PCR pro hepatitidu B

Share Tweet Pin it

Diagnostika PCR umožňuje nejen stanovit přítomnost viru hepatitidy B v krvi a jeho etiologii, ale také hodnotit jeho aktivitu. Detekce virové zátěže je zvláště důležitá pro výběr účinné léčby, je-li příliš vysoká, pravděpodobnost zotavení se sníží. Jaká je podstata polymerázové řetězové reakce?

Podstata diagnostiky PCR

DNA virus v krvi pomocí PCR v hepatitidy mohou být identifikovány na konci inkubační doby, tentokrát na pozadí zvýšené hladiny transamináz HBsAg mohou být definovány, pak je HBeAg.

  • S kvalitní definicí můžete přesně stanovit diagnózu, existuje hepatitida nebo ne. Obvykle by měla být DNA viru nepřítomná v krvi.
  • Kvantitativní metoda umožňuje určit intenzitu onemocnění a reprodukci viru.

Analýza má velmi vysokou citlivost a spolehlivost. Jako biologický materiál se odebírá žilní krev. Díky moderním technologiím může PCR detekovat virus v koncentraci 5 × 10 3 -10 4 kopií / ml v krvi. Na základě výsledků analýzy, s vědomím této normy, můžete posoudit virovou zátěž a předložit prognózu léčby.

Důležité! Je to DNA viru, který podporuje rozvoj cirhózy a dalších chronických onemocnění jater.

Detekce DNA pomocí PCR je nutná v následujících případech:

  1. Pochybuje při zadání závěrečné analýzy po provedení testů.
  2. Definice akutního stavu onemocnění.
  3. Detekce latentních forem hepatitidy.
  4. Vyhodnocení účinnosti po antivirové terapii.

Jak dešifrovat výsledky získané po diagnostice PCR?

PCR kvantitativní

Kvantitativním hodnocením můžete nejen zjistit přítomnost viru, ale také zjistit virovou zátěž v případě, že PCR vykazuje pozitivní výsledek.

Pro zjištění těchto informací je nezbytná kvantitativní metoda:

  1. Intenzita onemocnění.
  2. Účinnost léčby.
  3. Vývoj rezistence na antivirotika.

Kvantifikace je velmi důležitá při diagnostice chronické hepatitidy. V tomto případě nebudou všechny indikátory v mezích normy. Zvýší se hladina transaminázy, index aktivity viru je více než 4 a koncentrace DNA viru je více než 105 kopií DNA / ml. Je-li koncentrace viru nižší a hladina transaminázy je normální, můžeme mluvit o pasivním vozidle.

Před stanovením antivirové léčby je předpoklad diagnostiky PCR, konkrétně kvantitativní vyšetření, nezbytným předpokladem pro stanovení virové zátěže.

Analyzují každých 3 měsíce a pokud se vírusová zátěž zvýšila 10krát, můžeme mluvit o odolnosti viru vůči léčbě.

  • Kvantitativní analýza poskytuje velmi důležité informace, protože můžete určit, kolik DNA obsahuje patogen. Čím je číslo větší, tím větší je virální zátěž a tím je těžší stav pacienta.
  • Při snížení virové zátěže po léčbě lze hodnotit její účinnost.
  • V některých případech je PCR pro hepatitidu indikací pro další vyšetření, jako je jaterní biopsie. Se zvýšenou hladinou ALT se provádí PCR. analýza transkripce je následující: v případě, že virová zátěž větší než 10 5 kopií DNA / ml a hladin ALT nad normální, ale ne více než 2 krát více než šesti měsíců, pacient potřebuje biopsii. Při závažném zánětu nebo fibróze je indikována antivirová léčba. Pokud hladina ALT překročí normu více než 2 krát při vysokém virovém zatížení, okamžitě předepíše léčbu bez další diagnózy.

Pouze dobří odborníci mohou správně dešifrovat výsledky kvantitativní PCR.

PCR kvalitativní

Kvalitativní analýza umožňuje určit přítomnost viru hepatitidy v krvi. Obvykle by měl být nepřítomen. Díky této metodě můžete přesně stanovit diagnózu.

Kvalitativní PCR analýza poskytuje 100% přesný výsledek.

Žádná jiná metoda neposkytuje takové spolehlivé údaje. Ve více než polovině případů po průchodu diagnózy se detekuje DNA viru v nepřítomnosti antigenu. Je velmi důležité stanovit diagnózu v počáteční fázi onemocnění.

Dokázalo se, že pokud se DNA viru hepatitidy B aktivně rozmnoží v lidském těle do dvou měsíců, stává se choroba chronická. Pokud začneme bojovat s virem během prvních týdnů po infekci, šance na úplné uzdravení jsou velmi vysoké.

Jak je interpretace výsledků průzkumu dosažena pomocí kvalitativní metody?

Analýza analýzy je velmi jednoduchá:

  • Obvykle by výsledek měl být negativní, to znamená, že DNA viru není detekována.
  • Pozitivní výsledek naznačuje přítomnost hepatitidy.

Analýza pomáhá identifikovat virus, určit jeho genotyp a zahájit včasnou léčbu. Velmi často se v přítomnosti DNA, spolu s kvalitativním hodnocením, provádí i kvantitativní.

Jak se připravit na průzkum?

Při analýze hepatitidy pomocí diagnostiky PCR se z žíly odebere krev. Procházet nebo provádět kontrolu je lepší od rána, protože krev musí být vždy předávána na prázdný žaludek (po posledním příjmu jídla by nemělo trvat méně než 8 hodin).

Aby analýza byla co nejspolehlivější, měl by pacient vědět některé faktory, které mohou ovlivnit konečný výsledek:

  • Než donášíte krev z žíly, musíte odpočívat 20 minut.
  • Kromě toho, že analýza je uvedena na prázdný žaludek, takže po dobu 12 hodin nemůžete pít, kouřit, sportovat a jíst tučné potraviny.
  • Některé léky, které musí pacient užívat, mohou ovlivnit konečný výsledek. Laborantní asistent by měl vědět o případu léčby drogami.
  • Pokud je třeba podat krev dítěti mladší 5 let, musí se před každou diagnózou podávat každých 10 minut. přes sklenici vařené vody.

Je velmi důležité podstoupit PCR na klinice, která se osvědčila. Koneckonců, i přes skutečnost, že PCR určuje přítomnost viru s přesností 100%, může být tato hodnota snížena na 95%, pokud vezmete v úvahu lidský faktor.

Nekvalifikovaní laboratorní technici nebo špatná pověst kliniky mohou způsobit falešné výsledky.

Standard kvantitativní analýzy hepatitidy v roce 2009

DNA DNA viru hepatitidy B, kvantitativní

Co je DNA viru hepatitidy B, kvantifikace?

HBV je komplexní virus obsahující DNA a patří do rodiny Hepadnaviridae rodu Orthohepadnavirus.

Hepatitida B - anthroponotic infekce, s výhodou parenterální infekce mechanismus, který může mít formu virového nosiče, akutní a chronické onemocnění jater, a je charakterizována možného vzniku akutní selhání jater, chronická hepatitida, cirhóza a rakovina primární jater (hepatocelulární karcinom).

Infekce s lidským tělem dojde přímým pronikání HBV v krvi (s jakoukoli invazivní zásah a transfuze krve a jejích produktů), nebo přes sliznice a kůže při porodu, při sexuálních a blízké domácnosti kontaktů. Jakmile do jater, HBV pronikne do hepatocytů, kde se začne intenzivně množit.

Vývoj infekčního procesu se může objevit dvěma způsoby: replikativní a integrační. Replikační infekce forma vede k akutní nebo chronické hepatitidy a cirhóza jater, přičemž integrační - pro zdravý vývoj virové infekce, chronické neaktivní hepatitida, jaterní cirhózy a primárního hepatocelulárního karcinomu.

Sérologická diagnóza a prognóza infekce HBV je založena na detekci antigenů viru a protilátek proti němu. Avšak, jak se ukázalo, v populaci viru hepatitidy B se nachází dostatečně mutantní kmeny (HBeAg-negativní), které nejsou zachyceny běžnými sérologickými testy. Proto je velmi důležitá metoda PCR pro diagnózu infekce HBV.

Kvantifikace DNA viru hepatitidy B pomocí PCR.

Analytické ukazatele: detekce HBV DNA (virem hepatitidy typu B), podle metody polymerázové řetězové reakce (PCR) a virové nálože v plazmě.

Detekovatelný fragment je unikátní DNA sekvence genu strukturálního proteinu viru hepatitidy B. Specificita je 98%. Citlivost stanovení je od 2 x 105 IU / ml 5 x 103 kopií / ml virových částic v séru.

Kvantitativní charakterizace obsahu DNA viru hepatitidy B je důležité pro posouzení účinnosti antivirové terapie a má prognostickou hodnotu pro definování chronické hepatitidy B: původně nízkou úroveň virémie (DNA HBV nejméně 2x105 kopií / ml (2x105 IU / ml)) procento chronické akutní hepatitida B v blízkosti nula. Při koncentraci 2x105 HBV DNA kopií / ml (2x105 IU / ml) na 2x10 kopií / ml (8h105 IU / ml) proces chronization je pozorována u 25-30% pacientů, a při vysokých hladinách v pacientovi vi remii (2x10 více kopií / ml (8x105 IU / ml) akutní hepatitida B nejčastěji dochází k chronickému onemocnění. Snížení koncentrace HBV DNA v třetí den léčby u 85% je velmi jednoduché a přesné parametrem pro předvídání účinnosti léčby.

O čem se bojíš? Chcete se dozvědět podrobnější informace o DNA viru hepatitidy B, kvantifikaci nebo jiných analýzách? Nebo potřebujete navštívit lékaře? Můžete dohodnout si schůzku s lékařem - Klinika Eurolaboratoři vždy k vašim službám! Nejlepší lékaři vás prozkoumají, poradí s vámi, poskytnou potřebnou pomoc a provedou diagnózu. Můžete také zavolejte lékaře doma. Klinika Eurolaboratoři je vám otevřena nepřetržitě.

Jak kontaktovat kliniku:
Telefonní číslo naší kliniky v Kyjevě: (+38 044) 206-20-00 (vícekanálové). Sekretář kliniky vás vyzvedne vhodný den a hodinu návštěvy lékaře. Zde jsou uvedeny naše souřadnice a směry. Podívejte se podrobněji na všechny služby kliniky na její osobní stránce.

Pokud jste v minulosti dokončili nějaký výzkum, ujistěte se, že jste získali výsledky v kanceláři lékaře. Pokud nebudou provedeny studie, uděláme vše, co je třeba v naší klinice nebo u našich kolegů na jiných klinikách.

Je nutné pečlivě přistupovat k stavu vašeho zdraví obecně. Existuje mnoho onemocnění, které se v našem těle nejprve nezjistily, ale nakonec se ukázalo, že se bohužel již léčí příliš pozdě. Proto je to nutné několikrát ročně podstoupí lékařskou prohlídku. nejen aby se zabránilo strašlivému onemocnění, ale také aby se udržovala zdravá mysl v těle a těle jako celku.

Pokud se chcete zeptat lékaře, použijte sekci on-line konzultace. Možná najdete odpovědi na vaše dotazy a přečtěte si tipy pro péči o sebe. Pokud máte zájem o recenze týkající se klinik a lékařů - zkuste najít informace, které potřebujete na fóru. Také se zaregistrujte na lékařském portálu Eurolaboratoři. musí být neustále aktualizovány s nejnovějšími zprávami a aktualizace informací o místě HBV DNA B, kvantifikace a dalších analýz na místě, které budou automaticky zaslány vám v e-mailu.

Máte-li zájem o jakékoli další testy, diagnostické kliniky a služeb obecně, nebo pokud máte nějaké další dotazy či připomínky - kontaktujte nás. určitě se vám pokusíme pomoci.

Znalostní báze: HBV, DNA kvantitativně [PCR v reálném čase]

HBV, DNA kvantitativně [PCR v reálném čase]

Studie k identifikaci původce hepatitidy B (HBV), v němž metodou real-time polymerázové řetězové reakce (RT-PCR) je určena přítomností genetického materiálu (DNA) viru a jeho objemu (virová zátěž) ve vzorku krve.

HBV DNA může být detekována v koncentraci pod dolní hranicí lineárního rozsahu koncentrací. Rozsah lineárních koncentrací je rozsah, v němž lze přesně vypočítat počet kopií patogenu. Pro tuto analýzu je lineární rozsah koncentrací HBV DNA stanovený detekčním zesilovačem 7,5 x 10 2 - 1,0 × 10 8 kopií / ml vzorku.

Virus hepatitidy B (HBV), kvantitativní stanovení DNA.

DNA virové hepatitidy B, kvantitativní, PCR v reálném čase, krve; HBV virová zátěž; DNA virové hepatitidy B Quant.

Polymerázová řetězová reakce v reálném čase.

Kopírovat / ml (kopírovat na mililitr).

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Nekuřte po dobu 30 minut před dávkováním krve.

Obecné informace o studii

Virová hepatitida B (HBV) je infekční onemocnění jater způsobené virem hepatitidy B (HBV) obsahujícím DNA. Mezi všechny příčiny vývoje akutní hepatitidy a chronické virové infekce je virus hepatitidy B považován za jeden z nejběžnějších na světě. Počet skutečně infikovaných osob není znám, protože mnoho lidí má infekci bez zvláštních příznaků a nepožaduje lékařskou péči. Vírus je často detekován během preventivních laboratorních testů. Odhaduje se, že asi 350 milionů lidí je postižen virem hepatitidy B a 620 000 zemře každý rok z jeho účinků. V Rusku překračuje počet dopravců s HBV 5 milionů lidí.

Zdrojem infekce je pacient s HBV nebo asymptomatickým virem. HBV se přenáší krví a dalšími tělními tekutinami. Můžete nakazit přes nechráněném pohlavním styku, používání kontaminovaných jehel, krevní transfuze a transplantace orgánů od dárců, dítě může nakazit matku během nebo po porodu (přes trhliny v bradavek). Osoby ohrožené patří: lékaři, kteří mohou přijít do styku s krví pacienta, pacienti na hemodialýze, injekční uživatelé drog, lidí, kteří jsou promiskuitní děti narozené matkám s HBV.

Inkubační doba onemocnění je od 4 týdnů do 6 měsíců. Virová hepatitida B se může objevit jako mírné, která trvá několik týdnů, a ve formě dlouhodobé chronické infekce. Hlavními symptomy hepatitidy: žloutnutí kůže, horečka, nevolnost, únava, v laboratorních testech - jaterní dysfunkce a specifické antigeny jsou HBV Akutní onemocnění může rychle vést k smrti, projít do chronické infekce nebo zakončené úplné uzdravení. Předpokládá se, že po přeneseném HBV je vytvořena odolná imunita. Chronická virový hepatitida B je spojena s vývojem cirhózy a rakoviny jater.

Existuje několik specifických testů pro detekci stávající nebo přenesené virové hepatitidy B. Pro stanovení přítomnosti infekce a pro objasnění období onemocnění použijte definici antigenů viru, protilátek proti nim a DNA viru.

Polymerázová řetězová reakce je charakterizována vysokou citlivostí a specificitou. Pomocí PCR může být DNA viru stanovena kvalitativně nebo kvantitativně. Díky kvalitativní metodě se potvrzuje přítomnost viru hepatitidy B v těle a jeho aktivní reprodukce. Kvantitativní stanovení virové zátěže pro vyhodnocení intenzity onemocnění, účinnost terapie nebo vývoje antivirové rezistence.

Existuje vztah mezi koncentrací viru v krvi a výsledkem akutní virové hepatitidy B. Při nízkém stupni viremie je pravděpodobnost přechodu infekce do chronické formy téměř nulová a infikovaná osoba není nebezpečná pro ostatní. Při vysokém virovém zatížení (5 kopií / ml) dochází často k chronické onemocnění a pacient je potenciálním zdrojem infekce. Byl prokázán vztah mezi množstvím DNA viru v krevním séru, přítomností HBeAg, zvýšením ALT a rozvojem jaterní cirhózy a hepatocelulárního karcinomu (rakovina jater).

Účinnost antivirové terapie se odhaduje snížením množství DNA viru v krvi. Po 3 až 6 měsících po zahájení léčby by se virové zátěž s odpovídajícími terapeutickými odezvami měla snížit o 1-2 řády. Absence snížení velikosti viru nebo jeho zvýšení na pozadí probíhající léčby vyžaduje revizi a modifikaci terapie.

Kvantitativní stanovení HBV DNA ve spojení s klinickým obrazem nemoci a biochemické ukazatele, ukazatele infekce, stejně jako v důsledku jaterní biopsie umožňuje prognózu onemocnění a pro vyhodnocení nutnosti antivirové terapii.

Na co se používá výzkum?

  • Předpovědět průběh virové hepatitidy B.
  • Potvrzení chronické formy virové hepatitidy B.
  • Identifikovat nosiče virové hepatitidy B a sledovat aktivitu násobení viru.
  • Identifikovat skryté a mutantní kmeny viru hepatitidy B.
  • Posoudit účinnost antivirové terapie pro hepatitidu B a rozhodnout o dalších léčebných takticích.

Kdy je přiřazena studie?

  • S kvalitní detekcí DNA viru hepatitidy B.
  • U akutní a chronické virové hepatitidy B.
  • Se smíšenou hepatitidou.
  • Před a během antivirové léčby.

Co znamenají výsledky?

  • Nezjištěno - DNA viru hepatitidy B nebyla detekována nebo hodnota je pod hranicí citlivosti metody (200 kopií / ml = 90 IU / ml).
  • 10 ^ 5 kopií / ml (2 x 10 ^ 4 IU / ml) - vysoké virové zátěže, aktivní infekční proces (je nutná antivirová terapie).
  • 1,0 * 10 ^ 8 kopií / ml (4,8 x 10 7 IU / ml) - DNA viru hepatitidy B je detekována v koncentracích nad lineárním rozsahem koncentrací.

Lineární rozsah koncentrací HBV DNA v určené detekční termocykleru, 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kopií / ml (3,6 x 10 2 - 4,8 x 10 7 IU / ml).

Co může ovlivnit výsledek?

  • Kvantifikace DNA viru hepatitidy B je povinná před podáním antivirové léčby. Během léčby by měla být analýza opakována po 3 až 6 měsících.
  • Virová hepatitida B se často kombinuje s virovou hepatitidou D.

Kdo jmenuje studii?

  1. Vozianova Zh.I. Infekční a parazitní onemocnění: ve 3 tunách - K. Zdraví, 2000 - T.1. 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling a další. Použití DNA viru hepatitidy B Kvantifikace protilátek proti hepatitidě B Hepatitida B protilátek proti hepatitidě B Hepatitida B. J Clin Microbiol. 2003 říjen; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrisonovy principy vnitřního lékařství. 16. vyd. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Řízení hepatitidy B. Konference o konsensuální rozvoji NIH. Program a Abstrakty. 20. - 22. října 2008.

Jaké jsou normy v kvantitativní analýze hepatitidy C?

Virus hepatitidy C je schopen reprodukovat v krvinkách a způsobit lymfoproliferativní onemocnění. Díky mnoha mutacím dochází k oslabení obranyschopnosti těla, objevují se genotypy a podtypy viru. Správná a včasná identifikace určitého typu závisí na účinnosti antivirové terapie. Nebezpečí nákazy je, že onemocnění je asymptomatická. Celkem 15% ze 100 může mít nevolnost a zvracení, ztrátu hmotnosti a horečku.

Definice viru hepatitidy C

Standardní normou hepatitidy C jsou velikosti od 40 do 60 nm, s většinou lipidů, poškození jater v důsledku akutního nebo chronického průběhu onemocnění. Hepatitida C, jmenovitě RNA z rodiny Togaviridae, je extrémně vytrvalá, přenášená transfuzí krve nebo použitím nesterilních předmětů, nesprávnou hygienou koupelnového příslušenství, Kvantitativní analýza umožňuje vyšetřit krev a identifikovat genetickou strukturu infikovaného viru.

U hepatitidy C a jejich genotypů, které mají být stanoveny, se provádí kvantitativní analýza. V závislosti na analyzátoru lze určit tři úrovně výskytu viru RNA.

Podtypy mohou produkovat různé modifikace, takže specifičnost a citlivost analyzátoru by měla být sto procent. Kromě zjišťování onemocnění u pacienta je nutné určit stupeň jeho závažnosti. Některé laboratoře nemají všechna data o definicích RNA viru, existuje možnost falešně pozitivní odpovědi.

Studie hepatitidy C bude přesnější při studiu těchto ukazatelů:

Při upozornění na výsledky těchto indikátorů a na celkovém stavu těla je zobrazen výsledek, který ukazuje stupeň infekce, formu a počet buněk hepatitidy C v krvi. To přispívá k hojení a účinnosti antivirové terapie.

Typy analýz pro hepatitidu C

Polydizovaná řetězová reakce (PCR) poskytuje představu o množství DNA částic v analýze pacienta a správně identifikuje příčinu infekce.

Infekční agenti se mohou projevit. Takové infekční onemocnění jater jako hepatitida C v naší době může být léčeno, když je zjištěno včas. Je-li podezření na virus, je provedena PCR analýza.

Zatímco příznaky viru mohou být maskované po dlouhou dobu, osoba nemusí cítit nástup průběhu onemocnění. Ale při pečlivém vyšetření v 60-70% případů se detekuje hepatitida C, primární analýza, ve které je ELISA, pak diagnostika PCR. Analýza se provádí v určitých obdobích, aby se zjistila fáze onemocnění a aby se předepisovala vhodná léčba. Bez toho, bez použití všech těchto postupů, můžete roubovat z hepatitidy.

Analýza, včetně PCR diagnostiky, poskytuje obraz o nemoci, jak aktivní je virus v různých obdobích vývoje.

Nejprve přichází kvalitativní analýza, která pouze potvrzuje hypotézu o infekci a pak kvantitativní určení zátěže jater. Ideální volbou je negativní výsledek pro hepatitidu C v genetickém materiálu pacienta.

Kvalitativní a kvantitativní analýza

Existují kvalitativní a kvantitativní analýzy. Podstatou prvního je to, že určuje přítomnost infekce v krvi. A to znamená, že virus postihuje zdravé jaterní buňky. Pokud má pacient protilátky proti hepatitidě C, okamžitě se provede kvalitativní test. Norma, kterou by výsledek měl způsobit, je "nezjištěn v krvi". Při určování koncentrace viru existuje potřeba znalosti o citlivosti diagnostického systému, protože analýza může být provedena osobami podstupujícími antivirovou terapii. Citlivost analyzátoru by neměla být nižší než 50 IU / ml.

Když je zjištěn virus, provede se kvantitativní analýza, jinými slovy virové zátěže, které určuje koncentraci viru v krvi a závažnost onemocnění.

Vírová RNA, která je v určitém množství krve, je definována jako norma rychlostí 1 ml na 1 cm krychlovou. Po kvantifikaci virové zátěže lze posoudit stupeň infekce neinfikovaného prostředí. Jakmile koncentrace hepatitidy C stoupne v krvi, musí být životní prostředí izolováno.

V prvních fázích je důležité zjistit stupeň koncentrace hepatitidy, aby bylo možné určit rychlost rehabilitace. Pokud je míra hepatitidy C překročena o více než 800 tisíc IU / ml, je považována za příliš vysokou, s nárůstem na jeden milion - kritická. Je-li kvantitativní rozmezí menší než 400 tisíc IU / ml, má se za to, že kontaminace ostatních se objeví s menší pravděpodobností. Tento údaj jasně ukazuje, že hepatitida C v těle je přítomna ve velmi malých dávkách. Analýza nebyla schopna stanovit kvantitativní hodnotu RNA virových částic, takže je několikrát převedena na přesnost diagnózy.

Výsledky kvantitativní analýzy

Úkolem stanovení množství virové zátěže v pacientově krvi je určit míru infekce u ostatních.

Analýza hepatitidy C umožňuje zhodnotit účinnost antivirové terapie, úroveň infekčnosti a počet infikovaných tkání.

Je důležité nepovolit progresi onemocnění, včas přijmout preventivní opatření, předepsat správnou léčbu na základě diagnostiky PCR. Pokud podle výsledků je úroveň virové zátěže nižší než 400 tisíc IU / ml, pak může být koncentrace minimální, což znamená, že je možné úplné uzdravení. Normou pro pozitivní výsledek je absence infekce.

  1. Pozitivní odpověď znamená, že v biologickém materiálu dochází k infekci. Analýza umožňuje určit přesný počet infikovaných buněk.
  2. Negativní odpověď naznačuje nepřítomnost infekce, která byla v těle pečlivě prohledávána.

Kvantitativní metoda pro hepatitidu C je přesná a informativní, prováděná na zařízeních s vysokou citlivostí. Dešifrování výsledků analýzy umožňuje zjistit, zda existuje infekce a její specifičnost, abyste viděli nejmenší počet infikovaných buněk na analyzátorech s vysokou citlivostí.

Falešně pozitivní nebo opačné výsledky analýzy poskytují zřídka, častěji se to děje ve studiích imunotestu.

Vše o kvantitativní analýze hepatitidy B

Hepatitida B je virovou infekcí, která postihuje játra. Dnes je asi 300 milionů lidí na celém světě nositeli hepatitidy B.

V některých případech virus přechází do cirhózy jater nebo hepatocelulárního karcinomu (první stupeň rakoviny). Nové antivirové strategie pro studium onemocnění mají dva cíle:

  • určit, jak je tělo citlivé na virovou zátěž;
  • zda je virus rezistentní vůči lékům a jiným lékařským zákrokům.

Vlastnosti výzkumu hepatitidy

Sérologické studie se zaměřují na detekci antigenů a protilátek v séru, ale tato metoda je nespolehlivá. Vědci proto vyvinuli metodu polymerázové řetězové reakce (PCR). Umožňuje nejen kvalitativně stanovit přítomnost viru (jíst nebo ne), ale také kvantitativně (v jakém množství jsou protilátky v krevním séru).

Před sběrem krve by lékař měl zjistit:

  • zda pacient intravenózně užíval omamné látky;
  • zda osoba byla dárcem nebo příjemcem (k němuž byla nalita krev);
  • zda pacient podstoupil operaci;
  • zda byla poškozena kůže pacienta;
  • zda je člověk přesvědčen o zdraví svého sexuálního partnera;
  • zda existovaly kontakty s infikovaným virem hepatitidy B.

Při akutní hepatitidě může být pozitivní výsledek detekován 1-2 týdny po inkubaci pomocí PCR.

Krevní testy pro detekci virové hepatitidy B (HBV) se provádějí v:

  • Diagnostika akutní hepatitidy v:
    • inkubační doba (1-2 týdny);
    • intenzivní období onemocnění (3-4 týdny);
    • období ranné fáze obnovy.
  • Diagnostika chronické hepatitidy (chronické virové hepatitidy).
  • S kombinovanou hepatitidou.

Také jsou pravidelně analyzovány rizikové osoby, které zahrnují:

  • lidé, kteří potřebují časté krevní transfúze;
  • pacienti, kteří podstupují kontinuální postupy k čištění krve při selhání ledvin;
  • lidé s AIDS nebo infekcí HIV;
  • těhotné ženy;
  • lékaři v kontaktu s krví;
  • pacientů s příznaky onemocnění jater.
  • Léčba cirhózy, rakoviny a dalších onemocnění jater.

Příprava na kvantitativní analýzu vyžaduje dodržování těchto pravidel:

  • nekuřte 1 hodinu před testem;
  • Nejíst 4 hodiny před operací;
  • je nejlepší předat kvantitativní analýzu po absolvování kvalitativní analýzy;
  • Nepijte alkohol den před studiem.

Účinná léčba onemocnění ovlivňuje pokles množství DNA viru v séru. Šest měsíců po zahájení léčby by mělo být množství viru sníženo o 2-3 řády. Pokud se výsledky testů nezměnily v čase, nebo se naopak zhoršily, pak se celá terapie bezpochyby změní a akutní akutní hepatitida se přejmenuje na chronickou.

Když DNA viru hepatitidy vstoupí do těla, může dojít k infekci dvěma způsoby:

  • replikační (dochází ke vzniku akutní nebo chronické hepatitidy, která v budoucnu vede bez cirkulace k lékařskému zákroku k cirhóze jater);
  • integrační (vývoj asymptomatického, neaktivního přenosu viru, který stále vede k cirhóze nebo hepatocelulárnímu karcinomu).

Jak funguje postup odběru vzorků krve? Lékař vytáhne předloktí pacienta turnovkou a vloží jehlu do žíly na lokte, pak vezme krev do stříkačky a nalévá ji do speciální zkumavky. Výsledky budou připraveny za pár dní, čas závisí na tom, kde pacient podává analýzu.

Materiálem je krevní sérum, lymfocyty, hepatobiobs, které jsou umístěny ve zkumavce s dobře zašroubovaným uzávěrem. Ale výsledek může být ovlivněn kontaminovaným materiálem pro analýzu vzorků, nadměrnou expozici materiálu (je skladován až 24 hodin při teplotě nepřesahující +4 ° C).

Metody kvantitativní analýzy

Existuje několik způsobů kvantitativní analýzy, včetně PCR, ELISA, biochemie.

PCR (polymerázová řetězová reakce).

Jedná se o analýzu povrchu antigenního proteinu, který je součástí vnější obálky viru. Po vniknutí virových částic do těla začnou intenzivní rozmnožování na povrchu jater a ničí zdravé buňky orgánu. Nové molekuly se uvolňují do krve.

Na základě toho se zkoumá hladina sérové ​​koncentrace protilátek a zjišťuje se, zda je infekce hepatitidou B nebo ne.

Materiál pro studium se užívá na prázdném žaludku. PCR se provádí v zařízení nazývaném zesilovač.

Algoritmus pro analýzu PCR:

  1. Nejprve se DNA rozdělí na 2 oddělené řetězce zvýšením teploty materiálu pro studium v ​​termocykleru.
  2. Materiál je mírně ochlazen dusíkem. Primery najdou potřebné sekvence v molekule DNA a připojují se k nim.
  3. Prodloužení je třetí krok, když dva primery spojují dvě vlákna DNA. Prostřednictvím enzymu DNA polymerázy je DNA část dokončena z primeru, který se k ní připojil. Takže v oblasti v primerové oblasti se v každém řetězci DNA vytvoří druhý komplementární DNA řetězec.

V budoucnu se tyto kroky opakují mnohokrát a 35 až 45 cyklů se provede za několik hodin, vytvářejí se miliardy kopií požadovaného vzorku. Pokud existují takové kopie, vypočtěte jejich množství na 1 ml materiálu pro analýzu.

Kromě PCR existuje ELISA (enzymová imunotest). Určuje nejen povrchové protilátky, ale také umístěné uvnitř a propojené s předchozími antigeny, stejně jako jejich počet.

Biochemie

Další metoda kvantitativní analýzy. Když virus vstoupí do těla z poškozených jaterních buněk, enzymy se vloží do těla, pokud je jejich počet vyšší než normální, pak můžeme mluvit o infekci. Kromě toho, že je třeba určit, virové zátěže (DNA-HBV), projít jaterní testy (bilirubin se zlomky, ALT, AST, alkalické fosfatázy, gama-GT). Povinná je návštěva specialisty na infekční onemocnění, který v případě potřeby nasměruje pacienta na fibroelastometrii, si zvolí průběh léčby.

Biochemie - kvantitativní analýza

PCR v reálném čase

Při této metodě dochází k vyhledání kopií po každém cyklu a nikoliv po 35-45. Metoda funguje stejným způsobem jako PCR, umožňuje určit počet kopií ve vzorku pro výzkum. Doba analýzy je tedy výrazně snížena, zatímco 100% je zaručeno.

Detekce DNA hepatitidy B

Určení množství DNA hepatitidy B je velmi důležité, protože s malým indikátorem je prognóza onemocnění výhodnější než u většího. Koncentrace HBV DNA se měří v kopiích / ml nebo me / ml

1 me / ml = 2,83 × 10 kopií / ml

Výsledky této analýzy mohou být následující:

  • DNA viru není detekována, pokud není přítomna v těle nebo je koncentrace velmi nízká, 90 me / ml = 200 kopií / ml;
  • DNA viru byla detekována v množství pod normou koncentrace, 2 x 106 kopií / ml;
  • DNA viru je v průměru v rozmezí 2 × 106-2 × 109 kopií / ml;
  • DNA viru je více než 2 × 109 kopií / ml, koncentrace protilátek je vysoká, což naznačuje průběh onemocnění.

Pokud je výsledek analýzy pozitivní, diagnostikuje se:

Pokud je výsledek negativní, pak:

  • v těle není žádný virus;
  • přítomnost hepatitidy B během období regenerace (pokud byly předchozí testy pozitivní).

Ve vzácných případech negativní výsledek testu na DNA viru hepatitidy B naznačuje rychlý a maligní průběh onemocnění.

Rozhodnutí o provedení testu na virus trvá:

Kvantitativní analýza je povinná při diagnostice onemocnění a měla by probíhat před zahájením léčby. Je však třeba si uvědomit, že hepatitida B se někdy úzce propojuje s hepatitidou D, což může vést k další analýze. Proto byste měli zvážit takové varianty komplikací:

  • coinfekce - dochází k infekci najednou dvěma typy hepatitidy B a D. Taková nemoc je mnohem komplikovanější a bolestivější. Chronická forma této nemoci není, protože ve většině případů onemocnění končí smrtelným následkem;
  • superinfekce - časná akutní hepatitida D je spojena s akutním HBV, v takovém případě se onemocnění dostane do chronické s nepříznivou prognózou.

Druhy PCR pro hepatitidu B a interpretaci výsledků

Polymerázová řetězová reakce - typ testu krve, který umožňuje přesně identifikovat virus hepatitidy B. znakem způsobu je, že je schopen ukázat HBV v rané fázi - měsíc po infekci, zatímco specifický antigen u pacienta, který se vyskytuje pouze ve 2 měsících. PCR může detekovat nejen obvyklý DNA virus, ale i mutantní kmeny, které nevidí žádná jiná analýza.

Při dekódování PCR pro hepatitidu B se výsledky porovnávají se standardními hodnotami. Na základě toho se vyvozují závěry o přítomnosti onemocnění (pozitivní výsledek), koncentraci viru (aktivitě) nebo nepřítomnosti onemocnění (negativní výsledek). Zpracování dat trvá 2 týdny.

Typy PCR pro virovou hepatitidu B

Existují dva typy diagnostik, které jsou předepsány pro hepatitidu B. Kvalitativní PCR umožňuje s přesností 100% říci, zda je v krvi HBV nebo ne. Kvantitativní PCR ukazuje aktivitu viru, tj. Kolik DNA fragmentů HBV je obsaženo v 1 ml krve.

Kvalitní PCR a její interpretace

Provedení krevní testy na hepatitidu B pomocí PCR může odhalit pouze přítomnost DNA fragmentů. Určena, pokud pacient předpokládá infekci způsobenou HBV (HBV) nebo jestliže jiné diagnostické metody, například sérologické testy nedávají jasnou odpověď. Interpretace výsledků v kvalitativní analýze je velmi jednoduchá:

  • negativní výsledek - žádný virus;
  • pozitivní výsledek - virus je detekován.

Cílem kvalitativní PCR je potvrdit nebo vyvrátit přítomnost viru hepatitidy B a provést včasnou diagnostiku. Pokud se detekuje HBV během 1-2 týdnů po infekci, bude léčba nejúčinnější. Při aktivním vývoji HBV po dobu 2 měsíců nebo déle dochází k chronickému onemocnění a nelze ho úplně vyléčit.

V případě, kdy vysoce kvalitní PCR pro hepatitidu ukazuje přítomnost viru, je dalším krokem provedení kvantitativní diagnostiky.

Kvantitativní PCR

Předepisovat účinnou léčbu nebo vyhodnotit výsledky léčby, nestačí vědět, že pacient má HBV. Je nezbytné kvantifikovat hodnotu DNA viru hepatitidy B v 1 ml krve, tj. Virové zátěže na těle. Tento typ PCR pro hepatitidu B se provádí v následujících případech:

  1. Před jmenováním léčby.
  2. Hodnocení účinnosti léčby.
  3. Určit vývoj rezistence viru k užívaným lékům.
  4. Určit fázi, v níž se choroba nachází.

Jednotkou viru je mezinárodní jednotka (IU / ml) nebo počet kopií DNA / ml, tj. Počet fragmentů DNA na 1 ml krve. Poměr mezi dvěma jednotkami závisí na zvoleném testovacím systému a pohybuje se od 2 do 7 kopií / ml v 1 IU / ml. Je-li systém neznámý, použije se pro přepočet průměr:

1 IU / ml = 5 kopií / ml

Je-li kvantitativní analýza provedena najednou, hraniční normou pro diagnostiku onemocnění je 75 IU / ml. Pokud je výsledek vyšší než tento indikátor, je provedena diagnóza HBV pod - HBV není detekována.

Kvantifikace kvantitativní PCR

U hepatitidy V normách PCR jsou následující hodnoty virové zátěže (viremie), kopie / ml:

  • 10 ^ 5 kopií / ml. Pokud jsou s vysokou aktivitou viru hladiny ALT pozorovány více než 2krát za šest měsíců, antivirová léčba je okamžitě předepsána.

Chcete-li se dozvědět, jak se bude chování hepatitidy DNA chovat, pokud jde o chronickou diagnózu, tj. Přechod na chronickou formu z akutní, použijí se také výsledky diagnostiky PCR:

  • HBV DNA 2 x 10-6 kopií / ml znamená, že získání chronické formy onemocnění je nevyhnutelné.

Příprava na průzkum

K určení přítomnosti HBV metodou PCR se provádí krevní test z žíly. Postup je vždy prováděn striktně na prázdný žaludek a je nejlepší se dostat do laboratoře ráno, kdy přirozený čas odpočinku z jídla bude 8 hodin. Aby výsledky průzkumu byly správné, musíte předem vědět, jak se správně připravit na kampaň na klinice. Další kroky jsou následující:

  1. Odmítnutí z tučných potravin, kouření, alkoholu a sportu po dobu 12 hodin před zahájením procedury.
  2. Odpočiňte 20 minut těsně před odběrem krve.
  3. Před začátkem léčby by měla sestra být varována před přijatými léky.

Pozor prosím! Pokud je diagnóza prováděna u dítěte mladšího 5 let, pak půl hodiny před zahájením léčby by měla být podána vroucí vodou na 1 sklo každých 10 minut.

Shrnutí

K dnešnímu dni je nejpřesnější metodou diagnostika PCR pro detekci hepatitidy B. Metoda vám umožňuje vidět skryté a mutované formy onemocnění, identifikovat onemocnění v prvních týdnech po infekci a následně provést účinnou léčbu. V závislosti na situaci se provádí kvalitativní nebo kvantitativní PCR, jejichž cílem je odhalování HBV a stanovení jeho aktivity. Chcete-li absolvovat zkoušku, musíte kontaktovat virologa, specialista na infekční onemocnění nebo hepatologa.

Dekódování krevního testu na hepatitidu B

Hepatitida B je jednou z nejnebezpečnějších onemocnění naší doby.

Je způsobena virem, který proniká do těla kontaktem krve s nakaženou biologického materiálu, včetně zůstávající na nehty příslušenství, lékařské nástroje, stroje pro tetování, které nebyly dezinfikovány podle potřeby. Virus může být také předán během sexuálního styku.

K diagnostice onemocnění se provádí analýza hepatitidy typu B užíváním krve pacienta.

K infekci dochází sexuálně a způsob života, druh šíření je hematogenní (krví). Když je infikován, virus proniká do hepatocytů (jaterních buněk), v nichž se produkuje v budoucnu. Prostřednictvím průtoku krve se choroba rychle rozšiřuje tělem. Virus (HBV) se vyznačuje vysokou odolností vůči teplotním vlivům a kyseliny, je schopna udržovat ovlivňující vlastnosti do šesti měsíců.

Jaké jsou krevní testy na hepatitidu B?

Pokud by hepatitida B vykazovala první příznaky, je nutné před zahájením léčby a léčby předložit testy. Krevní test je spolehlivým způsobem, jak vytvořit infekci hepatitidy. Provádí se za laboratorních podmínek. Materiál pro analýzu hepatitidy B je uveden na prázdném žaludku: poslední jídlo by mělo trvat nejméně 8 hodin.

K identifikaci krve viru hepatitidy B charakterizují tři typy testů přítomnost viru v krvi:

  • analýza přítomnosti HBV DNA v materiálu zkoumáním polymerázové řetězové reakce;
  • kvalitativní studie přítomnosti bílkoviny anti-HBc IgG a antigenu HBsAg (zjištěné u zdravých, infikovaných a nemocných);
  • analýza pro detekci proteinů HBeAg a IgM anti-HBc (charakterizují exacerbaci onemocnění).

Pro úplnost se doporučuje provádět současně výzkum několika markerů.

Imunologické testy na hepatitidu B

Nejběžnější testy na hepatitidu B jsou imunologické. Jejich podstatou je odhalit v krvi protilátky produkované tělem nebo játry. Vzorky mají kvalitativní a kvantitativní charakter. Analýzy hepatitidy B a jejich interpretace obvykle obsahují informace o několika charakteristických proteinech. Následující protilátky jsou ve vzorku zkoumány:

Objevuje se v počátečních stádiích infekce před manifestací klinických příznaků.

Pozitivní ukazatel naznačuje přítomnost viru, ale také se vyskytuje u absolutně zdravých lidí. Pokud krev obsahuje méně než 0,05 IU / ml, považuje se výsledek za negativní. Pokud je koncentrace protilátek vyšší, test je považován za pozitivní.

Je zjištěn téměř každý infikovaný pacient. Zachování ukazatelů na vysoké úrovni může hovořit o přechodu nemoci na chronickou formu proudu. Pozitivní marker naznačuje zjištění onemocnění v období exacerbace, prodlouženého zotavení. HBeAg je velmi špatné znamení. Pacient je velmi nakažlivý. V normě - protein v krvi není nalezen.

Existují dva typy protilátek Anti-HBc: IgG a IgM. Přítomnost IgM v krvi je známkou akutního průběhu, vysoké infekčnosti pacienta a možnosti opětovného vniknutí choroby do chronické formy. Normálně není přítomnost IgM povolena. IgG je příznivým ukazatelem. Značka označuje vznik imunity těla proti hepatitidě B.

Pokud je marker nalezen v krvi, lze usoudit, že onemocnění postupuje příznivě a že pacient vyvinul ochrannou imunitu.

Značka signalizuje zotavení a vznik imunity.

Detekce HBV DNA pomocí PCR

Pro laboratorní vyšetření a detekci diagnostiky hepatitidy B v krvi se používá metoda PCR. Metoda zvažování polymerázové řetězové reakce je nejmodernější v oblasti detekce onemocnění.

Konečný transkript ukazuje, zda existují stopy přítomnosti genu patogenu v jaterních buňkách.

Pokud během výzkumu budou dodrženy všechny zásady, výsledek je naprosto přesný. Metoda je použita pro diagnózu, používá se při léčbě a při antivirové terapii.

  1. Kvalitativní PCR z celkového počtu má pouze dva významy: "detekoval" a "nebyl zjištěn". Postup je prováděn u každého pacienta s podezřením na hepatitidu. Při průměrné citlivosti testu PCR v rozmezí od 10 do 500 IU / ml se při nízkých úrovních DNA viru v krvi nerozpozná genový materiál.
  2. Kvantitativní PCR. Na rozdíl od kvalitativních indikuje to nejen hepatitidu B. Kvantitativní analýza naznačuje, kolik je norma zdravého člověka v číselném vyjádření daleko od čísel pacienta. Metoda umožňuje vyhodnotit stádium onemocnění a předepsat léčbu. Citlivost PCR testu pro kvantitativní adherence je vyšší než pro kvalitativní metodu. Základem je výpočet zjištěné DNA, která je vyjádřena v kopiích na mililitr nebo IU / ml.

Navíc kvantitativní PCR poskytuje pochopení vlivu léčby a správnosti zvolené terapie. V závislosti na množství genového materiálu viru může být rozhodnuto o zkrácení doby trvání léčby nebo naopak její prodloužení a posílení.

Biochemický krevní test na hepatitidu B

Metoda biochemické analýzy je povinná pro získání úplného klinického obrazu o průběhu onemocnění. Tato diagnostická metoda poskytuje porozumění práci vnitřních orgánů (játra, ledviny, žlučník, štítná žláza a další). Dešifrování poskytuje porozumění metabolické rychlosti v těle, možných patologických stavů metabolismu. Podrobné ukazatele naznačují nedostatek vitamínů, makroekonomických prvků a minerálů nezbytných pro lidské zdraví a život.

Chcete-li předat analýzu na hepatitidu, je to možné v jakémkoli jiném diagnostickém centru (Invitro, Gemotest atd.). Biochemický krevní test na detekci hepatitidy B zahrnuje následující složky.

Kvantitativní analýza enzymu ALT (AlAt)

Tento enzym se nejčastěji vyskytuje ve zvýšené koncentraci při akutní a chronické hepatitidě. Látka je obsažena v buňkách jater a v případech poškození orgánů krevním proudem vstupuje do cév.

Množství a koncentrace v krvi při virové nemoci se neustále mění, proto se studie provádějí nejméně jednou za čtvrtinu. ALT odráží nejen aktivitu viru hepatitidy, ale i stupeň jaterních poruch způsobených tímto onemocněním. Úroveň ALT se zvyšuje s nárůstem počtu toxických látek jaterního původu a za přítomnosti viru.

Kvantitativní stanovení enzymu AST

Protein je složka nejdůležitějších lidských orgánů: játra, nervová tkáň, ledvinové tkáně, kostra a svaly. Enzym se také podílí na konstrukci nejdůležitějšího svalu, srdce. Vysoké ukazatele AST u pacienta s hepatitidou B mohou signalizovat jaterní fibrózu. Podobná situace nastává při alkoholických, lékových nebo jiných toxických poškozeních jaterních buněk.

Indikátory nadměrného měřítka jsou známkou poškození jater na buněčné úrovni. Při diagnostice poměru AST a ALT (koeficient de Ritis) je třeba vzít v úvahu. Současné zvýšení koncentrace obou enzymů je známkou nekrózy jater.

Bilirubin

Látka se tvoří v slezině a játrech v důsledku rozpadu hemoglobinu v tkáních. Tato složka je součástí žluče. Jsou izolovány dvě proteinové frakce: přímý bilirubin (vázaný) a nepřímý bilirubin (volný). Když se přidružený bilirubin zvyšuje v krvi, je logické podezření na hepatitidu nebo jiná poškození jater. To je přímo souvisí s cytolýzou jaterních buněk.

Pokud se zvyšuje množství nepřímého bilirubinu, pravděpodobně dochází k poškození parenchymální tkáně nebo Gilbertova syndromu. Vysoká hladina bilirubinu podle výsledků analýzy může být důsledkem obstrukce žlučovodů. U hladiny bilirubin vyšší než 30 mikromolů na litr vykazuje pacient ikterický tón pleti, moč se ztmavne a bílé oči změní barvu.

Albumin

Syntéza tohoto proteinu probíhá v játrech. Pokud je jeho množství sníženo, znamená to snížení syntézy enzymů v těle v důsledku výskytu závažných lézí jaterních buněk.

Celková bílkovina

Pokud je množství celkového proteinu výrazně nižší než přijatá norma, znamená to zpomalení fungování jater.

GGT (GGTP)

Enzym, používaný při detekci mechanické žloutenky a cholecystitidy. Zvýšení hladiny GGT je signál toxického poškození jater. Může být vyvolán chronickým alkoholismem a nekontrolovaným užíváním léků. Protein je obzvláště citlivý na toxiny a alkohol, pod jejich vlivem rychle roste jeho aktivita. Uchovávání vysoké koncentrace GGT v krvi po dlouhou dobu indikuje závažné poškození jater.

Kreatinin

Je to produkt metabolismu bílkovin, který se vyskytuje v játrech. Prudké snížení hladiny je signálem zpomalení práce orgánu.

Proteinové frakce

Snížení hladiny bílkovinných frakcí je známkou patologie jater.

Interpretace analýzy hepatitidy B a hodnoty jsou normální

Diagnostika hepatitidy B je kumulativní studie indikátorů. Pouze jejich komplexní analýza nám umožňuje vyvodit závěry o infekci pacienta. Zvažte interpretaci analýzy hepatitidy B. Pro srovnání je uvedena norma látek v krvi.

HBV, DNA kvantitativně [PCR v reálném čase]

Studie k identifikaci původce hepatitidy B (HBV), v němž metodou real-time polymerázové řetězové reakce (RT-PCR) je určena přítomností genetického materiálu (DNA) viru a jeho objemu (virová zátěž) ve vzorku krve.

HBV DNA může být detekována v koncentraci pod dolní hranicí lineárního rozsahu koncentrací. Rozsah lineárních koncentrací je rozsah, v němž lze přesně vypočítat počet kopií patogenu. Pro tuto analýzu je lineární rozsah koncentrací HBV DNA stanovený detekčním zesilovačem 7,5 x 10 2 - 1,0 × 10 8 kopií / ml vzorku.

Ruské synonymy

Virus hepatitidy B (HBV), kvantitativní stanovení DNA.

Angličtina Synonyma

DNA virové hepatitidy B, kvantitativní, PCR v reálném čase, krve; HBV virová zátěž; DNA virové hepatitidy B Quant.

Metoda výzkumu

Polymerázová řetězová reakce v reálném čase.

Jednotky měření

Kopírovat / ml (kopírovat na mililitr).

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Nekuřte po dobu 30 minut před dávkováním krve.

Obecné informace o studii

Virová hepatitida B (HBV) je infekční onemocnění jater způsobené virem hepatitidy B (HBV) obsahujícím DNA. Mezi všechny příčiny vývoje akutní hepatitidy a chronické virové infekce je virus hepatitidy B považován za jeden z nejběžnějších na světě. Počet skutečně infikovaných osob není znám, protože mnoho lidí má infekci bez zvláštních příznaků a nepožaduje lékařskou péči. Vírus je často detekován během preventivních laboratorních testů. Odhaduje se, že asi 350 milionů lidí je postižen virem hepatitidy B a 620 000 zemře každý rok z jeho účinků. V Rusku překračuje počet dopravců s HBV 5 milionů lidí.

Zdrojem infekce je pacient s HBV nebo asymptomatickým virem. HBV se přenáší krví a dalšími tělními tekutinami. Můžete nakazit přes nechráněném pohlavním styku, používání kontaminovaných jehel, krevní transfuze a transplantace orgánů od dárců, dítě může nakazit matku během nebo po porodu (přes trhliny v bradavek). Osoby ohrožené patří: lékaři, kteří mohou přijít do styku s krví pacienta, pacienti na hemodialýze, injekční uživatelé drog, lidí, kteří jsou promiskuitní děti narozené matkám s HBV.

Inkubační doba onemocnění je od 4 týdnů do 6 měsíců. Virová hepatitida B se může objevit jako mírné, která trvá několik týdnů, a ve formě dlouhodobé chronické infekce. Hlavními symptomy hepatitidy: žloutnutí kůže, horečka, nevolnost, únava, v laboratorních testech - jaterní dysfunkce a specifické antigeny jsou HBV Akutní onemocnění může rychle vést k smrti, projít do chronické infekce nebo zakončené úplné uzdravení. Předpokládá se, že po přeneseném HBV je vytvořena odolná imunita. Chronická virový hepatitida B je spojena s vývojem cirhózy a rakoviny jater.

Existuje několik specifických testů pro detekci stávající nebo přenesené virové hepatitidy B. Pro stanovení přítomnosti infekce a pro objasnění období onemocnění použijte definici antigenů viru, protilátek proti nim a DNA viru.

Polymerázová řetězová reakce je charakterizována vysokou citlivostí a specificitou. Pomocí PCR může být DNA viru stanovena kvalitativně nebo kvantitativně. Díky kvalitativní metodě se potvrzuje přítomnost viru hepatitidy B v těle a jeho aktivní reprodukce. Kvantitativní stanovení virové zátěže pro vyhodnocení intenzity onemocnění, účinnost terapie nebo vývoje antivirové rezistence.

Existuje vztah mezi koncentrací viru v krvi a výsledkem akutní virové hepatitidy B. Při nízkém stupni viremie je pravděpodobnost přechodu infekce do chronické formy téměř nulová a infikovaná osoba není nebezpečná pro ostatní. Při vysokém virovém zatížení (5 kopií / ml) dochází často k chronické onemocnění a pacient je potenciálním zdrojem infekce. Byl prokázán vztah mezi množstvím DNA viru v krevním séru, přítomností HBeAg, zvýšením ALT a rozvojem jaterní cirhózy a hepatocelulárního karcinomu (rakovina jater).

Účinnost antivirové terapie se odhaduje snížením množství DNA viru v krvi. Po 3 až 6 měsících po zahájení léčby by se virové zátěž s odpovídajícími terapeutickými odezvami měla snížit o 1-2 řády. Absence snížení velikosti viru nebo jeho zvýšení na pozadí probíhající léčby vyžaduje revizi a modifikaci terapie.

Kvantitativní stanovení HBV DNA ve spojení s klinickým obrazem nemoci a biochemické ukazatele, ukazatele infekce, stejně jako v důsledku jaterní biopsie umožňuje prognózu onemocnění a pro vyhodnocení nutnosti antivirové terapii.

Na co se používá výzkum?

  • Předpovědět průběh virové hepatitidy B.
  • Potvrzení chronické formy virové hepatitidy B.
  • Identifikovat nosiče virové hepatitidy B a sledovat aktivitu násobení viru.
  • Identifikovat skryté a mutantní kmeny viru hepatitidy B.
  • Posoudit účinnost antivirové terapie pro hepatitidu B a rozhodnout o dalších léčebných takticích.

Kdy je přiřazena studie?

  • S kvalitní detekcí DNA viru hepatitidy B.
  • U akutní a chronické virové hepatitidy B.
  • Se smíšenou hepatitidou.
  • Před a během antivirové léčby.

Co znamenají výsledky?

  • "Nezjištěno" - žádná DNA s virem hepatitidy B nebo hodnotou pod limitem citlivosti metody (200 kopií / ml = 120 IU / ml).
  • 10 ^ 5 kopií / ml (6 x 10 ^ 4 IU / ml) - vysoké virové zátěže, aktivní infekční proces (je nutná antivirová terapie).
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kopií / ml (> 6 x 10 ^ 7 IU / ml) - DNA viru hepatitidy B je detekována v koncentracích nad lineární koncentrační rozmezí.

Lineární rozsah koncentrací HBV DNA v určené detekční termocykleru, 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kopií / ml (4,5 x 10 ^ 2-6 x 10 7 IU / ml).

Co může ovlivnit výsledek?

Důležité poznámky

  • Kvantifikace DNA viru hepatitidy B je povinná před podáním antivirové léčby. Během léčby by měla být analýza opakována po 3 až 6 měsících.
  • Virová hepatitida B se často kombinuje s virovou hepatitidou D.

Doporučuje se také

Kdo jmenuje studii?

Literatura

  1. Vozianova Zh.I. Infekční a parazitní onemocnění: ve 3 t. - K.: Zdraví, 2000 - T.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling a další. Použití DNA viru hepatitidy B Kvantifikace protilátek proti hepatitidě B Hepatitida B protilátek proti hepatitidě B Hepatitida B. J Clin Microbiol. 2003 říjen; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrisonovy principy vnitřního lékařství. 16. vyd. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Řízení hepatitidy B. Konference o konsensuální rozvoji NIH. Program a Abstrakty. 20. - 22. října 2008.

Předchozí Článek

Essentiale forte N

Následující Článek

Výživa pro hepatitidu jater

Související Články Hepatitida