivní reakce. Jiné příčiny abnormalit často vyskytují. Příčiny falešně pozitivních reakcí:

• Během prvních 18 měsíců života v krvi dítěte jsou obsaženy imunoglobuliny získané od matky během těhotenství;
• proud v těle autoimunitních procesů;
• přítomnost revmatoidního faktoru;
• užívání léků.

Kvantitativní analýza pomáhá určit stádium onemocnění. Pokud je počet imunoglobulinů nevýznamný, onemocnění se začíná rozvíjet. Prognóza v tomto případě je příznivá. Vysoká koncentrace ochranných proteinů může znamenat, že HIV dosáhl konečné fáze - AIDS.

Izolujte typy HIV 1 a 2. Každá z nich způsobuje tvorbu určitých protilátek. Kvalitativní analýza pomáhá určit typ protilátek. Ve formě těchto testů jsou označeny čísla 1 a 2 a údaje jsou vyplněny před každým z nich.

Jak protilátky proti HIV

Sérum je izolováno z části žilní krve. Aplikuje se na pevnou bázi a kombinuje se s virovými buňkami. Poté je povrch ošetřen speciálními enzymy. V krvi, kde byly původně přítomny viry s imunodeficiencí, se po promytí produkují protilátky.

Osoba, která musí darovat krev na protilátky, 2 dny před analýzou by měla vzdát mastných a kořeněných potravin, nepijí alkoholické nápoje. Po dobu 2 týdnů se doporučuje přestat užívat antivirové léky. Všechny léky by měly být konzumovány pouze v případě, kdy je to naprosto nezbytné. V předvečer testu se doporučuje psychologický a fyzický odpočinek. Analýza se provádí na prázdném žaludku ráno. Studie o přítomnosti protilátek jsou považovány za nejspolehlivější v diagnostice infekce HIV. Chyba není větší než 2%.

Indikace ELISA, včetně klinických příznaků HIV:

• trvalé recidivy infekčních onemocnění;
• prodloužená horečka;
• vysoká pravděpodobnost infekce (nechráněný sex nebo krevní transfúze u HIV pozitivní osoby);
• hospitalizace v nemocnici;
• Dárcovství krve dárce;
• plánování těhotenství a jeho průběh;
• trauma s jehlou nebo jiným ostrým předmětem infikovaným biologickým materiálem;
• před operací.

Známky HIV se nemusí zobrazit okamžitě. V některých případech se nemoc necítí příliš dlouhá (až 10 let). Tato skutečnost zabraňuje včasné diagnostice a léčbě. Abychom včas rozpoznali virus viru lidské imunodeficience, je nutné absolvovat testy při nejmenším podezření. Pokud je diagnóza potvrzena, jsou identifikováni všichni sexuální partneři nakažených. Měli by vzít testy a stanovit jejich status HIV. Lékařský personál pracující s pacienty s HIV se musí podrobit plánované kontrole.

Test HIV / AIDS - antigen p24 v krvi

Antigen p24 v séru obvykle chybí.

P24 antigen je protein z HIV nukleotidové stěny. Stádia primárních projevů po infekci HIV je důsledkem nástupu replikačního procesu. Antigen p24 se objeví v krvi 2 týdny po infekci a může být detekován pomocí ELISA během 2 až 8 týdnů. Po 2 měsících od nástupu infekce zmizí antigen z p24 z krve. Dále v klinickém průběhu infekce HIV je zaznamenáno druhé zvýšení obsahu proteinu p24. Patří k období vzniku AIDS.

Stávající ELISA testovací soupravy pro detekci antigenu p24 se používá pro časnou detekci HIV v dárců krve a dětí, stanovení prognózy a sledování léčby onemocnění. Metoda ELISA má vysokou analytickou citlivost, umožňující detekci HIV-1 p24 antigenu v séru v koncentraci 5 až 10 pg / ml a menší než 0,5 ng / ml, HIV-2, a specifičnosti. Mělo by však být poznamenáno, že hladiny antigenu p24 se mohou jednotlivé variace, což znamená, že pouze 20 až 30% pacientů, mohou být identifikovány v této studii v raném období po infekci.

Protilátky pro antigen p24 třídy IgM a IgG v krvi se objeví, počínaje ve 2. týdnu, dosahuje vrcholu během 2-4 týdnů a udržuje se na úrovni různých časech - IgM protilátek za několik měsíců, mizí do jednoho roku od infekce, a IgG protilátky mohou trvat léta.

Protilátky proti HIV 1 a 2 a antigenům HIV 1 a 2 (HIV Ag / Ab Combo)

Protilátky proti HIV 1 a 2 a antigenům HIV 1 a 2 (HIV Ag / Ab Combo) - úplný popis diagnózy, indikace k provedení, interpretace výsledků.

Protilátky proti HIV 1 a 2 a antigenům HIV 1 a 2 (HIV Ag / Ab Combo) - protilátky vytvořené v těle, když jsou infikovány virem lidské imunodeficience.

Virus lidské imunodeficience (HIV) člen rodiny retrovirů, poškozuje buňky imunitního systému. Virus je dvou typů, HIV-1 je častější a HIV-2 je více rozšířený v afrických zemích.

HIV je zabudován do lidských buněk, rozmnožují se vírové částice, což vede k vzniku antigenů viru na povrchu buněk, ke kterým se vytvářejí odpovídající protilátky. Jejich detekce v krvi umožňuje diagnostikovat infekci HIV.

Identifikovat protilátky proti viru lidské imunodeficience může být tři až šest týdnů po vniknutí viru do krve. Prudké zvýšení viru v krvi je charakteristické pro stadium primárních projevů, toto období spadá na třetí nebo šestý týden od okamžiku infekce a nazývá se "sérokonverzí". V tomto okamžiku může být infekce detekována v laboratoři a klinicky se buď vůbec nevykazuje, nebo pokračuje jako studená onemocnění s nárůstem mízních uzlin.

Po 12 týdnech od infekce se objevují protilátky téměř ve všech případech. V poslední fázi onemocnění nazývaného AIDS se počet protilátek snižuje.

V jaké době od okamžiku infekce bude zjištěna infekce HIV, závisí na testovacím systému používaném v konkrétní laboratoři. Kombinované testovací systémy čtvrté generace detekují infekci HIV dva týdny po vniknutí viru do krevního oběhu. Testovací systémy první generace detekovaly HIV až po 6-12 týdnech.

Při provádění kombinované analýzy je možné detekovat HIV antigen p24, což je kapsida viru. Je určena v krvi po 1-4 týdnech po infekci, ještě před zvýšením koncentrace protilátek v krvi (před "sérokonverzí"). Také v kombinované studii jsou protilátky proti HIV-1, HIV-2 k dispozici pro diagnózu dva až osm týdnů po infekci.

Před sérokonverzí se v krvi nachází jak p24, tak protilátky proti HIV-1, HIV-2. Po sérokonverzi se protilátka váže na p24 antigen, takže p24 není detekován a detekovány protilátky proti HIV-1 a HIV-2. Pak se v krvi znovu objeví p24 a protilátky proti HIV-1, HIV-2. Když HIV-infikovaná osoba rozvíjí AIDS, vývoj protilátek je přerušený, takže protilátky proti HIV-1 a HIV-2 mohou být chybějící.

Diagnóza infekce HIV se provádí ve fázi plánování těhotenství a během současného sledování těhotné ženy, protože infekce HIV může být přenesen z ženy na plod během těhotenství, porodu a kojení.

Indikace pro diagnózu HIV

Náhodný sex.

Horečka bez objektivních důvodů.

Rozšíření mízních uzlin v několika anatomických oblastech.

Příprava na výzkum

Test na HIV se provádí 3-4 týdny po údajné infekci. Pokud je výsledek záporný, analýza se opakuje po třech a šesti měsících.

Od posledního jídla až po odběr krve by časový interval měl být delší než osm hodin.

V předvečer vyloučení ze stravy tučných potravin nepijte alkohol.

Po dobu 1 hodiny před tím, než budete mít krev pro analýzu, nemůžete kouřit.

Nedoporučuje se darovat krev bezprostředně po provedení fluorografie, rentgenografie, ultrazvuku, fyzioterapie.

Krev se vyšetří ráno na prázdný žaludek, dokonce i čaj nebo káva.

Je povoleno pít obyčejnou vodu.

Po dobu 20-30 minut před zahájením studie se pacientovi doporučuje emoční a fyzický odpočinek.

Materiál pro výzkum

Dekódování výsledků diagnózy HIV

Analýza je kvalitativní. Pokud protilátky proti HIV nejsou nalezeny, odpověď je "negativní".

Pokud jsou detekovány protilátky proti HIV, analýza se opakuje s jinou sérií testů. Druhý pozitivní výsledek vyžaduje imunoblotovou metodu, "zlatý standard" diagnózy HIV.

Norma: negativní odpověď.

1. Osoba není infikována HIV.
2. Terminální stadium infekce HIV (AIDS).
3. Seronegativní varianty infekce HIV (později tvorba protilátek proti HIV).

Pozitivní odpověď.

1. Osoba je infikována HIV.
2. Tento test není informativní u dětí mladších jeden a půl roku, které se narodily z matek infikovaných HIV.
3. Falešně pozitivní výsledek v přítomnosti protilátek v krvi vůči viru Epstein-Barr, hlavnímu komplexu histokompatibility, revmatoidnímu faktoru.

Vyberte si příznaky, které se vás týkají, odpovězte na otázky. Zjistěte, jak závažný je váš problém a zda potřebujete navštívit lékaře.

Před použitím informací poskytnutých společností medportal.org si prosím přečtěte podmínky uživatelské smlouvy.

Uživatelská dohoda

Stránky medportal.org poskytují služby za podmínek popsaných v tomto dokumentu. Používáním této webové stránky berete na vědomí, že jste si před použitím tohoto webu přečetli podmínky této smlouvy o užívání a plně přijali všechny podmínky této smlouvy. Nepoužívejte prosím web, pokud nesouhlasíte s těmito podmínkami.

Popis služby

Veškeré informace zveřejněné na webu jsou orientační povahy, informace získané z otevřených zdrojů jsou referenční a nejsou reklamní. Stránky medportal.org poskytují služby, které umožňují uživateli vyhledávat léky v datech získaných z lékáren v rámci dohody mezi lékárnami a webem medportal.org. Pro usnadnění používání webu jsou údaje o léčivých přípravcích, doplňcích stravy systematizovány a mají jediný pravopis.

Stránky medportal.org poskytují služby, které umožňují uživateli vyhledávat kliniku a další lékařské informace.

Omezení odpovědnosti

Informace umístěné ve výsledcích vyhledávání nejsou veřejnou nabídkou. Správa webu medportal.org nezaručuje přesnost, úplnost a (nebo) relevanci zobrazovaných dat. Správa webu medportal.org nenese odpovědnost za škody nebo škody, které by mohly vzniknout z přístupu nebo neschopnosti přístupu na stránky nebo z použití nebo neschopnosti používat tento web.

Přijetím podmínek této smlouvy plně rozumíte a souhlasíte s tím, že:

Informace na webu jsou pouze orientační.

Správa webu medportal.org nezaručuje neexistenci chyb a nesrovnalostí ohledně deklarovaných stránek a skutečné dostupnosti zboží a ceny zboží v lékárně.

Uživatel se zavazuje objasnit informace, které jsou pro něj zajímavé, telefonicky v lékárně nebo používat informace, které jsou poskytovány podle jeho uvážení.

Správa webu medportal.org nezaručuje, že chyby a nesrovnalosti týkající se harmonogramu práce na klinikách, jejich kontaktních informací - telefonních čísel a adres.

Správa webu medportal.org ani žádné jiné strany zapojené do procesu zveřejňování informací nese odpovědnost za škody nebo škody, které byste mohli vyvstat z úplné závislosti na informacích poskytovaných na této webové stránce.

Správa webu medportal.org se zavazuje a zavazuje se, že bude i nadále usilovat o minimalizaci nesrovnalostí a chyb v poskytnutých informacích.

Správa webu medportal.org nezaručuje neexistenci technických poruch, a to ani v souvislosti s provozem softwaru. Správa webu medportal.org se zavazuje, že co nejdříve vynaloží veškeré úsilí, aby odstranila chyby a chyby v případě jejich výskytu.

Uživatel je upozorněn, že správa webu medportal.org není zodpovědná za návštěvu a používání externích zdrojů, odkazy na které mohou být obsaženy na webu, neposkytují souhlas s jejich obsahem a nenese odpovědnost za jejich dostupnost.

Správa webu medportal.org si vyhrazuje právo pozastavit provoz stránky, částečně nebo úplně změnit jeho obsah, změnit smlouvu o užívání. Takové změny se provádějí pouze na základě rozhodnutí správce bez předchozího upozornění uživatele.

Berete na vědomí, že jste si přečetli podmínky této Smlouvy o užívání a plně přijali všechny podmínky této Smlouvy.

Reklamní informace, jejichž umístění na webových stránkách je s inzerentem dohodnuto, je označeno "na reklamní práva".

Antigen p24 co to je

Klinická a laboratorní diagnostika infekce HIV má tři směry:

1. Zjištění faktu infekce HIV, diagnostika infekce HIV.
2. Stanovení stupně klinického průběhu onemocnění a identifikace sekundárních onemocnění.
3. Prognóza progrese klinického průběhu onemocnění, laboratorní sledování účinnosti léčby a vedlejší účinky antiretrovirových léků.

1. Identifikace infekce HIV, diagnostika infekce HIV

Pro stanovení infekce HIV se používají následující specifické ukazatele: HIV protilátky, HIV antigeny, HIV RNA a provirus DNA. Protilátky proti HIV se určují metodou enzymového imunotestu (ELISA) nebo imunoblotováním, což je ve skutečnosti druh ELISA. Antigeny (proteiny) HIV jsou stanoveny metodou ELISA. Pomocí molekulárně genetických metod polymerázové řetězové reakce (PNR) a bDNA lze stanovit HIV RNA a provirovou DNA. Přidání metody hybridizace nukleových kyselin se specifickými DNA sondami umožňuje ověřit specificitu sekvencí DNA získaných během PCR. Citlivost PCR je detekce virových genů v jedné z pěti tisíc buněk [27].

Při primární infekci je pozorována následující dynamika markerů HIV v krvi infikovaných osob. V prvním měsíci v důsledku aktivace replikativní procesu dochází k prudkému nárůstu virové zátěže (obsah plazmatické HIV RNA), a pak, vzhledem k masové šíření viru a infekci cílových buněk v krvi a lymfatických uzlin, je možné určení provirové DNA. Nejdůležitější diagnostickou hodnotou je skutečnost odhalení DNA proviru integrovaného do genomu cílové buňky.

Virové zatížení odráží intenzitu replikačního procesu u infikovaných buněk. Během období primární infekce je úroveň virové zátěže odlišná, když je infikována různými podtypy HIV, ale dynamika jejích změn je přibližně stejná. Tak, když infikovány subtypu B, například, v případě, že první měsíc po výzva hodnotu virové zátěže 700 kopií / ml, pak se ve 2. měsíci je snížení na 600, do 3 minut - až 100, 4 minuty - 50 kopie / ml. Tato dynamika je pozorována na pozadí zvýšení obsahu specifických protilátek proti HIV v krvi. Obsah provirové DNA v infikovaných HIV mononukleární krve, vyznačující se tím relativně konstantní během prvních 6 měsíců, s menšími výkyvy v určitých subtypů. RNA a zatížení DNA tedy nejsou totožné.

V inkubačním stupni se po určitou dobu nevytvářejí žádné specifické protilátky proti HIV v množství dostatečném k určení stávajícími laboratorními metodami. Předtím, než jsou protilátky registrovány po velmi krátkou dobu, vznik krve proteinu Nef, který je potlačován replikačním procesem, a strukturního proteinu p24. Antigen p24 může být detekován v krvi metodou imunoenzymatické analýzy po 1-2 dnech po infekci a stanoven až do 8. týdne, pak je jeho obsah prudce snížen. Dále v klinickém průběhu infekce HIV dochází k druhému zvýšení obsahu krevního proteinu p24 v krvi. Patří k období vzniku AIDS. Zmizení volných (nevázaných protilátkami) proteinů jádra p24 a výskyt specifických protilátek proti HIV proteinům v krvi naznačují nástup sérokonverze (obrázek 9.6).

Viremie a antigenemie způsobují tvorbu specifických protilátek třídy IgM (anti-p24, anti-gp41, anti-gpl120, anti-gpl60). třídy bez protilátek IgM a IgG na protein p24 se může zobrazit začíná ve 2. týdnu, jejich obsah se zvyšuje během 2-4 týdnů, dosažení určité úrovně, která přetrvává po několik měsíců (IgM) a S (IgG) (Obr. 9.7).

Vzhled kompletní sérokonverze při periferní krve zaznamenané vysoké hladiny specifických třídy IgG protilátek proti strukturních proteinů HIV p24, gp41, gp120, gp160, což výrazně usnadňuje diagnózu infekce HIV. Protilátky proti HIV se objevují u 90-95% infikovaných během 3 měsíců po infekci, u 5-9% - v období od 3 do 6 měsíců od infekce a v pozdějším termínu 0,5-1%.

Navzdory skutečnosti, že naposledy se objevují protilátky proti HIV, dosavadním hlavním laboratorním diagnostickým indexem je detekce specifických protilátek ELISA a imunoblotování.

Data uvedená v tabulce 9.2 [zobrazit] a 9.3 [zobrazit], vizuálně demonstrují vysokou citlivost moderních imunoenzymových testovacích systémů pro detekci protilátek proti HIV, které přesahují citlivost imunoblotování. V některých případech může být při primárním pozitivním výsledku testu ELISA potvrzeno imunoblotování až po 2-3 týdnech.

Ve studii u pacientů infikovaných HIV (HIV-pozitivní) s použitím testovacích systémů imunoblotem předních světových firem ve všech případech detekovány protilátky proti gp160 a p24 / 25 protilátky na jiné proteiny přítomné v 38,8-93,3% případů (Tabulka. 9.4 [zobrazit] ).

se mohou vyskytnout obtíže při detekci protilátek u pacientů s HIV infekcí v období masivní virémie a antigenémie pokud existují specifické protilátky v krvi spojené s virovými částicemi a replikativní procesu dopředu mezi nových antivirových protilátek. Taková situace může vzniknout a zmizet během infekčního procesu [15].

U pacientů s původně oslabeným imunitním systémem se viremie a antigenémie objevují dříve a zůstávají na vysoké úrovni před výsledkem onemocnění. U těchto pacientů mají nízké hladiny volných protilátek proti HIV ze dvou důvodů - nedostatečná produkce protilátek B-lymfocyty a vázání virionů a rozpustných proteinů z HIV protilátek, a proto se pro určení infekce požadované testovací systém se zvýšenou citlivostí nebo upravit metody analýzy zahrnuje následující kroky protilátek uvolnění z imunitních komplexů [7].

Nejčastěji dochází k poklesu obsahu protilátek proti HIV z výše uvedených důvodů v terminálním stadiu, kdy protilátky proti HIV v séru nemohou být zachyceny metodami enzymového imunoanalýzy ani metodou Western blot. Kromě výskytu specifických protilátek proti HIV je imunitní odpověď v prvních 4 měsících charakterizována snížením obsahu krevního infikovaného CD4 + a zvýšením počtu CD8 + buněk. Dále je obsah buněk nesoucích CD4 a CD8 receptory stabilizován a zůstává po určitou dobu nezměněn. Zvýšení obsahu CD8-lymfocytů je ochranná reakce, protože buněčně závislá kptotoxicita je realizována CD8 + lymfocyty, které jsou zaměřeny na destrukci buněk infikovaných HPV. Zpočátku, cytotoxické lymfocyty (CTL), v reakci na regulační protein Nef viru, který hraje důležitou roli při snižování virové (RNA) zatížení u HIV-infikovaných plazmy v prvních měsících. Poté se vytvoří odpověď CTL na jiné, vč. strukturálně na HIV proteiny, v důsledku čehož se po 12 měsících po infekci významně zvýší cytotoxický účinek.

Schémata laboratorní diagnostiky infekce HIV

Vzhledem k dané dynamice specifických markerů infekce HIV v praxi je vhodné dodržovat následující schémata laboratorní diagnostiky u dospělých (obr. 9.8-9.10).

Grafy odrážejí tři hlavní stadia primární laboratorní diagnostiky infekce HIV:

1. Screening.
2. Odkaz.
3. Expert.

Potřeba několika fází laboratorní diagnostiky je primárně způsobena ekonomickými úvahami. Například náklady na používání domácí testovací systémy jeden expertní studii imunoblotem až $ 40, stínící (ELISA) - 0,2, tj. V poměru 1: 200.

V prvním stadiu (obrázek 9.8) jsou subjekty testovány na protilátky proti HIV za použití jediného enzymového imunoanalýzového systému určeného k detekci protilátek proti oběma typům viru - HIV-1 a HIV-2.

V navrhovaných testovacích systémech produkují firmy produkující virové lyzáty, rekombinantní proteiny, syntetické peptidy jako antigenní bázi. Každý z těchto nosičů antigenních determinantů HIV má své vlastní zásluhy a nedostatky. Proto při výběru testovacích systémů s přibližně stejnými náklady byste měli preferovat sady s nejvyšší citlivostí (nejlépe 100%). Mezi testovací systémy se stejnou cenou a citlivostí je vhodné zaměřit se na ty, které mají maximální specifičnost.

Na základě lyzátu viru byly vytvořeny první testovací systémy pro laboratorní diagnostiku infekce HIV. V osmdesátých letech byly tyto testovací systémy charakterizovány citlivostí menší než 100% a nízkou specificitou, která se projevila velkým počtem falešně pozitivních výsledků (až 60%).

Když se virion vytvoří v lymfocytární kultuře, její membrána je vytvořena z vnější membrány a proto obsahuje antigeny hlavního histokompatibilního komplexu tříd I a II. Tato okolnost způsobuje falešné pozitivní reakce, pokud jsou v krvi pacientů přítomny protilátky proti histokompatibilitě allo-antigeny.

Později pro virus bylo navrženo použít kultury makrofágů, ve kterém jsou virové částice tvořené hlavně intracelulárně není očkováním z vnější buněčné membrány a membrány endoplazmatického retikula. Tato technologie snížila počet falešně pozitivních výsledků.

Jeden z nejlepších z nejdůležitějších vlastností - citlivost a specifičnost - testovací systémy imunitně rozpoznán, které se používají ve složení čištěného virového lyzátu kombinaci se syntetickými peptidy, které představují části antigenznachimye většina virových proteinů, nebo rekombinantní proteiny.

Citlivost zkušebního systému závisí také na charakteristikách ostatních součástí sestav. Testovací systémy používající konjugáty, které rozpoznávají protilátky nejen IgG třídy, ale také IgM a IgA, umožňují detekci dřívější fáze sérokonverze. Aplikace testovacích systémů, s nimiž lze současně stanovit jak antivirové protilátky, tak antigeny p24, je slibná, což ještě dřívější laboratorní diagnostiku HIV infekce.

Primární pozitivní výsledek by měl být znovu zkontrolován přezkoumáním vzorku ve stejném testovacím systému, ale s výhodou další série a další laboratorní asistent. Pokud se během druhé studie dosáhne negativního výsledku, studie se provede třikrát.

Po potvrzení pozitivního výsledku je žádoucí znovu vzít krev a vyšetřit ji na primární protilátky proti HIV. Znovuzískání krve může zabránit chybě z důvodu nepřesnosti označování trubek a vyplnění formuláře pro doporučení.

Séropozitivní ve fázi screeningu je krevní sérum zasláno do referenčních studií provedených pomocí dvou nebo tří vysoce specifických testovacích systémů ELISA. V případě dvou pozitivních výsledků se provádí odborná studie imunoblotovou metodou.

Použití v referenčních diagnostických enzymoimunoanalýzou systémy, které mohou být použity k diferenciaci specifických protilátek proti HIV-1 a HIV-2, umožňuje další práci a umožňuje vyšetřovat pozitivní vzorek v expertní stupně bezprostředně za použití odpovídajícího imunoblot (HIV-1 nebo HIV-2).

Laboratorní odborné stanovisko k infekci HIV se provádí pouze na základě pozitivního výsledku imunoblotování (Western blot). Při provádění odborné diagnostiky je nutné použít nomenklaturu genů a genových produktů HIV, které navrhla skupina expertů WHO v roce 1990 (tabulka 9.5 [zobrazit] ).

Specifičnost pruhy na imunoblotu by mělo být hodnoceno velmi pečlivě a důkladně, s použitím výsledků studií kontrolním sérem (pozitivní i negativní), které jsou drženy v souběžně se studiem experimentálních vzorků a vzorků imunoblotu označené HIV proteinu (dodávané výrobcem do testovacího systému). Interpretace výsledků by měla být provedena podle pokynů připojených ke zkušebnímu systému. Obecně platí, že kritériem pro pozitivity povinné přítomnost protilátek proti dvěma proteinům (prekurzoru, vnější nebo transmembránové) genu kódovaného env, a na možnou přítomnost protilátek o produkty dalších dvou strukturních genů HIV - gag a pol (viz tabulka 9.6. [zobrazit] ).

V případě dosažení pochybného výsledku je nutné použít seznam doporučení pro konečné objasnění výsledků imunoblotování (tabulka 9.7 [zobrazit] ).

Podle doporučení Ruské vědecké metodického centra pro prevenci a AIDS, je považován za pozitivní výsledek na přítomnost protilátek proti alespoň jednoho z proteinů gp41, gp120, gp160 v kombinaci s protilátkami proti jiným HIV-1 specifických proteinů nebo bez ní [10]. Tato doporučení jsou založena na zkušenostech s sera od dětí z nozokomiálních ložisek, které často určovaly protilátky proti pouze jednomu z proteinů obalu viru.

Převážná část primární zkoumaného séropozitivních pacientů EIA týká fáze persistiruyushey generalizovaná lymfadenopatie (PGL), nebo asymptomatické fáze. Z tohoto důvodu, v imunoblotu (nitrocelulózovou pásu, na kterém jsou imobilizované proteiny HIV), je určena zpravidla následující kombinace protilátek proti HIV-1: protilátky na obalový protein gp160, gp120 a gp41, kódovaného genem env, ve spojení s protilátkami proti proteinům p24 (protein nukleokapsid kódovaný genem gag) a p31 / 34 (endonukleáza kódovaná pol genem).

Pozitivní reakce pouze s proteiny gag a / nebo rol mohou nastat v případě časné fáze sérokonverze a také naznačují infekci způsobenou HIV-2 nebo nešpecifickou reakci.

V případě získání pochybného výsledku je možné použít různé metodické techniky k objasnění skutečnosti infekce HIV.

V závislosti na technických možnostech (dostupnost diagnostických souprav a reagencií, vybavení se speciálním vybavením a školení personálu) odborná laboratoř provádí další diagnostické studie (obr. 9.10).

V řadě případů je vhodné používat molekulární genetické metody k určení genetických sekvencí HIV v séru, v krevních lymfocytech nebo lymfatických uzlinách. Specifičnost DNA sekvencí získaných v důsledku PCR může být kontrolována hybridizací nukleových kyselin se specifickými DNA sondami.

Metody radioimunoprecipitací (RIP) a nepřímá imunofluorescence (IPF), může být také použit pro konečné ověření séra s pochybným vede imunoblotem [14].

Detekce HIV RNA v plazmě kvalitativní nebo kvantitativní metodou není pro diagnózu infekce HIV významná. Takový výsledek by měl být potvrzen standardními metodami, jako je imunoblotování, 2-4 měsíce po počáteční pochybné nebo záporné odpovědi.

Izolace HIV v buněčné kultuře je konečnou pravdou. Metoda je však složitá, drahá a je prováděna pouze ve speciálně vybavených výzkumných laboratořích.

Obsah CD4 + - buněk v krvi je nespecifický ukazatel, ale v případě sporu (IFA „+“ imunoblot „-“, přítomnost klinických příznaků HIV / AIDS), může být použit jako vodítko pro podávání odborné rozhodnutí. Pokud je v laboratoři možné provést pouze imunoblotování, postupujte podle doporučení uvedených v tabulce. 9.7 a na obr. 9.9.

Osoby s odborným studie séra byly získány pochybné (neurčité) výsledků, s výjimkou pouze detekci protilátek proti P17 (HIV-1), nebo p16 (HIV-2), by mělo být provedeno opětovné testování po dobu 6 měsíců (po 3 měsících). V případě skutečného infekce HIV po 3-6 měsících pozorovat spektrum protilátek „pozitivní“ trend - další vzdělávání protilátek na jiné proteiny viru. Zavádějící reakce je charakterizována uchování na dlouhou dobu nejistý imunoblotem vzoru podezřelý či vymizení pásů. Pokud po této době zpětného imunoblotem zůstane negativní nebo pochybné, pak absence rizikových faktorů, klinické příznaky, a jiných stavů spojených s HIV infekcí, osoba může být považována za séronegativní na protilátky proti HIV-1 a HIV-2.

Falešně pozitivní výsledky v důsledku obsahu protilátek proti alloantigenům histokompatibility v obalu HIV v krvi pacientů se projevují imunoblot ve formě pásem na úrovni gp41 a gp31. Příčiny dalších nešpecifických reakcí (například na p24, které se často objevují u jedinců s autoimunitními procesy) dosud nebyly objasněny.

Zlepšení technologie výroby imunoenzymatických testovacích systémů umožnilo dosáhnout vysoké citlivosti - až 99,99%, zatímco citlivost metody imunoblotování je 97%. Proto negativní výsledek imunoblotování s pozitivními výsledky v testu ELISA může naznačovat počáteční období sérokonverze, charakterizované nízkou hladinou specifických protilátek. Proto je nutné opakovat test po 1,5-2 měsících, tj. Délce doby potřebné k dokončení sérokonverze, dosažení koncentrace specifických protilátek v krvi dostatečných pro detekci imunoblotovou metodou.

Pozitivní výsledek (y) studie na odkaz, nebo jen screening fáze laboratorní diagnostiky infekce HIV, tj, pozitivní výsledek v každém testovacím systému ELISA, výsledek není potvrzeno expertní metody, je interpretován jako přítomnost v krvi subjektu křížové reakce protilátek. Podle křížově reagující protilátky zahrnují nespecifických vazebných míst na HIV proteiny nebo peptidy, které mají být použity jako antigen v základech zkušebního systému, ve kterém pozitivní výsledek.

Při neexistenci imunodeficience a klinických příznaků infekce HIV se tyto osoby považují za seronegativní pro protilátky proti HIV a měly by být vyškrtnuty z registru.

Konečná diagnóza infekce HIV je stanovena pouze na základě všech klinických, epidemiologických a laboratorních údajů. Pro informování pacienta o diagnóze infekce HIV má právo pouze ošetřující lékař.

Hlavní metodou potvrzení (odborné) laboratorní diagnostiky infekce HIV je imunoblotování. Vzhledem k nižší citlivosti ve srovnání s metodou ELISA však řada vědců navrhla použití kombinace několika testovacích systémů, aby konečně zjistila přítomnost specifických protilátek proti HIV. Například G. van der Groen et al. [30] navrhl alternativní imunoblotní metodu pro testování pozitivních výsledků screeningu v laboratorní diagnostice infekce HIV. Zahrnuje studium materiálu paralelně ve třech testovacích systémech, které jsou založeny na různých metodách detekce specifických protilátek proti HIV (několik variant ELISA, aglutinační reakce) s použitím antigenů různé povahy. Autoři se podařilo vybrat takové kombinace testovacích systémů, jejichž použití poskytuje 100% citlivost a specificitu ve srovnání s výsledky získanými při imunoblotování.

Láce metodě expert diagnózy je výhodou, ale nedostatek informací, na které specifické proteiny jsou virové protilátky v krvi pacienta, neumožňuje posoudit specifičnost reakce v každém případě, a sledovat změny ve spektru protilátek v raných fázích sérokonverze.

Laboratorní diagnostika infekce HIV u dětí narozených matkám infikovaným HIV má své vlastní zvláštnosti [24]. Od okamžiku narození po dlouhou dobu (až 15 měsíců) v krvi těchto dětí mohou mateřské protilátky proti HIV cirkulovat. Placentární bariérou proniknout pouze imunoglobuliny třídy IgG, tak odhaluje dítěte nmmupoglobulinov HPV-specifických IgM a IgA třídy umožňuje potvrzení infekce, ale negativní výsledek nemůže poukazují na nepřítomnost HIV.

U dětí mladších jednoho měsíce nedochází k replikaci HPV a jedinou metodou ověření je PCR. Stanovení antigenu p24 u dětí starších jednoho měsíce je také potvrzující metodou.

Nedostatek protilátek proti HIV u novorozenců neznamená, že virus nepronikl do placentární bariéry. V každém případě jsou děti HIV infikovaných matek předmětem laboratorního diagnostického vyšetření a pozorování po dobu 36 měsíců od narození [10].

Výsledky laboratorních testů na markery infekce HIV vyžadují pečlivou interpretaci a měly by být zvažovány pouze ve spojení s epidemiologickými a klinickými údaji. Na druhou stranu je třeba poznamenat, že navzdory vysoké citlivosti moderních metod negativní výsledky výzkumu nemohou zcela vyloučit přítomnost HIV infekce. Proto může být negativní výsledek studie, například imunoblotováním, formulován pouze jako nepřítomnost specifických protilátek proti HIV-1 a HIV-2.

Diagnostika infekce HIV u séronegativních pacientů

Kvalita testovacích systémů používaných při laboratorní diagnostice infekce HIV se každým rokem zlepšuje a jejich citlivost se zvyšuje. Vysoká variabilita HIV však může vést k vzniku nových typů, proti kterým nemusí existující testovací systémy rozpoznávat protilátky. Kromě toho jsou známy případy atypické humorální odpovědi imunitního systému hostitelského organismu na virus. Takže L.Montagnier v roce 1996 označena dvou pacientů s AIDS, kteří během posledních několika let nebyly zjištěny v krvi specifických protilátek je diagnostika je založena na klinických údajů a potvrzeno laboratorním izolaci pouze HPV-1 v kultivovaných buňkách. V takových případech je nutné použít doporučení WHO, podle nichž je klinická diagnostika infekce HIV u dospělých a dětí možná za přítomnosti jedné z 12 nemocí s indikátorem AIDS:

1. Kandidóza jícnu, průdušnice, průdušek, plic;
2. extrapulmonární kryptokokóza;
3. kryptosporidóza s průjem více než jeden měsíc;
4. poškození cytomegalovirů jakéhokoli orgánu (s výjimkou jater, sleziny a lymfatických uzlin u pacienta staršího než 1 měsíc) a
5. infekce způsobená virem herpes simplex přetrvávajícím více než 1 měsíc u pacientů starších jednoho měsíce;
6. lymfom mozku u pacienta mladšího 60 let;
7. lymfocytární intersticiální pneumonie u dítěte mladšího 13 let;
8. Dissiminovaná infekce způsobená bakteriemi skupiny Micobacterium avium intracellulare nebo M. Kansassii;
9. pneumocystis pneumonia;
10. progresivní multifokální leuko-encefalopatie;
11. toxoplazmózy centrálního nervového systému u pacientů starších jednoho měsíce.

Přítomnost jedné z těchto onemocnění umožňuje diagnostikovat infekci HIV v nepřítomnosti možnosti provést laboratorní krevní test na přítomnost protilátek proti HIV nebo dokonce i při séronegativním výsledku.

1. Federální zákon Ruské federace o prevenci šíření nemoci způsobené virem lidské imunodeficience v Ruské federaci ze dne 30. března 1995.
2. Zmushko E.I., Belozerov E. S. Infekce HIV / Příručka pro lékaře. - Petrohrad: Peter, 2000. - 320 s.
3. Isakov VA Aspel YV, Bogoyavlenskii GV et al. Předchozí použití tsikloferona při léčbě HIV a AIDS infektsni / ruční vrachey.- SPB, 1997.- 60 pp.
4. Kozhemyakin LA, Bondarenko IG, Tyaptin AA Syndrom získaného selhání imunity / Přídavek na vrachey.- L:. Znalosti, 1990.- 112 s.
5. Lobzin Yu V., Kazantsev AP Průvodce infekčními nemocemi. - Petrohrad, 1996. - 712 stran.
6. Lysenko A.Ya., Turyanov M.X., Lavdovskaya M.V., Podolsky V.M. HIV infekce a onemocnění spojená s AIDS / Monografie. - M.: "Rarog" LLP, 1996, - 624 p.
7. Novokhatsky LS, Khlyabich GN Teorie a praxe laboratorní diagnostiky syndromu získané imunodeficience (AIDS). - M.: VINITI, 1992, - 221 str.
8. Pokrovsky VI, Pokrovsky VV AIDS: syndrom získané imunodeficience.- M.: Meditsina, 1988.- 43 p.
9. Pokrovsky VI infekce HIV nebo AIDS // terapeut, architekt. - 1989. - T. 61, č. 11. - P. 3-6.
10. Pokrovsky V. V. HIV-infekce: klinice, diagnostika / pod generála. Ed. VV Pokrovskogo.- Moskva: GEOTAR MEDICINE, 2000.- 496 str.
11. Rakhmanova A. G. Infekce HIV (klinice a léčba).- SPb: "SHA", 2000.- 367 p.
12. Doporučení pro použití antiretrovirových léků u dospělých a adolescentů infikovaných virem lidské imunodeficience // Doporučení Consilium Medicum. Leden 2000, - 22 str.
13. Smolskaya T. T., Leninskaya P. P., Shilova E.A. Serologicheskaya diagnostika HIV infekce / Metodická příručka pro lékaře.- SPb, 1992.- 80 p.
14. Smolskal TT Druhá desetiletí života v podmínkách SPPD: Lekce a problémy / Act Speech. - SPb., 1997.- 56 s.
15. Khaitov RM, Ignatieva GA AIDS.- M., 1992.- 352 p.
16. Connor S. Research ukazuje, jak HIV vyčerpává tělo // Brit. Mod. J.- 1995.-svazek 310.-P 6973-7145.
17. Burcham J., Marmor M., Dubin N. et al. CD4 je nejlepším prediktorem vývoje AIDS v kohortě homosexuálních mužů infikovaných HIV-infekcemi (J. AIDS, 1991.-jN "9.- P.365).
18. Furlini G., VIGNOLI M., Re MC, Gibellini D., Ramazzotti E., Zauli G.. La Placa M. lidské imunodeficience typu viru interakce I s membránou z CD4 + buněk indukuje syntézu a nukleární translokaci proteinu šoku 70K tepelného J.Gen. Virol., 1994, vol. 75, str. 1, str. 193-199.
19. Gallo R.C. Mechanismus indukce onemocnění HIV / / J.AIDS.- 1990.- N3.- P. 380-389.
20. Gottlieb M. S., Schroff R., Schanker H. a kol. Pneumocystis carinii pneumonie a slizniční kandidóza v dříve homosexuální mon / nyní Anglie J. Med. - 1981. - sv. 305. - str. 1425-1430.
21. Harper M. E., Marselle L. M., R. C. Gallo, Wong-Staal F. Detekce lymfocytů exprimujících lidský T-lymfotropický virus typu III v limph uzlin a periferní krve z infikovaných jedinců in situ hybridizace // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1986, sv. 83.-N 2.-P. 772-776.
22. Hess G. Klinické a diagnostické aspekty infekce HIV Mannheim: Boehringer Mannheim GmbH, 1992, 37 p.
23. Hu JJ, Dondero T.J., Ryefild M.A., et al. Vznikající genetická rozmanitost HIV / / JAMA.- 1996. - N 1.- P. 210-216.
24. Lambin P., Desjobert H., Debbia M. a kol. Sérový neopterin a beta-2-mikroglobulin u anti-HIV pozitivních donorů krve // ​​Lancet.- 1986.- svazek 8517. - P. 1216.
25. Maldonado I. A., Retru A. Diagnóza dětské nemoci HIV // Poznatková základna AIDS, Fd. Cohen P.T.; Sande M. A. Voiberding. 1994.- P. 8.2.1-8.2.10.
26. McDougal J. S., Kennedy M. S., Sligh J.M. et al. Vazba HTLV-III / LAV až T4 + T buněk komplexem molekuly 110K a T4 molekuly // Science.- 1985.- Vol.23.- S. 382-385.
27. Montagnier L., Gougeon M.L., Olivier R. a kol. Faktory a mechanismy patogeneze AIDS // Věda vyzývající AIDS. Basilej: Karger, 1992. - str. 51-70.
28. Paterlini P., Lallemant-Le C., Lallemant M. a kol. Polimerasová řetězová reakce pro studium matky k přenosu HIV-1 dítětem v Africe // J. Med. Virol. - 1990.- Vol.30, N 10.- P. 53-57.
29. Polis M. A., Masur H. Předpovědět vývoj na AIDS // Amor. J. Med. - 1990.- sv. 89, N 6.- str. 701-705.
30. Roddy M. M., Grieco M. H. Zvýšené hladiny rozpustných IL-2 receptorů v séru HIV infikovaných populací // AIDS Res. Hum. Retrovir. - 1988. - díl 4, č. 2. - str. 115-120.
31. Van dor Groen. G., Van Kerckhoven I. a kol. Zjednodušené a levnější v porovnání s tradičním způsobem potvrzení infekce HIV // Bull. WHO.- 1991.- T. 69, č. 6.- 81-86.

Zdroj: Lékařská laboratorní diagnostika, programy a algoritmy. Ed. prof. Karpischenko AI, Petrohrad, Intermedika, 2001