Dekódování analýzy PCR pro hepatitidu C

Share Tweet Pin it

Zvláštní laboratorní studie - analýza hepatitidy C ptsr - významně zjednodušuje diagnostiku tohoto virového onemocnění. Výjimka není a hepatitida C. Malý vzorek krve může být zkontrolován na obsah RNA a jiného genetického materiálu virové látky. Analýza pomocí PCR provádí všechny osoby s protilátkami proti hepatitidě C, které cirkulují v krevní plazmě, jejíž přítomnost potvrdila kvalitativní detekci.

Interpretace výsledků je interpretována v grafu výzkumného formuláře jako "pozitivní" nebo "negativní" analýza. Navíc pomocí PCR je možné nejen kvalitativně stanovit minimální obsah viru, ale také počítat počet částic. Je tedy možné určit odhadovanou virovou zátěž a stanovit co nejpřesněji lékařskou taktiku léčby.

Virové poškození jater

Játra jako prvek trávicího ústrojí zaberou obrovskou zátěž. Ve svých buňkách dochází k většině metabolických reakcí všech typů metabolismu, což zajišťuje optimální fungování všech orgánů a systémů. Současně je jeho detoxikační hodnota skvělá pro odstraňování strusky a produktů metabolismu fermentační žlučou.

Porážka jater různými přírodními viry je extrémně nebezpečná pro orgán. Různorodý klinický obraz a nedodržování léčby hepatitidy vede na první místo z hlediska zdravotních rizik. Hepatitida C je chronická a může dávat negativní výsledek testu po dlouhou dobu, pomalu parazitizovat lidské tělo. Virus je přenášen prostřednictvím biologických tekutin: krve a méně často prostřednictvím spermií. Narkotika zneužívání nesterilních injekčních stříkaček, přirozená dodávka nakažených žen, náhodné úrazy nebo škrty zdravotníků může vést k přenosu viru zdravým lidem.

Včasnou diagnózu onemocnění brání skrytý klinický obraz a nesystematická patologie. Pozitivní výsledek může být jednoduše vynechán špatnou kvalitou. Pouze významná léze jaterních buněk způsobuje určitou symptomatologii, nicméně negativní účinek viremie v té době neopouští žádnou možnost obnovit orgán.

Moderní medicína vyvinula speciální metody pro rozpoznání nejmenší stopy viru. PCR, jestliže jaterní biopsie může detekovat nejmenší poškození jater a minimální hladinu protilátek proti viru. Analýza pomocí PCR je nejjednodušší a nejspolehlivější v diagnostické praxi.

Kvalitativní analýza

Podstatou polymerázové reakce je vývoj sekvence RNA. Reakce se provádí, když v krevní plazmě existují stejné virové proteiny.

Speciální katalyzátory umožňují syntetizovat podobnou sekvenci virového řetězce, která se porovná se známými nukleotidy virové RNA. Na základě toho se určuje virové zatížení a poškození jater.

PCR je schopen detekovat i jediný přítomnost požadovaného genu v odebrané krvi. Tato diagnostická řetězová reakce je také velmi specifická. Sekvence nukleotidových řetězců je pro každé zvíře jedinečná, takže enzymatické primery vytvářejí identické sekvence požadované genetické informace. Tak může být každý virus detekován s nejmenší přesností, i když jeho kvantitativní index je extrémně malý.

U pacientů, u nichž byla nalezena protilátka proti virové hepatitidě, byla provedena kvalitativní studie ptsr nebo ifa. Výsledek analýzy může být buď pozitivní nebo negativní, což v obou případech vyžaduje léčbu.

Decipher pozitivní reakce řetězové reakce následuje jako přítomnost fragmentů RNA viru hepatitidy nebo jako fenomén infekce.

V krevní plazmě v okamžiku, kdy se virus aktivně množí a parazitizuje jaterní buňky. Diagnostika PCR může negativně reagovat, pokud jsou částice virové RNA přítomny v plazmě poněkud pod úrovní citlivosti testu nebo vůbec žádná. Po přímé infekci množství viru roste poměrně pomalu a až po 1 až 2 týdnech, jestliže může být jiný kvalitativní výzkum odlišný.

Negativní analýzu lze získat v následujících případech:

  1. Při odebírání materiálu za nevhodných podmínek získání vzorku krve se znečištěním;
  2. Při předchozích injekcích pacientů s heparinem.
  3. Pokud jsou ve vzorkách přítomny jiné enzymy a substráty, které narušují průběh řetězové reakce.

Kvantitativní analýza

Kvantitativní test jako mikrobiologická diagnóza slouží k určení virové zátěže. Potvrzená kvalitativní analýza viremie je základem pro stanovení množství genetického materiálu a jeho koncentrace. Počet detekované virové RNA se stanoví v jednotce objemu krve, obvykle v 1 mililitru. Požadované materiály jsou vyjádřeny v mezinárodních jednotkách, některé laboratoře v analýze ifa používají počet kopií.

Obvykle před jakýmkoli terapeutickým režimem se provádí kvantitativní analýza PCR. Vírusové RNA se počítá dostatečně často: po jednom, čtyřech, dvanácti a čtyřiadvaceti týdnech. 12. týden je považován za indikativní, protože na základě analýzy v tomto období se provádí dekódování účinnosti lékařských opatření.

Kvantitativní analýza pomocí PCR nebo ifa zahrnuje odběr vzorků z žíly.

Interpretace výsledků s vysokou virovou zátěží začíná číslem 800 000 IU / ml. Takový pozitivní výsledek pro hepatitidu C odráží přítomnost nejméně 3 000 000 výtisků v jednom mililitru krve. Nízká hladina viremie se zastaví na čísle 400 000 IU / ml. Výsledky studie mohou být hodnoty jako negativní odezva, stejně jako "nižší než rozsah měření".

Kvantitativní test s odhadem "pod měřicím rozmezím" říká, že reakce nedokázala vypočítat RNA. Vírus cirkuluje v těle, jak je naznačeno kladným kvalitativním testem. Negativní indikátor kvantitativní analýzy ptsr nebo ifa indikuje nepřítomnost RNA v tomto vzorku krve.

Navzdory omezeným způsobům přenosu viru v krvi narůstá riziko přenosu viru prostřednictvím tajemství pohlavních orgánů, od matky k dítěti.

Kvantitativní analýza poskytuje významnou pomoc při hodnocení terapeutických intervencí. IFa a ptsr odrážejí účinek antivirových léků, pomáhají stanovit načasování terapie a posuzují tvorbu imunity u pacientů. Včasná negativní odpověď z laboratorních testů svědčí o úspěšné léčbě a potřebě zkrátit trvání léčby. Pomalý pokles míry viremie může být dešifrován jako potřeba změnit terapeutický průběh. Úroveň virové zátěže určuje prognózu onemocnění. Hepatitida s nízkou rychlostí je pravděpodobně jednoduše léčena a může zcela odstranit virus z těla. Vysoká míra přítomnosti viru v krvi vyžaduje pozornou léčbu a mnohostrannou léčbu.

Kvalitativní analýza hepatitidy C

Zanechat odpověď

Kvalitativní analýza polymerázové řetězové reakce - PCR pro hepatitidu C určuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v těle. V laboratoři se studuje struktura RNA, v níž se virus nachází. Pokud je zjištěn virus C, je nutné podstoupit léčbu, protože zanedbávaná jaterní choroba vede k vážným následkům. Kvalitativní PCR se provádí po zotavení za účelem potvrzení nepřítomnosti protilátek. Jmenován a pro preventivní vyšetření. Při nízké koncentraci patogenu v krvi nemůže PCR (kvalitativní) detekovat nic, protože diagnostický systém má své prahy citlivosti. V případě počátečního stadia onemocnění nebo mírné formy je PCR nakonec diagnostikována pomocí ultrazvuku.

Co je RNA virus?

Termín RNA viru hepatitidy C (nebo RNA viru hepatitidy C) se nazývá samotné onemocnění jater. Virus C se váže na zdravou tělesnou buňku a proniká dovnitř. Časem se šíří po celém těle, je to jen dostat se do krve. Výsledkem je, že patogen proniká játry, spojí se s buňkami a tvrdě pracuje. Hepatální buňky (hepatocyty) pracují pod jeho vlivem, podstupují změny a z tohoto zahynou. Čím delší je virus C v játrech, tím více buněk zemře. Postupně se rozvíjejí nebezpečné nemoci, které vedou ke zhoubné degeneraci a smrti.

Infekce jater s tímto typem viru se nemůže projevit jakýmkoliv způsobem externě. Po mnoho let nebo desítek let se nakažená osoba cítí naprosto zdravá a pouze náhodná vyšetření nejčastěji odhaluje patologii. Při darování krve na hepatitidu se zkoumá část řetězce RNA (ribonukleové kyseliny), která je součástí lidského genu (DNA). Výsledky laboratorního výzkumu by neměly být používány pro sebe-léčbu, protože to je pouze indikátor. Lékař určí přesný obraz a další diagnózu.

Po dokončení: svědectví o studii

Pro potvrzení HCV je přiřazena PCR analýza (polymerázová řetězová reakce). Studie PCR pomáhají najít patogenní materiál ve struktuře RNA a předepisovat účinnou terapii. Jsou jmenováni v následujících případech:

  • identifikace příznaků zánětu jater;
  • screeningové studie prevence;
  • vyšetření osob v kontaktu;
  • diagnóza hepatitidy smíšeného původu (definice hlavního patogenu);
  • Stanovení úrovně aktivity reprodukce viru v chronické formě;
  • cirhóza jater;
  • k určení účinnosti předepsané léčby.
Studie PCR jsou určeny lékařem k určení účinnosti průběhu léčby hepatitidy.

Existuje kvalitativní i kvantitativní analýza PCR. Kvantitativní PCR ukazuje procento RNA s nosiči viru v krvi a kvalitativní PCR indikuje přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pozitivní ukazatel kvality (přítomnost hepatitidy C RNA) také vyžaduje kvantitativní studium. Vysoká koncentrace patogenu hepatitidy C je spojena s rizikem přenosu, tj. S kontaminací ostatních. Nízké množství je lépe zacházeno. Množství RNA virů v krvi nesouvisí s intenzitou onemocnění. Analýza PCR se provádí také v případě terapie interferonem, aby se předepsal trvání a složitost průběhu léčby.

Vlastnosti kvalitativní analýzy PCR pro hepatitidu C

Kvalitativní analýza s indexem polymerázové řetězové reakce je přiřazena všem pacientům, kteří mají v krvi protilátky proti hepatitidě C. Kdo se zotavil a získal zpět, měl by být opětovně testován. Doporučuje se předat analýzu hepatitidy B, pak v případě pozitivního závěru a na hepatitidě D. Také kvalitativně analyzovaná reakce by měla být provedena ve spojení s jinými krevními testy. Analýzy ukazují kompletní obraz šíření viru.

Z výsledků testů bude vidět pouze pozitivní test na hepatitidu C nebo negativní, tj. Přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pokud je závěr "zjištěn", pak je virus aktivně i nadále aktivní. Označení "nebylo nalezeno" označuje nepřítomnost viru nebo jeho malé množství. S tímto indikátorem bychom měli vzít v úvahu skutečnost, že analytická citlivost diagnostických systémů je odlišná a hepatitida C RNA může být stále v krvi, ale v analýze se nezjistila.

Zvláště citlivá metoda PCR s ultra-hepatitidou C se odhaluje i v nepatrných množstvích. Používá se hybridizační fluorescenční studie, která je mnohonásobně vyšší než standardní PCR systémy. Metoda se používá v několika případech:

  • podezření na skryté formy hepatitidy C;
  • Diagnostika PCR nebyla patogenem potvrzena, ale existují protilátky;
  • v případě využití;
  • identifikovat počáteční stadium infekce.
Zpět na obsah

Vysvětlení analýzy

Konečné rozhodnutí v diagnóze je ovlivněno PCR dekódováním HCV, zejména s ultrametodou. Hlavním nedostatkem tohoto výzkumu je přísné dodržování sterilních podmínek pro vzorek a materiály. Malá odchylka někdy ukazuje nepřesné závěry analytika, komplikuje diagnózu a následnou léčbu. Analýza PCR pro stanovení RNA viru hepatitidy ne vždy ukazuje obraz choroby s důvěrou, někdy jsou připuštěny nepřesnosti v obou směrech.

Při diagnostice viru hepatitidy se doporučuje provést komplexní vyšetření.

Norma indikátorů

Absence JgM protilátek proti RNA ve virové hepatitidě C je považována za normu při analýze polymerázové řetězové reakce. Současně zjištění sérologické analýzy naznačují přítomnost protilátek proti viru C a to je také v mezích normy. Kvalitativní definice neukazuje intenzitu onemocnění, pouze odhaluje příčinný účinek hepatitidy C v RNA. Taková analýza se opakuje po ošetření, aby se potvrdilo skutečné uzdravení.

Odchylky

Pokud jsou přítomny protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to rozvoj infekce. Nemoc je akutní nebo chronická, projevuje se v různých fázích. Pokud dojde k poklesu počtu protilátek, bude analýza indikovat dosažení výsledků léčby během regenerace. Existují extrémně vzácné případy falešně pozitivních nálezů v diagnostice. Objevují se u žen během těhotenství a u lidí s jinými infekčními nemocemi.

Co je analýza PCR a virové zátěže?

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je laboratorní metoda pro stanovení DNA a RNA. Poprvé to testovala téměř půl století americká Cary Mullisová. Tento přecitlivělý test je schopen určit nosič genomu z jedné zdrojové molekuly obsažené v krvi, slinách nebo kůži.

Metoda PCR má velké vyhlídky, nachází se nejen v lékařství, ale také v genetickém inženýrství a kriminalistice. S jeho pomocí, klony a vytváření nových typů DNA, určit stupeň příbuznosti. Na epitelu nalezeném na místě činu zřídíte zločince.

Analýza PCR pro hepatitidu - co to je a proč to dělá?

Proč je analýza PCR nezbytná pro podezření na hepatitidu C, co to je?

Virus hepatitidy C - RNA obsahující virus, má 6 genotypů a až 500 podtypů. Ze všech hepatitid má tento virus nejvyšší mutační schopnost a překonává ochrannou bariéru imunitního systému. Z celkového počtu případů hepatitidy virus C způsobil 70% chronických případů a 30% cirhózy a rakoviny jater.

Podstata metody: část vyšetřovaného genu za pomoci speciálních enzymů a podmínek je nucena reprodukovat ve zkumavce. PCR analýza umožňuje určit kmen viru, bez něhož není možné provést účinnou léčbu: každý genotyp je odlišně citlivý na antivirové léky. Existují dva typy PCR:

Antivirová terapie potřebuje konstantní monitorování, aby bylo možné včas napravit léčbu, pro tyto účely se také používá polymerázová řetězová reakce.

Kvalitativní a kvantitativní PCR

PCR kvalitativní na hepatitidě C dává odpověď: Existuje kmen viru C v pacientově krvi a který z nich. Genotypizace je nezbytná k objasnění diagnózy, prognózy onemocnění a určení načasování léčby.

Podle přijatelné klasifikace je gen označen číslem a podtyp je označen malým latinským písmem.

Speciální léčivo založené na přírodních látkách

Cena drogy

Zpětná vazba na léčbu

První výsledky se projeví po týdnu užívání

Více o přípravě

Pouze jednou denně, vždy 3 kapky

Návod k použití

Dekódování tabulky genotypů viru C:

  • Genotyp 1a, 1b, 1c
  • Genotyp 2a, 2b, 2c, 2d
  • Genotyp 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotyp 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotyp 5 a
  • Genotyp 6 a

Nejběžnější genotypy jsou 1,2,3. V Rusku jsou 1a, 1b, 2 a 3 kmeny viru C.

Genotyp viru 1b je obtížněji léčen, než u ostatních, v 90% přechází do chronické formy, z nichž 30% se regeneruje do rakoviny nebo cirhózy jater.

Genotypy 2a a 3a mají stupeň chronizace 33-50%, jsou citlivější na antivirovou terapii.

Při potvrzení přítomnosti viru se kvantifikuje PCR pro hepatitidu C, která počítá počet molekul RNA v laboratorním vzorku pacienta.

Vysvětlení analýzy

Kvalitativní PCR analýza má dvě odpovědi:

PCR negativní znamená, že patogen ve vzorcích krve není detekován.
Pozitivní odpověď naznačuje opak: RNA jednoho nebo jiného genotypu viru S.

Pravděpodobnost spolehlivosti výsledku je 95%. Zbývajících 5% je chyba kvůli chybě osoby. Tato možnost je povolena vzhledem k vysokým požadavkům na provádění výzkumu:

  • pravidla pro skladování činidel;
  • příslušná kvalifikace zdravotnického personálu;
  • čistota biomateriálu.

Souprava PCR samotná má 100% diagnostickou přesnost.

Kvantitativní PCR RNA hepatitidy C vám umožňuje určit virovou zátěž na těle pacienta. Použití:

  • je specifikována fáze onemocnění (akutní, chronická);
  • je stanovena účinnost antivirové léčby;
  • potřeba biopsie jater je vyjasněna.

V některých případech pacient necítí žádné známky onemocnění, zatímco metoda PCR vykazuje infekci HCV. To znamená, že onemocnění je v rané fázi vývoje nebo v chronické formě. K objasnění diagnózy je zapotřebí více výzkumu, jak co nejdříve zahájit antivirovou léčbu.

Virová zátěž u hepatitidy C

Virové zatížení ukazuje aktivitu viru hepatitidy, jak aktivně dochází k jejímu rozmnožování.

Co to je?

Kvantitativní PCR na hepatitidě C se měří v mezinárodních jednotkách na ml nebo IU / ml, což znamená, kolik kopií ribonukleové kyseliny specifického kmene viru C bylo nalezeno v 1 ml testované krve.

Co je považováno za vysoké, jak nízké?

Analýza virové zátěže umožňuje stanovit přítomnost virové RNA v koncentraci 50 IU / ml. Virová zátěž je normální - to je, když není pomocí PCR detekována žádná molekula HCV RNA.

Tabulka virové zátěže:

  • nízká koncentrace od 600 IU / ml 3 x 104 IU / ml;
  • průměrná koncentrace od 3 * 104 IU / ml do 8 * 105Mm;
  • Vysoká - hladina vyšší než 8 * 105 IU / ml.

Nízká virová zátěž - je to signál, že léčba je správně zvolena a prognóza pro léčbu hepatitidy C je příznivá.

Vysoká koncentrace virových buněk že onemocnění je v akutní fázi. Krví pacienta je nebezpečným zdrojem infekce.

Virová zátěž, jejíž indikátory jsou na průměrné úrovni, charakterizuje buď chronickou fázi TUV, nebo může mít dva vývojové trendy: zvýšit nebo snížit.

Na jeho konci - za 6 měsíců se provádí kontrolní PCR.

Náklady na diagnostiku PCR

Následující příznaky by měly vyvolat obavy:

  • obecná slabost;
  • změna barvy kůže, oční sklera, výtok;
  • nevolnost;
  • snížená chuť k jídlu;
  • bolest ve svalech a kloubech;
  • tíha v pravém hypochondriu;
  • zvýšené hladiny AST a ALT v krvi.

Při kontaktu s infikovanými pacienty se v předoperačním období doporučuje také vyšetření hemodialýzou.

Veřejné klinické ordinace provádí krevní test PCR bez poplatku, pokud se k němu přistupuje odborník na infekční onemocnění nebo hepatolog.

Placené služby pro diagnostiku PCR jsou poskytovány ve všech hlavních ruských městech. Náklady závisí na typu testu, dostupném vybavení, načasování a dalších faktorech.

Kvalitativní analýza PCR v Moskvě a Petrohradu bude stát od 600 do 900 rublů. V regionech - od 300 do 800 rublů.

Definice virové zátěže hepatitidy C bude stát 17 000-22 000 rublů. U dalších typů infekcí je cena kvantitativní studie 1200-10000 rub.

Výhody a nevýhody metody PCR

Jaké jsou výhody metody polymerázové řetězové reakce v porovnání s jinými diagnostickými metodami?

  1. Široká nabídka aplikací. Pomocí PCR pomocí standardního vybavení můžete identifikovat jakýkoli virus.
  2. Přesnost detekce patogenů. Při použití různých kombinací enzymů a analytických technik se dosáhne 100% specifikace studie pro indikovanou infekci.
  3. Vysoká citlivost. Tato technika umožňuje detekovat přítomnost jedné molekuly viru v krvi.
  4. Účinnost. Kvalitativní analýza je připravena za několik hodin, kvantitativní - po dvou dnech.
  5. Diagnostika viru v inkubačním období. Při PCR se patogen nezjišťuje přítomností protilátek, jestliže již existuje imunitní reakce těla, ale před zahájením patologického procesu, což usnadňuje léčbu.

Nevýhody PCR jsou důsledkem jejích výhod:

  • Čistota testu vyžaduje nejvyšší stupeň čistoty, včetně vzduchu v laboratoři, aby "cizí" DNA nevstoupila do vzorku;
  • vysoké nároky na zaměstnance, provádění vzorkování a analýzy biomateriálu.

Studie PCR pro hepatitidu C: typy, indikace, přepis

Virová hepatitida C je vážné onemocnění, které se objevuje při poškození jater. U osmdesáti procent pacientů přechází do chronické formy. Vírus se množí v jaterních buňkách - hepatocytech - a způsobuje jejich smrt. Mrtvé tkáně jsou nahrazeny ložisky pojivové tkáně, fibróza se vyvíjí.

S rozvojem fibrózy jater, je schopen plnit svou funkci, začíná cirhóza, což je nebezpečné pro jeho komplikací: zvyšující se tlak v portální žíle, gastrointestinální krvácení, poruchy srážlivosti krve, mentální změny kvůli poškození mozku jádra toxických produktů.

Příčinou onemocnění je infekce virem z rodiny Flaviviridae, což je typ viru RNA. To znamená, že genetický materiál, kterým jsou syntetizovány proteiny patogenu, je kódován molekulou ribonukleové kyseliny. Infekce nastává skrze krev, sexuálně a od těhotné ženy až po plod. Bohužel mezi infekcí a počátkem produkce protilátek může proběhnout poměrně velká doba - od dvou týdnů do šesti měsíců. To neumožňuje stanovení infekce metodou enzymového imunoanalýzy a zahájením léčby v časných stádiích.

Co je analýza PCR?

PCR je metoda molekulární analýzy, která umožňuje detekci genetického materiálu patogenu již v prvním týdnu po infekci za použití polymerázové řetězové reakce. Studie má vysokou specificitu, přesnost a umožňuje nejen stanovit přítomnost nebo nepřítomnost viru, ale i jeho koncentraci a genotyp.

Pro studii si vezměte pacientovu krev, v níž se může potenciálně nalézt RNA viru. Krev se přidá primerů - uměle syntetizované krátké délce části požadovaného genu a RNA polymerázu - speciální enzym, který násobí množství genetického materiálu patogenu. Pomocí speciálního přístroje se provádí několik cyklů vytápění a chlazení. Materiál je pak analyzován a porovnán se známými virovými geny, na základě kterých se dospěje k závěru o přítomnosti nebo nepřítomnosti infekce.

Typy PCR analýzy pro hepatitidu C

Existují tři typy analýzy PCR:

  1. Kvalitativní analýza PCR. První fáze studie. Umožňuje vám identifikovat genetický materiál viru v krvi.

  • Kvantitativní analýza PCR. Umožňuje určení virové zátěže - koncentrace genetického materiálu patogenu v jednom mililitru krve. Tato studie se provádí před zahájením léčby a poté v první, čtvrté, dvanácté a (pokud je kurz dlouhý) ve dvacátém čtvrtém týdnu léčby, aby se vyhodnotila jeho účinnost.

  • Genotypizace. Příčinný faktor hepatitidy C se často a rychle mění. Na planetě bylo nalezeno sedm variant genotypu tohoto viru. V Rusku jsou společné první, druhé a třetí typy. Každý z genotypů má jinou rezistenci k terapii, například účinnost léčby prvního typu je šedesát procent a pro druhý a třetí dosahuje osmdesát pět. Proto, aby bylo možné vybrat vhodná léčiva a předepsat dostatečnou dobu trvání léčby, je nutné přesně určit, jaký typ viru je pacient infikován.
  • Indikace pro analýzu PCR pro hepatitidu C

    Studie PCR je předepsána v následujících případech:

    • kontakt s nemocnou, která by mohla vést k infekci;
    • pozitivní imunoanalýza spojená s enzymem;
    • příznaky jaterní cirhózy: změny velikosti jater, zvětšení sleziny, výskyt podkožního žilního plexu na břiše;
    • výskyt příznaků poškození jater: bolesti na pravé straně břicha, zožnění kůže;
    • zvýšená aktivita ALT a AST v biochemické analýze krve;
    • před zahájením léčby k určení virové zátěže;
    • sledovat účinnost antivirové léčby;
    • po dokončení léčby k monitorování relapsu;
    • v přítomnosti diagnostikované hepatitidy B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater.

    Dekódování studie PCR pro hepatitidu C

    Dekódování analýzy PCR a enzymového imunoanalýzy pro hepatitidu C by mělo být řešeno specialistou na hepatologii nebo na infekční nemoci. Analýza výsledků PCR je nezbytná v kombinaci s biochemickým vyšetřením krve, biopsií a ultrazvukem. Pouze kvalifikovaný lékař bude schopen analyzovat výsledky studií a na základě nich předepsat správnou léčbu.

    Dekódování kvalitativní analýzy.

    Genetický materiál patogenu byl nalezen v analyzovaném biologickém materiálu. Infekce je potvrzena.

    Neexistuje žádná infekce nebo množství RNA patogenu je pod hranicí citlivosti.

    Dekódování kvantitativní analýzy.

    Normální postava pro zdravé lidi. To znamená, že v testovaném materiálu není přítomna žádná RNA hepatitidy C nebo její koncentrace je pod prahem citlivosti studie.

    Koncentrace RNA je nižší než rozsah kvantifikace. Takové výsledky jsou interpretovány velmi opatrně, korelují je s údaji jiných studií, často provádějí druhou studii.

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za nízkou. Obvykle snížení množství viru znamená, že terapie je úspěšná.

    Více než 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za vysokou.

    Více než 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Množství RNA je nad horní hranicí rozsahu kvantifikace. Závěry o stupni virové zátěže s tímto výsledkem nejsou možné. Obvykle se v takových případech opakuje test s ředěním vzorku krve.

    Dekódování genotypizace.

    Byla detekována RNA specifického genotypu

    V biomateriálu je detekován virus hepatitidy C specifického genotypu a podtypu. Výsledek je kódován římskými číslicemi a latinkou, například - 1a, 2b. Existuje sedm genotypů a šedesát sedm podtypů, ale v Rusku existují pouze tři první typy.

    RNA virové hepatitidy C byla detekována

    V krvi se RNA nachází v Rusku vzácným genotypem, který nelze přičíst prvnímu, druhému nebo třetímu typu. Je zapotřebí více výzkumu.

    Tento výsledek naznačuje, že pacient je zdravý, nebo že úroveň RNA patogenu je příliš malá.

    Situace je možná, pokud je analýza PCR pro hepatitidu C negativní a enzymový imunotest detekuje protilátky proti viru. To znamená, že pacient měl v akutní formě hepatitidu C a uzdravil se. Přibližně dvacet případů infekce vede k spontánnímu vyléčení, pokud tělo pacienta vykazuje dostatečnou odolnost proti infekci.

    Navzdory skutečnosti, že PCR je velmi přesná analýza, její výsledky mohou být zkresleny v následujících situacích:

    • krev byla transportována do laboratoře za nevhodných podmínek, teplotní režim byl porušen;
    • byl vzorek biomateriálu kontaminován;
    • v krvi byly zbytky stop heparinu a dalších antikoagulancií;
    • Ve zkoumané látce byly inhibitory - látky, které zpomalují nebo zastavují polymerázovou řetězovou reakci.

    Výhody PCR v porovnání s jinými metodami

    1. Diagnóza v počátečních fázích. PCR detekuje genetický materiál vyvolávajícího onemocnění. Pomocí analýzy imunofluorescence lze stanovit pouze imunoglobuliny - látky, které organismus produkuje v reakci na infekci. V případě infekce způsobené hepatitidou C může být interval mezi infekcí a nástupem imunitní odpovědi několik týdnů a měsíců, kdy bude ELISA neúčinná. PCR poskytne odpověď už v prvním týdnu po infekci.

  • Nízká pravděpodobnost chyby. Ve studovaném materiálu se určuje genetický materiál, který je charakteristický pouze pro jeden typ patogenů. To vám umožňuje vyloučit falešné výsledky. Při ELISA jsou možné chyby, protože stejný druh protilátek lze uvolnit proti různým virům - takové protilátky se nazývají zkřížené reakce.

  • Vysoká citlivost. PCR může detekovat RNA patogenu i v minimálních množstvích. To umožňuje identifikovat skryté infekce.
  • Jak se připravit na dodávku krve pro výzkum PCR

    Pro analýzu PCR se pro hepatitidu C sbírá venózní krev. Obvykle se z pacientovy žíly najednou odeberou dvě části krve: první se odešle pro PCR a druhá pro ELISA. To se provádí, aby bylo možné přesněji posoudit, jak špatně je pacient infikován tímto virem a jak proti němu bojuje imunita.

    Obvykle jsou pro pacienta vyžadována následující pravidla:

    • vyšetření krve se odebere ráno;
    • přestávka mezi posledním jídlem a dodávkou krve by měla být osm až deset hodin;
    • dva nebo tři dny před analýzou se musíte vzdát smažených a mastných potravin a alkoholu;
    • po dobu čtyřiadvaceti hodin před analýzou by se pacient měl vyhnout fyzické námaze: nemají váhy, nechodí do tělocvičny nebo do bazénu.

    Hepatitida s dekódováním kvantitativní analýzy

    Virus hepatitidy C je schopen reprodukovat v krvinkách a způsobit lymfoproliferativní onemocnění. Díky mnoha mutacím dochází k oslabení obranyschopnosti těla, objevují se genotypy a podtypy viru. Správná a včasná identifikace určitého typu závisí na účinnosti antivirové terapie. Nebezpečí nákazy je, že onemocnění je asymptomatická. Celkem 15% ze 100 může mít nevolnost a zvracení, ztrátu hmotnosti a horečku.

    Definice viru hepatitidy C

    Standardní normou hepatitidy C jsou velikosti od 40 do 60 nm, s většinou lipidů, poškození jater v důsledku akutního nebo chronického průběhu onemocnění. Hepatitida C, jmenovitě RNA z rodiny Togaviridae, je extrémně vytrvalá, přenášená transfuzí krve nebo použitím nesterilních předmětů, nesprávnou hygienou koupelnového příslušenství, Kvantitativní analýza umožňuje vyšetřit krev a identifikovat genetickou strukturu infikovaného viru.

    U hepatitidy C a jejich genotypů, které mají být stanoveny, se provádí kvantitativní analýza. V závislosti na analyzátoru lze určit tři úrovně výskytu viru RNA.

    Podtypy mohou produkovat různé modifikace, takže specifičnost a citlivost analyzátoru by měla být sto procent. Kromě zjišťování onemocnění u pacienta je nutné určit stupeň jeho závažnosti. Některé laboratoře nemají všechna data o definicích RNA viru, existuje možnost falešně pozitivní odpovědi.

    Studie hepatitidy C bude přesnější při studiu těchto ukazatelů:

    Při upozornění na výsledky těchto indikátorů a na celkovém stavu těla je zobrazen výsledek, který ukazuje stupeň infekce, formu a počet buněk hepatitidy C v krvi. To přispívá k hojení a účinnosti antivirové terapie.

    Typy analýz pro hepatitidu C

    Polydizovaná řetězová reakce (PCR) poskytuje představu o množství DNA částic v analýze pacienta a správně identifikuje příčinu infekce.

    Infekční agenti se mohou projevit. Takové infekční onemocnění jater, jako je hepatitida C, je v současné době léčitelné, když je zjištěno včas. Je-li podezření na virus, je provedena PCR analýza.

    Zatímco příznaky viru mohou být maskované po dlouhou dobu, osoba nemusí cítit nástup průběhu onemocnění. Ale při pečlivém vyšetření v 60-70% případů se detekuje hepatitida C, primární analýza, ve které je ELISA, pak diagnostika PCR. Analýza se provádí v určitých obdobích, aby se zjistila fáze onemocnění a aby se předepisovala vhodná léčba. Bez toho, bez použití všech těchto postupů, můžete roubovat z hepatitidy.

    Nejprve přichází kvalitativní analýza, která pouze potvrzuje hypotézu o infekci a pak kvantitativní určení zátěže jater. Ideální volbou je negativní výsledek pro hepatitidu C v genetickém materiálu pacienta.

    Kvalitativní a kvantitativní analýza

    Existují kvalitativní a kvantitativní analýzy. Podstatou prvního je to, že určuje přítomnost infekce v krvi. A to znamená, že virus postihuje zdravé jaterní buňky. Pokud má pacient protilátky proti hepatitidě C, okamžitě se provede kvalitativní test. Norma, kterou by výsledek měl způsobit, je "nezjištěn v krvi". Při určování koncentrace viru existuje potřeba znalosti o citlivosti diagnostického systému, protože analýza může být provedena osobami podstupujícími antivirovou terapii. Citlivost analyzátoru by neměla být nižší než 50 IU / ml.

    Když je zjištěn virus, provede se kvantitativní analýza, jinými slovy virové zátěže, které určuje koncentraci viru v krvi a závažnost onemocnění.

    Vírová RNA, která je v určitém množství krve, je definována jako norma rychlostí 1 ml na 1 cm krychlovou. Po kvantifikaci virové zátěže lze posoudit stupeň infekce neinfikovaného prostředí. Jakmile koncentrace hepatitidy C stoupne v krvi, musí být životní prostředí izolováno.

    V prvních fázích je důležité zjistit stupeň koncentrace hepatitidy, aby bylo možné určit rychlost rehabilitace. Pokud je míra hepatitidy C překročena o více než 800 tisíc IU / ml, je považována za příliš vysokou, s nárůstem na jeden milion - kritická. Je-li kvantitativní rozmezí menší než 400 tisíc IU / ml, má se za to, že kontaminace ostatních se objeví s menší pravděpodobností. Tento údaj jasně ukazuje, že hepatitida C v těle je přítomna ve velmi malých dávkách. Analýza nebyla schopna stanovit kvantitativní hodnotu RNA virových částic, takže je několikrát převedena na přesnost diagnózy.

    Co je PCR?

    Dnes je spousta různých onemocnění. A ne menší počet metod jejich určení. Vzhledem k tomu, že agenti infekce se naučili jednoduše zvykat na životní prostředí a vyvíjet se, nejnovější technologie se používají k jejich diagnostice. Polymerázová řetězová reakce (PCR) je rychlejší a přesnější metoda, která je zaměřena na nalezení příčinného původu onemocnění, a to podstatným zvýšením podílu DNA viru hepatitidy ve vzorku. Často se píše o tom, že hledá jehlu v seno a pak staví stoh jehel.

    Typy metody PCR

    Zvýrazněte kvalitní a kvantitativní analýzu hepatitidy. Chcete-li zjistit, zda je virus v těle, a ti, kteří našli protilátky proti hepatitidě C, proveďte kvalitativní testování. Analýza analýzy dává výsledek: "pozitivně"; "Negativní". Negativní význam znamená: buď osoba je zdravá, nebo činitelé v krvi nestačí a nelze je nalézt. Proto stojí za to uskutečnit druhou studii po nějaké době.

    Pozitivní výsledek naznačuje existenci infekce. To je téměř vždy přesná hodnota. Chybné výsledky obvykle závisí na lidském faktoru (nesprávné uložení nebo nedodržení pravidel procedury). Když je norma, výsledek je negativní. Před testem neexistují žádná zvláštní pravidla, stačí krvácet z žíly.

    Pokud se zjistí, proveďte kvantitativní analýzu (virové zátěž) - udává číselné hodnoty: kolik RNA viru hepatitidy je v předepsaném objemu testovaného materiálu. Při aktivním vývoji infekce se na infikované osobě může objevit po 1-2 týdny. Krev se také obvykle vyšetřuje, protože látky v něm cirkulují volně.

    Vlastnosti kvantitativní analýzy PCR

    Rozdíl v kvantitativní analýze spočívá v tom, že ne všichni prošli. Kvalitativní - určuje přítomnost a kvantitativní - pomáhá s potvrzením závěru "virus hepatitidy", prognózou průběhu onemocnění a určením průběhu léčby. Jak účinná je terapie, podívejte se na počet RNA před a během léčby. Také se používá k určení dávky léků.

    Indikace

    Zpravidla se vyrábí před začátkem oživení. Hlavní indikace mohou být:

    • definice virové zátěže a kontrola antivirové léčby;
    • kvalitativní PCR našel protilátky proti hepatitidě C;
    • zjištění akutní a chronické hepatitidy C;
    • existence smíšené hepatitidy;
    • při plánování léčby;
    • pokud kvalitativní studie stále zjišťuje přítomnost onemocnění po dvanáctém týdnu léčby.

    Také se podívejte, jaký druh virové zátěže pro hepatitidu: nízká terapie je úspěšná; zvýšené - léčba není efektivní a je třeba ji změnit.

    Co se děje v různých fázích onemocnění?

    V různých fázích onemocnění se studie provádí tak, aby zhodnotila přínos léčby a plánovala dobu jejího dalšího provedení. S dobrou odezvou na terapii je zkrácena. V opačném případě s pomalým stažením viru je průběh léčby prodloužen. PCR pro hepatitidu se provádí ve dnech 1,4, 12, 24 týdnů léčby. Když ukazatele neklesají po 12 týdnech, dospějí k závěru, že terapie není vhodná pro tento organismus. Tato analýza slouží k určení, jak je infekce aktivní a jaká je pravděpodobnost jejího přenosu. Například v těhotenství existuje riziko infekce dítěte. Po léčbě se identifikuje riziko relapsu.

    Vysvětlení

    Po studiu lze analýzu dešifrovat ne v číslech, ale slovy: "pod měřícím rozsahem" a "nezjištěným". Kvantitativní PCR je citlivější na kvalitu. Závěr "nebyl nalezen" může říci, že infekce nebyla nalezena. "Pod měřícím rozmezím" - virus nebyl detekován, ale je v malém množství. V této situaci proveďte druhou studii.

    Virová zátěž - stanovení počtu infekčních RNA ve stanoveném objemu krve (kvantitativně 1 ml = 1 kubický centimetr). Je formulován v mezinárodních měřeních ME / ml. Jednotlivé laboratoře označují kopie / ml. Dešifrovat překlad komponent do mezinárodních hodnot, různé testovací systémy mohou svým způsobem. Tabulka 1. Dekódování kvantitativní analýzy virové RNA

    Norma kvantitativní analýzy hepatitidy C

    Když je člověk zdravý, norma je - "nebyla nalezena". Postižená lidé norma sníží dávkování výsledků viru v logaritmické jednotky, což se projevuje snížení počtu nul v analýze podle jedné (např, 1 * 106 IU / ml až 1 x 105 IU / ml). Rámeček koncentračního rozmezí viru, který určuje termocykler, je v rozmezí 1,8 x 102 - 2,4 x 107 IU / ml. Výklad výsledku:

    • nízká koncentrace - od 600 IU / ml do 3 x 104 IU / ml;
    • průměr - od 3 * 104 IU / ml do 8 * 105 IU / ml;
    • Vysoko nad 8 * 105 IU / ml.

    Odchylky

    Pokud se výsledky analýz změní mimo normu, může to znamenat návrat choroby a reprodukci viru. Některé faktory mohou ovlivnit příjem nespolehlivého výsledku, například kontaminace vzorků; přítomnost heparinu v krvi a látek, které zpomalují působení komponent PCR; laboratorní chyby; nedodržení zkoušky.

    Také výsledky v několika laboratořích se mohou lišit, možná existovala jiná metodologie výzkumu. Abychom věděli, kolik je postiženo játra a nebezpečí onemocnění, nestačí kvantifikovat hepatitidovou PCR. Kromě toho jsou prováděny biochemické postupy a biopsie.

    Při plánování léčby je virus genotypován. Vzhledem k tomu, že se hepatitida C může změnit, existuje několik skupin. Pro různé typy léčby se mohou lišit. Existují situace, kdy existuje několik druhů, ale analýza najde jeden, který převládá. Poté bude test znovu zadán.

    Výhody metody

    Technika PCR umožňuje poskytnout názor a předepisovat správné zacházení. Výhody metodiky:

    • Rychlost výsledků nevyžaduje rozlišování a kultivaci druhů patogenu. Automatizace procesu umožňuje zpracování a studium materiálu s výsledkem 4-5 hodin.
    • Přímá identifikace patogenu - nalezení zvláštní části DNA, přímo naznačuje přítomnost nemoci. Například, ELISA - zjistí, markerové proteiny (bakteriální produkty), které nejsou přesně potvrzují přítomnost onemocnění.
    • Specificita - zkoumá se látka, která je specifická pro určitý patogen, což vylučuje reakci na falešné kopreaktivní látky.
    • Citlivost - může detekovat nejmenší počet virů.
    • Univerzalita - je založena na nalezení fragmentů DNA nebo RNA specifických organismů. To umožňuje provádět diagnostiku pro všechny látky z jednoho biomateriálu, jestliže jiné metody jsou bezmocné.
    • Odhaluje nejen zřejmé, ale i skryté infekce - je efektivní pro studium činitelů obtížně pěstovaných, nekultivovaných, trvalých.
    • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

    Prostřednictvím tohoto výzkumu může být každé osobě diagnostikována diagnóza nepřítomnosti této nemoci. Ale kvůli spolehlivým skutečnostem musíte postupovat podle pokynů. PCR se používá v různých odvětvích: forenzní, pro testování otcovství, pro diagnostiku různých virů, pro detekci alergie na léky, klonování genů, mutagenezi, sekvenování DNA.

    Kdy je přiřazen test virové zátěže?

    Tato studie je přiřazena lékaře v případě kladné odpovědi v diagnostice hepatitidy C. Zpravidla musí být jmenován současně s analýzou určit genotyp hepatitidy C. Co dělá dekódování kvantitativní analýzy pro hepatitidu C? Především tato analýza ukazuje, jak je pacient infikován, a proto je nakažlivý. Kvantifikace viru v krvi může také určit, jak efektivní je terapie. Lékaři jej předepisují po 4, 12 a 24 týdnech léčby. Snížení úrovně virové zátěže naznačuje, že léčba byla správně zvolena. Analýza se také provádí po 24 týdnech od ukončení léčby.

    Studie ukázaly, že stupeň virové zátěže ne vždy ovlivňuje rychlost vývoje patologických procesů v játrech. Případy nosiče viru ukazují, že osoba samotná nemusí být infikována hepatitidou C, ale být zdrojem infekce jiných lidí. Navíc se nositelé mohou kdykoli zhoršit. Virus hepatitidy C se aktivuje se sníženou imunitou, například po akutní respirační virové infekci, chřipce, silném stresu nebo hypotermii.

    Způsoby přenosu hepatitidy C

    Infekce hepatitidou C může:

    • přes krev. Možná infekce transfúzí kontaminované krve, během operací a manipulace s krví, zubní ošetření, odstranění krtků a bradavic, pokud došlo k chybám v sterilizačních nástrojích;
    • v kosmetických salónech při tetování, piercingu, lemování manikúry a pedikúry, kosmetické čištění obličeje atd.;
    • z matky na dítě během porodu (5%);
    • během nechráněného sexu s infikovanou osobou;
    • během injekčního užívání drog ne s jednorázovými injekčními stříkačkami;
    • kdy je první pomoc poskytnuta osobě infikované virem, pokud nejsou dodržena bezpečnostní opatření

    Na rozdíl od jiné hepatitidy jsou metody přenosu hepatitidy C spojeny hlavně s krví. Není možné dostat hepatitidu C cestou do domácnosti! Ani handshakes, ani obyčejné polibky (non-sexuální povaha) a komunikace, ani použití předmětů pro domácnost mohou přenášet hepatitidu C! Nepoužívejte jen manikúru a holicí potřeby od osoby, která trpí hepatitidou C! Při poskytování první pomoci při úrazech by pacienti s hepatitidou C měli vždy nosit rukavice! Virus zemře při varu po několika minutách a při mytí při 60 ° C - po třiceti minutách. Zmrazení nezabije virus. Vražedný účinek na UV záření viru. Po 16 hodinách virus zemře při pokojové teplotě!

    Diagnostika PCR

    PCR je nejběžnější a přesnější metodou pro stanovení viru a jeho kvantitativních schopností. Metoda je schopna detekovat viry v různých formách a diagnostikovat méně známé choroby.

    PCR analýza (polymerázová řetězová reakce) se provádí odběrem krve a stanovením virové RNA v ní.

    Specifické enzymy se přidávají do vzorků krve a stanoví se ve speciálním reaktoru. Existuje klonování buněk.

    Nejprve je jedna buňka rozdělena na dvě kopie, pak každá kopie je rozdělena na dvě další. Takže po syntéze kopií se objeví stovky DNA buněk.

    DNA může být porovnávána s databází informací o různých patogenych a identifikovat infekci v časných stádiích onemocnění.

    Výhody metody PCR:

    • mnoho metod diagnostiky odhaluje pouze přítomnost viru izolací krevních produktů životně důležité aktivity infekčních mikroorganismů. Metoda PCR přímo naznačuje příčinu infekce;
    • Specificita PCR je, že jedinečný fragment DNA je detekován ve zkoumané vzorce krve. To eliminuje šanci na falešný výsledek;
    • PCR může detekovat i jediné infekční buňky a diagnostikovat několik patogenů v jediném vzorku krve.

    Kvalitativní analýza

    Pomáhá detekovat virus v krvi. Pokud je výsledek pozitivní, měli byste pokračovat v vyšetření a provést kvantitativní analýzu, která určí fázi onemocnění, a poskytne lékařům příležitost naplánovat nejpříznivější léčebnou taktiku. Při provádění této analýzy jsou povoleny pouze dva závěry:

    • "Zjistil." Důkaz o přítomnosti viru v krvi. Podobný výsledek se považuje za pozitivní. Krevní RNA již byla detekována, která se již začala vyvíjet, infikovala zdravé buňky a zasáhla játra.
    • "Nezjištěno". Říká, že v krevním vzorku není žádná RNA pro hepatitidu C. Existují také případy, kdy koncentrace viru v testovaném vzorku je zanedbatelná a nespadá do citlivosti analýzy. Stojí za zmínku, že analýza odhalila infekci v 10. den po infekci, což umožňuje identifikovat virus před jeho významnými vnějšími projevy.

    Kvantitativní analýza

    Detekuje koncentraci genetického materiálu viru v určitém objemu krve. To nejen umožňuje určit závažnost onemocnění, ale také umožňuje vidět celý klinický obraz (včetně léčby). Výsledkem této analýzy je pouze 3 závěry:

    Výsledkem je "pozitivní". Výsledek v číselném indexu odráží virové zatížení. Koncentrace viru určuje množství viru v 1 mililitru, což je 1 kubický centimetr krve. Jednotky této analýzy jsou ME / ml (mezinárodně přijaté jednotky na mililitr). Pokud je koncentrace virových částic menší než 8x10 000 IU / ml, je léčba účinná, jestliže je naopak nutné změnit taktiku léčby.

    Pokud virální zátěž během prvních týdnů léčby klesne na 60%, pak účinnost léčby je vysoká. Nízká hladina se rovná 400 000 IU / ml a vysoká hladina je od 1 000 000 IU / ml. Virová zátěž určuje stupeň onemocnění a možnost jeho přenosu. Při vysoké koncentraci virových buněk v krvi je riziko přenosu onemocnění buď vertikálně nebo sexuálně poměrně velké.

    • Výsledkem je "Neplatný". Tento výsledek znamená, že byla zjištěna kvalitativní analýza viru v těle, ale kvantitativní analýza nemohla určit jeho koncentraci v krvi. K tomu dochází, když množství RNA částic viru v krvi je pod detekčním rozmezím.
    • Výsledek "Nenalezeno". Interpretace analýzy znamená nepřítomnost RNA buněk hepatitidy C ve vzorku krve.

    Kvantitativní analýza ČLR se provádí ve všech stádiích onemocnění. K určení optimální léčby se testy provádějí v datech: (4., 12., 16. a 24. týden). Pokud výsledky ukazují snížení virové zátěže, může být léčba považována za účinnou. Po ukončení terapie se kvantitativní analýza provádí za účelem detekce opakování, tj. Detekce viru po snížení jeho aktivity na minimum.

    01 Principy diagnostiky HCV

    Sérologickou diagnózu hepatitidy C je založen na detekci unikátního markerů vzorků lidské krevní plazmy z viru hepatitidy C: protilátky proti antigenům HCV patří do imunoglobulinu G a M (anti-HCV-IgG a anti-HCV-IgM), a nukleové kyseliny patogenu (RNA HCV).

    Princip této metody je založen na detekci specifických fragmentů DNA (RNA) různých biologických objektů ve zkoumaném materiálu, jejich selektivní syntéze a další detekci produktů amplifikační reakce těchto fragmentů.

    Kvantitativní modifikace PCR poskytují představu o HB, která je rozhodující pro prognózu a kontrolu léčby virové hepatitidy C.

    02 Výpočet virové zátěže pro virovou hepatitidu C

    Obecně platí, že HCV RNA může být stanovena v krvi již v prvním týdnu po infekci, před výskytem anti-HCV (anti-HCV), které nemohou být detekovány během prvních 8-12 týdnů. Oba markery infekce HCV lze detekovat v krvi v různých kombinacích, což vyžaduje správnou klinickou interpretaci.

    Proto, pro vytvoření konečné diagnózy je účelné, a to zejména při identifikaci pouze jeden ze dvou HCV markerů provádí opakované testování vzorku krve pro anti-HCV a HCV RNA.

    V průběhu studie se provádí detekce a počítání počtu kopií HCV RNA pomocí PCR v reálném čase.

    V klinické praxi, nejdokonalejší PCR diagnostika je real-time PCR, které vylučuje kontaminaci vzorků a určuje přítomnost a množství HCV RNA za dva týdny po očekávaném infekci. Tato technika mimo jiné určuje genotyp viru s virovou zátěží pro jednu studii. Klinická specifičnost testu je 100%. Standardní rozsah testovaných hodnot je od 15 do 100 milionů IU / ml. Genotypy viru 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6) jsou odhaleny. Prah pozitivního testu, kdy lze detekovat RNA viru, je 15 IU / ml. Hlavní výhodou této metody PCR je velmi vysoká citlivost testu - 1 kopie genomové DNA infekčního agens v testovaném vzorku ve vnořené PCR modifikace.

    PCR je moderní, vysoce citlivá metoda. Ale výhodou - vysoká citlivost - je také jeho zranitelnost, tedy vede k chybným výsledkům, i když analýza vysoce kvalifikovaných odborníků v dobře vybavených laboratořích... Výsledky studií v různých laboratořích se často neshodují, což naznačuje potřebu standardizace diagnostických systémů pro diagnostiku PCR a zvýšená pozornost k provádění tohoto typu výzkumu. Vysoká cena, délka analýzy, složitost metody a nesrovnalost mezi výsledky získanými v různých laboratořích omezují použití PCR v široké praxi.

    Výsledky studie jsou uvedeny ve formě s tabulkou ukazující zjištěnou hladinu RNA viru (počet kopií nebo koncentrace v IU / ml). Jiné matematické symboly mohou být použity k vyjádření hodnoty ME / ml, například 1,9 * 10,5 (1,9 pro 10 až 5 stupňů).

    03 Indikace pro výzkum

    Hlavní indikace pro určení virové zátěže virové hepatitidy C jsou:

    • laboratorně potvrzená kvalitativní přítomnost RNA v krevním séru;
    • Přítomnost lékaře, který má na starosti výběr režimu pro použití antivirových léků;
    • Potřeba přesného posouzení účinnosti léčby.

    Studie nevyžaduje zvláštní přípravu pacienta.

    04 Výklad výsledků

    Normálně u zdravého člověka neexistuje RNA patogenu, tj. BH je nula. BH je vyjádřena v mezinárodních jednotkách na ml. Je izolován velký BH (> 400 000 IU / ml) a malý BH (100 000 000 IU / ml)

    Pro sledování účinnosti antivirové léčby by měla být použita PCR v reálném čase s minimální detekční hladinou 15 IU / ml. Pro rozlišování mezi nízkým HH a vysokým je hladina virové RNA 500 000 IU / ml.

    Úroveň virové zátěže je monitorována jak u akutní, tak u chronické hepatitidy C. Úroveň virové zátěže je fixována během léčby, po jejím ukončení a 24 týdnů po léčbě.

    U těhotných žen je tento indikátor fixován pro diagnostické účely, protože antivirová terapie během těhotenství není prováděna.

    Údaje o úrovni virové zátěže se používají k výběru a kontrole antivirové terapie, avšak v žádném případě neposkytují představu o výsledku onemocnění, zejména v případě chronických forem HCV s normální funkcí jater.

    Po klinickém sledování pacienti jednou ročně kvalitativně stanovují HCV RNA v krvi. Pokud je kvalitativní výsledek pozitivní, provede se kvantitativní analýza s definicí virové zátěže.

    05 Závěr

    K dnešnímu datu se k diagnostice HCV používá různé metody, mezi nimiž je kvantifikace úrovně virové zátěže klíčem k úspěšné léčbě pacienta. Výhodou této metody je vysoká spolehlivost, citlivost a klinická specifičnost. Kromě toho je úroveň virové zátěže velmi jasným indikátorem účinnosti léčby antivirovými léčivy jak v monoterapii, tak v kombinaci.

    Avšak na základě úrovně virové zátěže nelze v žádném případě posoudit průběh a výsledek nemoci. Proto je tento ukazatel informativní pro ošetřujícího lékaře pouze v kombinaci s dalšími údaji - výsledky fibroscanningu a biopsie s mikroskopií jaterních buněk. Výpočet úrovně virové zátěže tedy v žádném případě nenahrazuje, ale pouze doplňuje stávající diagnostické metody používané v klinické praxi.

    Úroveň virové zátěže je nejspolehlivějším ukazatelem, který umožňuje spolehlivě potvrdit přítomnost viru u pacienta a kontrolovat jeho léčbu.


    Související Články Hepatitida