Kvalitativní analýza PCR pro hepatitidu C

Share Tweet Pin it

Hepatitida je závažné onemocnění, které má mnoho příčin vzniku. Jádrem jeho vývoje je přímé nebo nepřímé poškození jater. Vzhledem k jeho významu pro celý organismus lze jen odhadnout, jak špatná je patologie. V tomto článku budeme podrobněji diskutovat o charakteristikách kurzu a laboratorní diagnostice hepatitidy C.

Příčinou onemocnění je virové činidlo, které se týká patogenů obsahujících RNA. Má charakteristickou vlastnost - schopnost mutovat, tedy změnu struktury. Kvůli této infekci uniká napadení imunitního systému a ve většině případů vede k chronickému zánětu jater.

Vzhledem k existenci různých podtypů viru by měl být výběr léčiv proveden s přihlédnutím k výsledkům genotypizace. Přes dlouhou studii onemocnění a zvláštností struktury HCV nebylo možné vyvinout specifickou vakcínu proti této nemoci.

Potíže včasné diagnostiky jsou v asymptomatickém průběhu hepatitidy, což vede k tomu, že se osoba v průběhu cirhózy obrací na doktora. K detekci onemocnění včas je nutná pravidelná fyzická prohlídka. Pouze laboratorním vyšetřením krve lze identifikovat HCV a zabránit infekci ostatních. Skutečnost, že nosič infekce může po dlouhou dobu nevědět o patologii a nadále přenášet virus zdravým lidem.

Trasy přenosu

Virus se ve většině případů šíří krví, protože obsahuje největší koncentraci patogenních látek. Infekce se tak přenáší:

  • s hemodialýzou;
  • při pichání jehlou;
  • v průběhu boje, když je kůže zraněna a dochází k hemokontaktu;
  • s transfuzí krve (krevní transfúze).

Pravděpodobnost infekce důvěrnou intimitou je nevýznamná, protože sperma a vaginální výtok obsahují malý počet patogenů. Riziko infekce se významně zvyšuje, pokud je ohrožena celistvost sliznice genitálií. Toto je pozorováno u agresivního a análního sexu.

S ohledem na vertikální způsob přenosu infekce se provádí v procesu porodu. V období gestace nemůže patogen proniknout do embrya do placenty. Při přirozeném druhu se patogenní látka přenáší na dítě při traumatu na kůži, když je pozorován kontakt s matkou.

Po průniku patogenu do zdravého organismu začíná syntéza protilátek, což je ochrana před infekcí a patří do imunitní struktury. Jsou nalezeny během počáteční studie osoby pomocí ELISA.

K potvrzení diagnózy pacient podstoupí polymerázovou řetězovou reakci. Jedná se o analýzu identifikace genetického materiálu patogenního činidla a stanovení virové zátěže.

Laboratorní diagnostika hepatitidy C

Laboratorní diagnostika začíná enzymovým imunoanalýzou. Jeho hlavním úkolem je detekovat protilátky proti patogenu. Jeho účinnost je téměř 95%. Díky tomuto výzkumu v předklinickém stádiu je možné identifikovat nosič viru a odeslat ho k dalšímu vyšetření.

Kvalitativní analýza ELISA indikuje přítomnost nebo nepřítomnost imunoglobulinů v krvi pacienta. Jeho výsledek může být "pozitivní" nebo "negativní". Po obdržení prvního variantu odpovědi se osoba dostane k dalšímu vyšetření - PCR. Jeho cena závisí na kvalitě činidel a laboratoři. Náklady na polymerázovou řetězovou reakci mohou dosáhnout 4 000 rublů.

Vlastnosti PCR

Při polymerázové řetězové reakci umožňuje i malé množství biologického materiálu odhadnout virové zatížení v krvi, tj. Vypočítat koncentraci patogenů v jednom mililitru kapaliny.

S příchodem PCR byla diagnostika hepatitidy mnohem jednodušší. Analýza umožňuje identifikovat HCV RNA, stanovit stupeň infekčního procesu a infekčnost nosiče viru.

Existuje několik typů genetické diagnostiky:

  1. kvalitativní analýza PCR pro hepatitidu C - potvrzuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v krvi vyšetřovaného:
  2. kvantitativní, díky čemuž je možné vypočítat koncentraci virů a stanovit stupeň onemocnění. Výsledek je uveden v IU / ml nebo v kopii / ml (v závislosti na laboratoři);
  3. genotypizace je nezbytná k určení genotypu HCV. To je nutné pro přesný výběr léků, které budou v tomto případě nejúčinnější. Analýza nepřímo naznačuje závažnost patologického procesu v játrech. Takže u třetího genotypu patogenu se nejčastěji pozoruje steatóza, jehož vývojem je akumulace tuku v hepatocytech (jeho buňkách). Navíc typ viru ovlivňuje výsledek a trvání terapeutického kurzu.

Kvalitativní analýza PCR pro hepatitidu C

Prvním krokem v laboratoři je studium biologického materiálu pro přítomnost HCV RNA. Je důležité si uvědomit, že kvalitativní analýza hepatitidy C má určitou úroveň citlivosti, a proto nemůže vždy dát správnou odpověď. V tomto případě se doporučuje provést opakovanou laboratorní diagnostiku s použitím jiných činidel.

Pro získání spolehlivých výsledků by měl být použit testovací systém s citlivostí nejméně 50 IU / ml.

Výsledek diagnózy může být buď "pozitivní" nebo "negativní". Není-li patogen nalezen v krvi, studie končí. Pokud je ve vzorku detekována patogenní látka, provede se kvantitativní výpočet virové zátěže.

Falešně negativní odpověď vzniká v případě narušení technologického procesu, například aktivní složky, které utlačují stavbu kopií patogenu do životního prostředí. Není tedy možné zobrazit skutečný obraz krve, kvůli kterému není diagnostikována lidská infekce.

Falešně pozitivní výsledek může být získán, pokud byla zkumavka pro biologický materiál a prostředí pro studium kontaminovány. Kromě toho je taková analýzová odezva možná se smíšenou infekcí, jestliže játra jsou postižena několika viry, například hepatitidou C a D.

Indikace pro kvalitativní výzkum

Lékař může pacienta přiřadit kvalitní studii pro detekci RNA viru hepatitidy C:

  • při přijímání pozitivní nebo pochybné odpovědi enzymatického imunoanalýzy;
  • pro ověření diagnózy;
  • stanovení virové zátěže;
  • staging stádium choroby;
  • diagnostiku smíšené infekce. Často hepatitida C postihuje játra současně s virem "D";
  • stanovení terapeutické taktiky s přihlédnutím k genotypu patogenu;
  • hodnocení dynamiky změn na pozadí léčby antivirovými léky.

Výhody polymerázové řetězové reakce zahrnují:

  1. vysoká citlivost techniky, která umožňuje zjištění faktu infekce v předklinické fázi;
  2. identifikace genetického materiálu patogenu a ne protilátky proti němu;
  3. možnost založení podtypu patogenního činidla;
  4. vysokou rychlostí diagnostiky, protože není potřeba sešit na živné médium, ale stačí použít specifické zkušební systémy. Osoba obdrží výsledek po 5 hodinách;
  5. univerzálnost. Analýza umožňuje identifikovat libovolný genetický materiál (RNA, DNA). Z tohoto důvodu může lékař potvrdit hepatitidu C a jiné typy onemocnění (B);
  6. možnost detekce latentní infekce.

Kvantitativní výzkum

Při studiu krve polymerázovou řetězovou reakcí je možné vypočítat počet patogenů ve fixním objemu biologického materiálu. Indikátor je uveden v IU / ml. Vzhledem k analýze je možné stanovit stupeň infekčnosti pacienta, stanovit stupeň infekčního procesu a také zhodnotit účinnost farmakoterapie.

Na základě PCR se odborník rozhodne, které dávky léků mohou blokovat šíření patogenů. Dále je stanoveno trvání antivirové léčby a prognózy života. Je důležité si uvědomit, že testovací systémy jsou velmi citlivé, takže metoda umožňuje potvrdit lidskou infekci i v předklinické fázi.

Genotypizace

Vzhledem k tomu, schopnost patogenu mutovat, s cílem určit strategii léčby a výběr antivirotik vyžaduje jeho genotyp. Například léčba hepatitidy HCV 1 trvá 48 týdnů, pozitivní trend pozorovaný pouze v 60% případů. Genotypy 2 a 3 mají příznivější prognózu. Antivirotika jsou předepsána po dobu 8 měsíců a jejich účinnost dosahuje 85%.

Podle statistických údajů jsou HCV 1, 2 a 3 ve většině případů registrovány na území Ruské federace.

Při dešifrování laboratorní studie lze takovou odpověď uvést - "nepsanou". To znamená, že virus cirkuluje v oběhovém systému pacienta, který testovací systém nemůže rozpoznat. Výsledek analýzy v tomto případě naznačuje infekci osoby atypické pro danou geografickou oblast příčinného činitele.

Jak získat spolehlivé výsledky?

Pro kvalitativní výzkum PCR při detekci RNA příčinného původu hepatitidy C prokázaly správné výsledky, je nutné splnit požadavky na přípravu na laboratorní diagnostiku:

  1. odebírání vzorků krve je prováděno na prázdném žaludku a "hladová" mezera by neměla být kratší než 8 hodin;
  2. dva dny před zahájením studie se doporučuje přestat pít alkohol a odmítat ostré, mastné a uzené pokrmy;
  3. zrušit zavedení léků, které snižují srážení krve, jako je heparin. Pokud jsou tyto léky předepsány z důvodů života, měli byste o tom informovat lékaře. Kromě toho by měl odborník vědět o přijetí jiných léků, které mohou ovlivnit výsledek laboratorního testu;
  4. V předvečer sbírky biologického materiálu by neměly být prováděny fyzioterapeutické postupy a vystaveny těžké fyzické námaze.

Výsledky analýzy mohou ovlivnit nejen osoba, která daruje krev, ale i další faktory, a to:

  • špatná krev;
  • nedodržení doporučení pro přepravu biologického materiálu;
  • nedostatečná odborná příprava pracovníků laboratoře;
  • nedodržování výzkumných postupů;
  • zavedení antikoagulancií (heparinu) v předvečer odběru vzorků krve. Tato skupina léků snižuje koagulaci, čímž zpomaluje práci činidel.

V různých laboratořích může být diagnostická odpověď mírně odlišná, ale tyto chyby neovlivňují konečný výsledek studie.

Zvláštní pozornost je věnována typům zkušebních systémů používaných v laboratoři. Často se dává přednost reaktantem s vysokou citlivostí. To je důležité pro pacienty s nízkým virovým zatížením, protože je obtížné zjistit.

Jak často probíhá laboratorní test?

Primárně se polymerázová řetězová reakce provádí u lidí, kteří byli testováni na protilátky proti viru hepatitidy v imunotestu. V tomto případě je určen k potvrzení infekce osoby a ke stanovení fáze onemocnění. Analýza navíc umožňuje určit podtyp viru, který je obzvláště důležitý pro výběr léků.

Další období povinného laboratorního testování je 3 měsíce od začátku antivirové léčby. Diagnostika poskytuje možnost zhodnotit účinnost léků, upravit dávku nebo je nahradit.

Kromě základních analýz může být PCR provedena dodatečně ve 4 a 24 týdnech od zahájení léčby. Pozitivní prognóza onemocnění je potvrzena snížením virové zátěže po třech měsících léčby. Například by se měla snížit z 1 milionu IU / ml na několik set tisíc.

Pokud koncentrace patogenních látek v krvi zůstává na stejné úrovni nebo se mírně zvyšuje, znamená to neúčinnost antivirových látek a vyžaduje jejich náhradu. Pomocí PCR na konci léčby je možné potvrdit oživení pacienta.

Pro správnou interpretaci výsledků laboratorní diagnózy je nutná konzultace s odborníkem na hepatologii nebo specialisty na infekční onemocnění. Vzhledem k vysokému výskytu falešných odpovědí na test ELISA se analýza používá výhradně pro primární screening. Pro důkladnější vyšetření pacienta se používá polymerázová řetězová reakce.

Stále si myslíte, že je těžké vyléčit hepatitidu C?

Soudě podle skutečnosti, že nyní čtete tyto řádky - vítězství v boji proti onemocnění jater není na vaší straně. A už jste přemýšleli o terapii interferonem? Je to pochopitelné, protože hepatitida C je velmi vážnou chorobou, protože správné fungování jater je zárukou zdraví a pohody. Nevolnost a zvracení, nažloutlý nebo šedivý tón pleti, hořkost v ústech, ztmavnutí moči a průjem. Všechny tyto příznaky nejsou známy.

Ale možná je správnější zacházet nikoliv důsledkem, ale důvodem? Pro léčbu doporučujeme používat moderní ruské léky - sophosbuvir a daklatasvir. Přečtěte si více >>

Markery hepatitidy C a interpretace výsledků kvantitativní analýzy HCV RNA

Nedávno ve vyhledávačích internetových zdrojů se stále častěji objevuje dotaz "kvantitativní analýza pro hepatitidu s dekódováním".

Vírus hepatitidy je běžný a nebezpečný, onemocnění postihuje játra. Jeho jméno pochází z lat. hepatitida - zánět jater. Infekce se vyskytuje v krvi nebo sexuálním kontaktem, u dospělých je častěji nemocná ve věku od 25 do 50 let.

Existuje několik typů této nemoci. Hepatitida C nemá výrazný výraz, ale ve 40-70% případů přechází do chronické formy, může způsobit cirhózu jater a rakovinu. Toto onemocnění vyžaduje přesnou diagnózu a interpretaci získaných dat, pro které jsou metody vyvinuty. Jednou je RNA analýza HCV RNA pomocí PCR.

RNA analýza HCV RNA pomocí PCR

RNA (ribonukleová kyselina) je druh makromolekuly, jedna ze složek živé buňky. RNA je zodpovědná za kódování genetické informace. Virus hepatitidy C obsahuje molekulu RNA a je ve zvyku mutovat. Existuje šest jeho podtypů, stejně jako mnoho podtypů.

Onemocnění ve své chronické fázi vede k fibróze jater - růst pojivových tkání, struktura orgánu je postupně narušena. Fibróza je vhodná pro včasnou léčbu, protože játra ještě neprocházela ničivými procesy. Na rozdíl od cirhózy je těžké nevratné onemocnění jater, při kterém se fibróza může vyvinout bez přijetí nezbytných opatření včas.

Osoba s podezřením na přítomnost viru hepatitidy určuje protilátky proti němu. Pokud nejsou přítomny - choroba je vyloučena, v jejich přítomnosti se uchýlí k metodě PTSR (polimeraznoj řetězová reakce). V molekulární biologii je experimentální, ale zaujímá vedoucí místo mezi metodami diagnostiky infekčních onemocnění. Díky tomu lze výrazně zvýšit koncentraci fragmentů molekul ve vzorku. 10 dnů po infekci je již v krvi možné detekovat RNA.

Tato metoda je jediná, která umožňuje identifikaci onemocnění v počátečních stádiích. Jinými způsoby (např. Biochemickým vyšetřením krve) se to nedá provést, jelikož játra ještě nejsou ovlivněna.

Metoda byla objevena v roce 1993 biochemistou Carrie Mullisovou, za kterou získal Nobelovu cenu. PCR byl průlom v medicíně a vědě, neboť umožnil rychlou a přesnou identifikaci infekcí v krvi a dalších biologických materiálech člověka. Jinými slovy tato metoda urychlila vývoj diagnózy infekčních onemocnění.

RNA analýza HCV RNA pomocí PCR je účinná z následujících důvodů:

  • Má dobrou citlivost - je detekováno i malé množství viru v krvi;
  • je určen samotný virus, a nikoli jeho vedlejší produkty;
  • je určen typ patogenu.

Rozdíly v kvantitativní analýze HCV RNA z kvalitativní

Metoda PCR zahrnuje dvě základní metody pro studium biologického materiálu pro vyhledávání viru hepatitidy C:

Tyto studie mají různé úkoly.

Kvalitativní analýza hepatitidy s dekódováním potvrzuje přítomnost viru poté, co byly v krvi již nalezeny protilátky proti onemocnění. Pokud studie dosáhla pozitivního výsledku, pak byla nemoc nalezena. Jinými slovy, člověk je infikován. Pokud se dosáhne negativního výsledku, znamená to, že osoba není infikována nebo je virus příliš malý. Tato koncentrace není tímto způsobem zjištěna.

Kromě toho je klinický obraz onemocnění založen na markerech hepatitidy C a interpretaci analýzy. Hlavní markery jsou imunoglobuliny (protilátky) M a G. Jejich přítomnost v krvi pacienta naznačuje netypický proces pro zdravý organismus. Na základě přítomnosti těchto protilátek je pacient obvykle diagnostikován s primární diagnózou.

Kvantitativní analýza je předepsána pro počáteční detekci protilátek a v případě potřeby k léčbě.

Také kvantitativní analýza hepatitidy C je předepsána pro detekci smíšené hepatitidy (infekce několika viry).

Kvantitativní analýza s dekódováním se provádí za účelem:

  • objasnění konečné diagnózy;
  • sladění prognóz ohledně průběhu onemocnění a jeho léčení - prodloužení, snížení léčby nebo změny taktiky;
  • sledování léčby.

Abyste zajistili, že výsledky jsou správné, musíte dodržet předepsaný režim dříve, než jste darovali krev:

  • přijít do laboratoře na prázdný žaludek, naposledy si můžete vzít jídlo 8 hodin před postupem;
  • dva dny před studiem jsou zakázány alkohol, mastné a smažené potraviny;
  • ultrazvuk, masáž, fyzioterapie před provedením studie;
  • za den je přijímání léků zakázáno, pokud nelze přijímání jednotlivých léků zrušit, to je hlášeno před odběrem krve;
  • před zahájením léčby se doporučuje co nejvíce snížit fyzické a nervové zatížení.

Splnění těchto požadavků bude klíčem k získání správných výsledků kvantitativní analýzy hepatitidy C.

Dekódování kvantitativní analýzy

Po obdržení indikátorů kvantitativní analýzy je nezbytné dešifrovat výsledky testů na hepatitidu C. Výsledky jsou vypočteny jak v jednotkách ME / ml, tak v kopiích na ml. Chcete-li získat výsledky popsané v kopii, použijte několik metod.

  • Monitor HCV (konverzní faktor na ME - 2,7);
  • LCX HCV RNA (konverzní faktor pro ME je 3,8).

Tabulka. Dekódování kvantitativní analýzy HCV RNA pomocí PCR.

Co je RNA viru hepatitidy C?

Studie RNA viru hepatitidy C je nejdůležitějším postupem, který umožňuje stanovit trvání a metody léčby pacientů s velkou přesností. Diagnostika onemocnění se skládá z několika různých krevních testů, jako jsou:

  • markery hepatitidy C (anti-HCV);
  • detekci RNA viru hepatitidy C (HCV RNA).

První studie se provádí s prvním podezřením na hepatitidu. Druhá možnost je nejdůležitější v léčbě HCV RNA, proto ji zvažte podrobněji.

Co je virovou hepatitidou C?

Virová hepatitida C nebo HCV je infekční onemocnění, které postihuje játra. Infekce virem probíhá v krvi. Můžete se infikovat transfuzí krve, když nejsou dodržována pravidla pro sterilizaci lékařských nástrojů. Existuje méně případů, kdy je onemocnění dosaženo sexuálně nebo od těhotné matky k plodu. Hepatitida C má 2 typy.

Chronická hepatitida C je nejnebezpečnější. Je to forma nemoci, která může trvat celý život. To vede k závažným problémům ve fungování jater, jako je cirhóza nebo rakovina. U 70-90% infikovaných lidí se choroba dostává do chronické fáze.

Nejdůležitějším nebezpečím hepatitidy C je to, že probíhá tajně, bez ikterických příznaků. V tomto případě se nejčastěji stěžují na horečku, nevolnost a zvracení, fyzickou slabost, zvýšenou únavu, ztrátu chuti k jídlu a váhu. V tomto případě dochází na malém zhutnění jaterních tkání k jeho maligní degeneraci. Z tohoto důvodu se virusová hepatitida C často nazývá "časová bomba" nebo "láskyplný zabiják".

Další zvláštnost onemocnění spočívá v jeho velmi pomalém vývoji, odhadovaný za desítky let.

Infikovaní zpravidla necítí žádné příznaky a nepochybují o jejich skutečném stavu. Často může být onemocnění identifikováno pouze tehdy, když se k lékaři odkazuje na jiný problém.

Riziková skupina zahrnuje:

  • děti, které dostaly od matek virus viru hepatitidy C;
  • drogově závislí;
  • lidé, kteří propíchnuli části těla nebo vyrobili tetování nesterilními nástroji;
  • dárcovská krev nebo orgány (do roku 1992, kdy nebyla provedena hemodialýza);
  • lidé infikovaní HIV;
  • Zdravotní pracovníci v kontaktu s infikovanými pacienty.

Stanovení hepatitidy C RNA

Stanovení RNA viru hepatitidy C, také nazývaný hepatitidy C PCR této studie biologického materiálu (krev), se kterou lze identifikovat v těle okamžité dostupnosti genomateriala viru hepatitidy B (nějaký daný virus je jediná částice RNA).

Hlavní testovací metodou je PCR nebo metoda polymerázové řetězové reakce.

Existují dva typy krevních testů pro stanovení HCV RNA:

Test kvality

Provedení kvalitativní analýzy umožňuje zjistit, zda je virus v krvi. Všichni pacienti, kteří mají protilátky proti C-hepatitidě, by se měli podrobit tomuto testu. Pomocí jeho výsledků získáte 2 odpovědi: "přítomný" nebo "chybějící" virus. Na výsledku pozitivního testu (zjištěného) je možné posoudit aktivní množení viru, který infikuje zdravé buňky v játrech.

Test provedený pro vysoce kvalitní PCR je naladěn na specifickou citlivost od 10 do 500 IU / ml. Pokud je virus v hepatitidě nalezen v krvi se specifickým obsahem méně než 10 IU / ml, pak může být detekce viru nemožná. Velmi nízká hodnota specifického obsahu viru je pozorována u pacientů, pro které je předepisována antivirová léčba. Proto je důležité, aby citlivost zdravotnického systému byla vysoká pro diagnostiku a stanovení kvalitativního výsledku polymerázové řetězové reakce.

Často se polymerázová řetězová reakce C-hepatitidy provádí okamžitě po nalezení odpovídajících protilátek. Následné testy, kdy prochází antivirová léčba, probíhají ve 4., 12. a 24. týdnu. Další analýza po ukončení PVT se provádí po 24 týdnech. Pak - jednou za rok.

Kvantitativní test

Kvantitativní analýza PCR RNA, někdy označovaná jako virové zátěž, určuje koncentraci (specifický obsah) viru v krvi. Jinými slovy, virální zátěž je definována jako určité množství virové RNA, která může být v určitém množství krve (obvyklé je použít 1 ml v kosti). Jednotky pro výsledky testů jsou mezinárodní (standardní) jednotky, dělené o jeden mililitr (IU / ml). Obsah viru někdy vypadá jinak, záleží na laboratořích, kde se provádí výzkum. U hepatitidy C kvantifikace někdy používá hodnoty, jako jsou kopie / ml.

Je třeba si uvědomit, že neexistuje žádná specifická závislost na závažnosti C-hepatitidy na koncentraci tohoto kmene v krvi.

Kontrola "virové zátěže" vám umožňuje určit stupeň infekčnosti onemocnění. Takže riziko smrti virem jiné osoby se zvyšuje s nárůstem koncentrace hepatitidy v krvi. Kromě toho vysoký obsah viru snižuje účinek léčby. Malá virovou zátěž je proto velmi příznivým faktorem pro úspěšnou léčbu.

Kromě toho test hepatitidy C a jeho stanovení pomocí PCR hrají velkou roli v aplikaci terapie proti onemocnění a určení úspěšnosti léčby. Na základě výsledků testů je plánován rehabilitační kurz. Například při příliš nízkém poklesu specifické koncentrace viru hepatitidy se protinádorová léčba prodlužuje a naopak.

V moderním lékařství se předpokládá, že zátěž je vyšší než 800000 ME / ml je vysoká. Zatížení nad 10000000 ME / ml je považováno za kritické. Odborníci z různých zemí a dodnes neměli stejný názor na limity virové zátěže.

Četnost kvantitativního testu

Kvantitativní analýza hepatitidy se obecně provádí před antivirovou terapií a 3 měsíce po skončení léčby, aby se zjistila kvalita léčby.

Výsledkem kvantitativního testu bude kvantitativní vyhodnocení výsledků výše uvedeného vzorku. V důsledku toho nebude vynesen verdikt "pod měřeným rozmezím" nebo "v krvi nebude zjištěn".

Parametr citlivosti kvalitativního testu je obvykle nižší než citlivost kvantitativní analýzy. Chybějící přepis naznačuje, že oba typy analýz nenalezly RNA viru. Při testu "pod měřeným rozmezím" kvantitativní analýza pravděpodobně nenalezla hepatitidovou RNA, ačkoli to potvrzuje přítomnost viru s velmi malým specifickým obsahem.

Hepatitida C a její genotypy

Genotypizace viru hepatitidy C RNA diagnostikovat přítomnost různých genetických typů hepatitida C. Věda nezná více než 10 typů v genomu viru, ale i pro lékařskou praxi dostatečně rozlišit několik genotypů, které mají největší podíl na oblasti. Určení genetického typu hraje klíčovou roli při volbě časového rozvrhu léčby, což je velmi důležité, pokud se vezme v úvahu široká škála vedlejších účinků léků proti hepatitidě.

Metody léčby virové hepatitidy C

Jediným efektivním způsobem léčby viru hepatitidy je zpravidla kombinace dvou léků: interferonu-alfa spolu s ribavirinem. Odděleně tyto léky nejsou tak účinné. Doporučená dávka léků a načasování aplikace by měla být předepsána pouze lékařem a individuálně pro každého pacienta. Léčba těmito léky může trvat 6 až 12 měsíců.

Dnešní drogy nebyly vynalezeny, což zaručuje 100% zotavení z viru. Při správně zvolené léčbě může léčba pacientů dosáhnout až 90% počtu případů.

Medinfo.club

Portál o játrech

Kvantitativní analýza HCV a její interpretace

Hepatitida C je onemocnění, které se může reprodukovat ve zdravých jaterních buňkách a vyvolat proliferační nemoci. V moderním světě, kdy virus hepatitidy prošel určitou mutací, je ohrožen lidský imunitní systém ve srovnání s infekcí, je zanedbatelný. Je také třeba poznamenat, že ne všichni pacienti budou mít první známky onemocnění, a to zejména v raných stádiích.

RNA analýza viru hepatitidy C je kvantitativní studie, jejíž normou je mírné množství přítomnosti virových buněk v krvi pacienta. Podle statistik je asi 31% pacientů zcela vyléčeno z této nemoci, pokud je v počáteční fázi.

Lékaři v lékařské praxi konstatují, že 4 miliony infikovaných symptomů a prvních příznaků se vůbec neobjevují, přestože zanedbatelná forma hepatitidy může vést k cirhóze jater nebo rakoviny.

V současné době se v průběhu "krevní transfúze" vyšetří tato krev na přítomnost viru hepatitidy C, protože toto onemocnění se přenáší krví dárce.

K dnešnímu dni svět již vyvinul drogy z hepatitidy C s účinností téměř 100%. Moderní farmaceutický průmysl vytvořil léky, které prakticky nemají žádné vedlejší účinky. Mnozí pacienti dostanou první výsledky ve formě zmírnění symptomů a snížení virální zátěže po týdnu užívání. Přečtěte si více o přípravcích z hepatitidy z indické výroby v našem samostatném článku.

Na trhu společností pro přepravu indické medicíny pro hepatitidu C "Sofosbuvir Express" se osvědčil. Tato společnost úspěšně pomáhá lidem se zotavit z onemocnění více než 2 roky. Komentáře a videa spokojených pacientů naleznete zde. Představují více než 4 000 lidí, kteří se zotavili kvůli zakoupeným lékům. Nedělejte své zdraví v dlouhém boxu, navštivte www.sofosbuvir-express.com nebo zavolejte na číslo 8-800-200-59-21

Druhy studií PCR

PCR (polymerázová řetězová reakce) je nejmodernější a nejúčinnější metodou pro studium genu viru a jeho schopností. Tato diagnostika může vyvolat různé nemoci a určit její další mutaci v těle pacienta.

Analýza se provádí odebráním krve, která se potom umístí do speciálních činidel, ve kterých dochází k klonování buněk.

Dvě buňky se vyrábějí z jedné buňky a tak dále. V důsledku toho se objevují stovky DNA, díky nimž je možné diagnostikovat patogen a identifikovat virus v počáteční fázi.

Proto je PCR rozdělena do několika typů:

  • kvalitativní analýza - rozpoznává geny infekce v krvi. Pokud je pacient potvrzen pro kvalitativní analýzu, měla by být provedena kvantitativní analýza k určení stupně infekce. V důsledku této diagnostiky odborníci píšou "zjištěné / neidentifikované". "Zjistil" - označuje, že onemocnění je přítomno v těle a jeho RNA je již zjištěna. "Nezjištěno" znamená, že ve vzorku není žádný gen viru, tj. Neexistuje hepatitida RNA. Lékaři nicméně doporučují provést druhou studii po 10 dnech.
  • kvantitativní analýza - určuje množství genetického materiálu infekce v krvi. Tato diagnostika pomáhá stanovit závažnost onemocnění a celou klinickou anamnézu. V důsledku takové analýzy lze zapsat pouze "Pozitivní / Negativní / Neplatný". "Pozitivní" - zobrazuje infekční zatížení. Lékaři používají tuto metodu diagnostiky onemocnění k určení účinnosti léčby ve 4, 12, 16 a 24 týdnech onemocnění. Pokud je skóre viru v rozmezí 8x10t IU / ml, pak je léčba účinná, pokud jsou indikátory vyšší, pak ne. "Negativní" - nebyl nalezen gen infekce. "Neplatná" - stane se to, pokud je gen viru nalezen v kvalitě, ale není kvantitativní analýzou odhalen. Existuje podobná jestliže je infekce pod úrovní.

Rozdíly v kvalitativních a kvantitativních analýzách

Virus hepatitidy C - je diagnostikován především kvantitativní analýzou, jejíž dekódování je nezbytné pro správnou interpretaci onemocnění. Ale přes to, že kvalitativní a kvantitativní metoda diagnostiky mají své odlišnosti, jako je role a úkolů k výzkumu - kvalitativní - potvrdí přítomnost infekce po objevení viru protilátek a kvantitativní - sekundární způsob vyvrátit nebo potvrzení onemocnění, aby správné a pouze diagnózu.

Vysvětlení kvantitativního výzkumu

Po diagnóze mohou výsledek interpretovat pouze lékaři, protože by se neměli uvádět v číslech, ale slovy. Podle statistik je kvantitativní PCR nejcitlivější analýzou. Za účelem zjištění, zda je přítomna v těle virus, je nutné pochopit a vědět, že kvantitativní analýza pro hepatitidu C, je dešifrován pomocí digitálního značení (standard) infekce:

Phk hcv kvalitě, co to je

Hepatitida A a hepatitida C společně
Myhep sophosbuvir daklutasvir

Co je RNA viru hepatitidy C?

Studie RNA viru hepatitidy C je nejdůležitějším postupem, který umožňuje stanovit trvání a metody léčby pacientů s velkou přesností. Diagnostika onemocnění se skládá z několika různých krevních testů, jako jsou:

  • markery hepatitidy C (anti-HCV),
  • detekci RNA viru hepatitidy C (HCV RNA).

První studie se provádí s prvním podezřením na hepatitidu. Druhá možnost je nejdůležitější v léčbě HCV RNA, proto ji zvažte podrobněji.

Co je virovou hepatitidou C?

Virová hepatitida C nebo HCV je infekční onemocnění, které postihuje játra. Infekce virem probíhá v krvi. Můžete se infikovat transfuzí krve, když nejsou dodržována pravidla pro sterilizaci lékařských nástrojů. Existuje méně případů, kdy je onemocnění dosaženo sexuálně nebo od těhotné matky k plodu. Hepatitida C má 2 typy.

Chronická hepatitida C je nejnebezpečnější. Je to forma nemoci, která může trvat celý život. To vede k závažným problémům ve fungování jater, jako je cirhóza nebo rakovina. U 70-90% infikovaných lidí se choroba dostává do chronické fáze.

Nejdůležitějším nebezpečím hepatitidy C je to, že probíhá tajně, bez ikterických příznaků. V tomto případě se nejčastěji stěžují na horečku, nevolnost a zvracení, fyzickou slabost, zvýšenou únavu, ztrátu chuti k jídlu a váhu. V tomto případě dochází na malém zhutnění jaterních tkání k jeho maligní degeneraci. Z tohoto důvodu se virusová hepatitida C často nazývá "časová bomba" nebo "láskyplný zabiják".

Další zvláštnost onemocnění spočívá v jeho velmi pomalém vývoji, odhadovaný za desítky let.

Infikovaní zpravidla necítí žádné příznaky a nepochybují o jejich skutečném stavu. Často může být onemocnění identifikováno pouze tehdy, když se k lékaři odkazuje na jiný problém.

Riziková skupina zahrnuje:

  • děti, které dostaly virus z hepatitidy C od matek,
  • závislých,
  • lidé, kteří propíchnuli části těla nebo vyrobili tetování nesterilními nástroji,
  • dárcovská krev nebo orgány (do roku 1992, kdy nebyla provedena hemodialýza),
  • lidé infikovaní HIV,
  • Zdravotní pracovníci v kontaktu s infikovanými pacienty.

Stanovení hepatitidy C RNA

Stanovení RNA viru hepatitidy C, také nazývaný hepatitidy C PCR této studie biologického materiálu (krev), se kterou lze identifikovat v těle okamžité dostupnosti genomateriala viru hepatitidy B (nějaký daný virus je jediná částice RNA).

Hlavní zkušební metoda # 8229, PCR nebo polymerázové řetězové reakční metody.

Existují dva typy krevních testů pro stanovení HCV RNA:

Test kvality

Provedení kvalitativní analýzy umožňuje zjistit, zda je virus v krvi. Všichni pacienti, kteří mají protilátky proti C-hepatitidě, by se měli podrobit tomuto testu. Pomocí jeho výsledků získáte 2 odpovědi: "přítomný" nebo "chybějící" virus. Na výsledku pozitivního testu (zjištěného) je možné posoudit aktivní množení viru, který infikuje zdravé buňky v játrech.

Test provedený pro vysoce kvalitní PCR je naladěn na specifickou citlivost od 10 do 500 IU / ml. Pokud je virus v hepatitidě nalezen v krvi se specifickým obsahem méně než 10 IU / ml, pak může být detekce viru nemožná. Velmi nízká hodnota specifického obsahu viru je pozorována u pacientů, pro které je předepisována antivirová léčba. Proto je důležité, aby citlivost zdravotnického systému byla vysoká pro diagnostiku a stanovení kvalitativního výsledku polymerázové řetězové reakce.

Často se polymerázová řetězová reakce C-hepatitidy provádí okamžitě po nalezení odpovídajících protilátek. Následné testy, kdy prochází antivirová léčba, se provádějí ve 4., 29. a 24. týdnu. Další analýza po ukončení PVT se provádí po 24 týdnech. Poté, # 8229, jednou za rok.

Kvantitativní test

Kvantitativní analýza PCR RNA, někdy označovaná jako virové zátěž, určuje koncentraci (specifický obsah) viru v krvi. Jinými slovy, virální zátěž je definována jako určité množství virové RNA, která může být v určitém množství krve (obvyklé je použít 1 ml v kosti). Jednotky pro výsledky testů # 8229, mezinárodní (standardní) jednotky, dělené jedním mililitrem (IU / ml). Obsah viru někdy vypadá jinak, záleží na laboratořích, kde se provádí výzkum. U hepatitidy C kvantifikace někdy používá hodnoty, jako jsou kopie / ml.

Je třeba si uvědomit, že neexistuje žádná specifická závislost na závažnosti C-hepatitidy na koncentraci tohoto kmene v krvi.

Kontrola # 171, virové zátěž # 187, umožňuje určit míru infekčnosti onemocnění. Takže riziko smrti virem jiné osoby se zvyšuje s nárůstem koncentrace hepatitidy v krvi. Kromě toho vysoký obsah viru snižuje účinek léčby. Malá virovou zátěž je proto velmi příznivým faktorem pro úspěšnou léčbu.

Kromě toho test hepatitidy C a jeho stanovení pomocí PCR hrají velkou roli v aplikaci terapie proti onemocnění a určení úspěšnosti léčby. Na základě výsledků testů je plánován rehabilitační kurz. Například při příliš nízkém poklesu specifické koncentrace viru hepatitidy se protinádorová léčba prodlužuje a naopak.

V moderní medicíně se předpokládá, že zátěž je vyšší než 8 (800) 511 36 18 ME / mL je vysoká. Zátěž nad 8 (800) 511 36 18 ME / ml je považována za kritickou. Odborníci z různých zemí a dodnes neměli stejný názor na limity virové zátěže.

Četnost kvantitativního testu

Kvantitativní analýza hepatitidy se obecně provádí před antivirovou terapií a 3 měsíce po skončení léčby, aby se zjistila kvalita léčby.

Výsledkem kvantitativního testu bude kvantitativní vyhodnocení výsledků výše uvedeného vzorku. V důsledku toho nebude vynesen verdikt "pod měřeným rozmezím" nebo "v krvi nebude zjištěn".

Parametr citlivosti kvalitativního testu je obvykle nižší než citlivost kvantitativní analýzy. Chybějící přepis naznačuje, že oba typy analýz nenalezly RNA viru. Při testu "pod měřeným rozmezím" kvantitativní analýza pravděpodobně nenalezla hepatitidovou RNA, ačkoli to potvrzuje přítomnost viru s velmi malým specifickým obsahem.

Hepatitida C a její genotypy

Genotypizace viru hepatitidy C RNA diagnostikovat přítomnost různých genetických typů hepatitida C. Věda nezná více než 10 typů v genomu viru, ale i pro lékařskou praxi dostatečně rozlišit několik genotypů, které mají největší podíl na oblasti. Určení genetického typu hraje klíčovou roli při volbě časového rozvrhu léčby, což je velmi důležité, pokud se vezme v úvahu široká škála vedlejších účinků léků proti hepatitidě.

Metody léčby virové hepatitidy C

Jediným efektivním způsobem léčby viru hepatitidy je zpravidla kombinace dvou léků: interferonu-alfa spolu s ribavirinem. Odděleně tyto léky nejsou tak účinné. Doporučená dávka léků a načasování aplikace by měla být předepsána pouze lékařem a individuálně pro každého pacienta. Léčba těmito léky může trvat 6 až 29 měsíců.

Dnešní drogy nebyly vynalezeny, což zaručuje 100% zotavení z viru. Při správně zvolené léčbě může léčba pacientů dosáhnout až 90% počtu případů.

HCV, RNA kvantitativně [PCR v reálném čase]

Studie k identifikaci původce hepatitidy C (HCV), v němž metodou real-time polymerázové řetězové reakce (RT-PCR) je určena přítomností genetického materiálu (RNA) viru a jeho objemu (virová zátěž) ve vzorku krve.

HCV RNA může být detekována v koncentraci pod dolní hranicí lineárního rozsahu koncentrací. Rozsah lineárních koncentrací je rozsah, v němž lze přesně vypočítat počet kopií patogenu. Pro tuto analýzu je lineární rozsah koncentrací HCV DNA stanovený detekčním zesilovačem 7,5 x 10 2 - 1,0 × 10 8 kopií / ml vzorku.

Ruské synonymy

Virus hepatitidy C (HCV), kvantitativní stanovení RNA.

Synonyma Anglicky

RNA virové hepatitidy C, kvantitativní, PCR v reálném čase, krve, HCV virová zátěž, RNA virové hepatitidy C Quant.

Metoda výzkumu

Polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí v reálném čase.

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Nekuřte po dobu 30 minut před dávkováním krve.

Obecné informace o studii

Virus hepatitidy C (HCV) je virus obsahující RNA z rodiny Flaviviridae, který postihuje játra. Je schopen množit se v krevních buňkách (neutrofily, monocyty a makrofágy, lymfocyty B) a indukují kryoglobulinemii, Sjogrenův nemoc, a B buněk lymfoproliferativní onemocnění. HCV je díky vysoké mutační aktivitě schopen vyhnout se účinkům ochranných mechanismů imunitního systému. Existuje 6 genotypů a mnoho subtypů viru, které mají různé hodnoty pro prognózu vývoje onemocnění a účinnost antivirové terapie.

Hlavní cestou přenosu - prostřednictvím krve (léky na krvinky a plazmu, dárcovských orgánů, non-sterilní stříkačky a jehly pro tetování nástroje, piercing). Pravděpodobně infekce během sexuálního styku a dítě od matky během porodu, ale to se děje zřídka.

Akutní virová hepatitida je zpravidla charakterizována asymptomatickým průběhem a ve většině případů zůstává nediagnostikovaná. Pouze 15% infikovaných lidí má akutní onemocnění - s nevolností, bolesti těla, nedostatkem chuti k jídlu a ztrátou hmotnosti (zřídka se doprovází žloutenka). V 60-85% nakažených vyvine chronická infekce, která je 15 krát vyšší, než je frekvence chronické hepatitidy B. chronická hepatitida C, dochází ke zvýšení jaterních enzymů a špatné manifestace symptomů. U 20-30% pacientů vede onemocnění k cirhóze jater, což zvyšuje riziko jaterní insuficience a hepatocelulárního karcinomu.

Detekce HCV RNA indikuje proliferaci viru v těle a je metodou diagnostiky onemocnění. Genetický materiál viru mohou být detekovány pomocí PCR v 10-12 dní po infekci - v tomto období, specifické protilátky, které jsou vyráběny v několika měsíců po infekci, a ne jaterní funkce jsou v rámci referenčního rozsahu.

PCR je detekována virovou RNA kvalitativně nebo kvantitativně. Kvůli kvalitativní metodě se potvrzuje přítomnost viru hepatitidy C a jeho aktivní reprodukce. Kvantitativní stanovení virové zátěže s přihlédnutím k genotypu HCV umožňuje kontrolu současné léčby a předvídání průběhu onemocnění.

Účinnost léčby se odhaduje množstvím RNA před a během léčby. Obvykle se v prvních třech měsících úspěšné léčby sníží virální zátěž krve několikrát. Při účinné terapii dochází v prvních 4-12 týdnech léčby ke snížení počtu virů o dva řády a po ukončení léčby se genetický materiál viru v krvi nezjistí. Absence poklesu viremie po 12 týdnech od začátku léčby naznačuje její neúčinnost. Doporučuje se provést analýzu před začátkem léčby ve 4., 12. a 24. týdnu léčby a 24 týdnů po skončení kurzu. Trvání léčby a frekvence kvantitativního stanovení RNA viru hepatitidy C závisí na genotypu viru a stupni poškození jater.

Na co se používá výzkum?

  • Potvrďte diagnózu "virové hepatitidy C".
  • Předpovědět průběh virové hepatitidy C.
  • Sledovat antivirovou terapii a řešit problém dalších léčebných taktik.

Kdy je přiřazena studie?

  • S kvalitní detekcí RNA viru hepatitidy C.
  • Při akutní a chronické virové hepatitidě C.
  • Se smíšenou hepatitidou.
  • Při plánování, během a po ukončení antivirové léčby.

Co znamenají výsledky?

  • Nenalezeno - RNA viru hepatitidy C nebyla detekována nebo hodnota je pod limitem citlivosti metody (200 kopií / ml = 400 IU / ml).
  • kopií / ml (IU / ml) - byla zjištěna RNA viru hepatitidy C. Nízkou viremii (nejpříznivější prognóza průběhu onemocnění a účinnost terapie).
  • > 2 * 10 ^ 6 kopií / ml (> 4 x 10 ^ 6 IU / ml) - RNA viru hepatitidy C byla detekována. Vysoká viremie.
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kopií / ml (> 2 x 10 ^ 8 IU / ml) - RNA viru hepatitidy C byla detekována v koncentracích nad lineární koncentrační rozmezí.

Lineární rozsah koncentrace HCV RNA C určené detekci termocykleru, 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kopií / ml (1,5 x 3-2 10. x 10 8 IU / ml).

Co může ovlivnit výsledek?

Nespolehlivý výsledek je možné získat pomocí:

  • kontaminace biomateriálu;
  • přítomnost ve vzorku inhibitorů - chemických a proteinových látek ovlivňujících různé složky PCR;
  • přítomnost heparinu v krvi.

Důležité poznámky

  • Úroveň virové zátěže v krvi neukazuje stupeň poškození jater a závažnost onemocnění. Pro jejich vyhodnocení je nutné vyšetřit biochemické indikátory a biopsie.
  • Při plánování léčby je velmi důležité určit genotyp viru hepatitidy C.

Doporučuje se také

Kdo jmenuje studii?

Literatura

  • Vozianova Zh.I. Infekční a parazitické nemoci: ve 3 t. - K.: Zdraví, 2000. - T.1.: 600-690.
  • Kishkun AA Imunologické a sérologické studie v klinické praxi. - M.: MIA LLC, 2006. - 471-476 str.
  • Harrisonovy principy vnitřního lékařství. 16. vyd. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F a další. In vivo tropismus genomických sekvencí viru hepatitidy C v hematopoetických buňkách: vliv virové zátěže, virového genotypu a buněčného fenotypu. Krev. 1998 15. května 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Typy lidských buněk důležité pro replikaci viru hepatitidy C in vivo a in vitro: staré tvrzení a aktuální důkazy. Virol J. 2011 11. července; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

Studie PCR pro hepatitidu C: typy, indikace, přepis

Virová hepatitida C je vážné onemocnění, které se objevuje při poškození jater. U osmdesáti procent pacientů přechází do chronické formy. Vírus se množí v jaterních buňkách - hepatocytech - a způsobuje jejich smrt. Mrtvé tkáně jsou nahrazeny ložisky pojivové tkáně, fibróza se vyvíjí.

S rozvojem fibrózy jater, je schopen plnit svou funkci, začíná cirhóza, což je nebezpečné pro jeho komplikací: zvyšující se tlak v portální žíle, gastrointestinální krvácení, poruchy srážlivosti krve, mentální změny kvůli poškození mozku jádra toxických produktů.

Příčinou onemocnění je infekce virem z rodiny Flaviviridae, což je typ viru RNA. To znamená, že genetický materiál, kterým jsou syntetizovány proteiny patogenu, je kódován molekulou ribonukleové kyseliny. Infekce nastává skrze krev, sexuálně a od těhotné ženy až po plod. Bohužel mezi infekcí a počátkem produkce protilátek může proběhnout poměrně velká doba - od dvou týdnů do šesti měsíců. To neumožňuje stanovení infekce metodou enzymového imunoanalýzy a zahájením léčby v časných stádiích.

Co je analýza PCR?

PCR je metoda molekulární analýzy, která umožňuje detekci genetického materiálu patogenu již v prvním týdnu po infekci za použití polymerázové řetězové reakce. Studie má vysokou specificitu, přesnost a umožňuje nejen stanovit přítomnost nebo nepřítomnost viru, ale i jeho koncentraci a genotyp.

Pro studii si vezměte pacientovu krev, v níž se může potenciálně nalézt RNA viru. Krev se přidá primerů - uměle syntetizované krátké délce části požadovaného genu a RNA polymerázu - speciální enzym, který násobí množství genetického materiálu patogenu. Pomocí speciálního přístroje se provádí několik cyklů vytápění a chlazení. Materiál je pak analyzován a porovnán se známými virovými geny, na základě kterých se dospěje k závěru o přítomnosti nebo nepřítomnosti infekce.

Typy PCR analýzy pro hepatitidu C

Existují tři typy analýzy PCR:

  1. Kvalitativní analýza PCR. První fáze studie. Umožňuje vám identifikovat genetický materiál viru v krvi.

  • Kvantitativní analýza PCR. Umožňuje určení virové zátěže - koncentrace genetického materiálu patogenu v jednom mililitru krve. Tato studie se provádí před zahájením léčby a poté v první, čtvrté, dvanácté a (pokud je kurz dlouhý) ve dvacátém čtvrtém týdnu léčby, aby se vyhodnotila jeho účinnost.

  • Genotypizace. Příčinný faktor hepatitidy C se často a rychle mění. Na planetě bylo nalezeno sedm variant genotypu tohoto viru. V Rusku jsou společné první, druhé a třetí typy. Každý z genotypů má jinou rezistenci k terapii, například účinnost léčby prvního typu je šedesát procent a pro druhý a třetí dosahuje osmdesát pět. Proto, aby bylo možné vybrat vhodná léčiva a předepsat dostatečnou dobu trvání léčby, je nutné přesně určit, jaký typ viru je pacient infikován.
  • Indikace pro analýzu PCR pro hepatitidu C

    Studie PCR je předepsána v následujících případech:

    • kontakt s nemocnou, která by mohla vést k infekci;
    • pozitivní imunoanalýza spojená s enzymem;
    • příznaky jaterní cirhózy: změny velikosti jater, zvětšení sleziny, výskyt podkožního žilního plexu na břiše;
    • výskyt příznaků poškození jater: bolesti na pravé straně břicha, zožnění kůže;
    • zvýšená aktivita ALT a AST v biochemické analýze krve;
    • před zahájením léčby k určení virové zátěže;
    • sledovat účinnost antivirové léčby;
    • po dokončení léčby k monitorování relapsu;
    • v přítomnosti diagnostikované hepatitidy B, aby se vyloučilo smíšené poškození jater.

    Dekódování studie PCR pro hepatitidu C

    Dekódování analýzy PCR a enzymového imunoanalýzy pro hepatitidu C by mělo být řešeno specialistou na hepatologii nebo na infekční nemoci. Analýza výsledků PCR je nezbytná v kombinaci s biochemickým vyšetřením krve, biopsií a ultrazvukem. Pouze kvalifikovaný lékař bude schopen analyzovat výsledky studií a na základě nich předepsat správnou léčbu.

    Dekódování kvalitativní analýzy.

    Genetický materiál patogenu byl nalezen v analyzovaném biologickém materiálu. Infekce je potvrzena.

    Neexistuje žádná infekce nebo množství RNA patogenu je pod hranicí citlivosti.

    Dekódování kvantitativní analýzy.

    Normální postava pro zdravé lidi. To znamená, že v testovaném materiálu není přítomna žádná RNA hepatitidy C nebo její koncentrace je pod prahem citlivosti studie.

    Koncentrace RNA je nižší než rozsah kvantifikace. Takové výsledky jsou interpretovány velmi opatrně, korelují je s údaji jiných studií, často provádějí druhou studii.

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za nízkou. Obvykle snížení množství viru znamená, že terapie je úspěšná.

    Více než 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Úroveň virové zátěže v dané koncentraci je považována za vysokou.

    Více než 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Množství RNA je nad horní hranicí rozsahu kvantifikace. Závěry o stupni virové zátěže s tímto výsledkem nejsou možné. Obvykle se v takových případech opakuje test s ředěním vzorku krve.

    Dekódování genotypizace.

    Byla detekována RNA specifického genotypu

    V biomateriálu je detekován virus hepatitidy C specifického genotypu a podtypu. Výsledek je kódován římskými číslicemi a latinkou, například - 1a, 2b. Existuje sedm genotypů a šedesát sedm podtypů, ale v Rusku existují pouze tři první typy.

    RNA virové hepatitidy C byla detekována

    V krvi se RNA nachází v Rusku vzácným genotypem, který nelze přičíst prvnímu, druhému nebo třetímu typu. Je zapotřebí více výzkumu.

    Tento výsledek naznačuje, že pacient je zdravý, nebo že úroveň RNA patogenu je příliš malá.

    Situace je možná, pokud je analýza PCR pro hepatitidu C negativní a enzymový imunotest detekuje protilátky proti viru. To znamená, že pacient měl v akutní formě hepatitidu C a uzdravil se. Přibližně dvacet případů infekce vede k spontánnímu vyléčení, pokud tělo pacienta vykazuje dostatečnou odolnost proti infekci.

    Navzdory skutečnosti, že PCR je velmi přesná analýza, její výsledky mohou být zkresleny v následujících situacích:

    • krev byla transportována do laboratoře za nevhodných podmínek, teplotní režim byl porušen;
    • byl vzorek biomateriálu kontaminován;
    • v krvi byly zbytky stop heparinu a dalších antikoagulancií;
    • Ve zkoumané látce byly inhibitory - látky, které zpomalují nebo zastavují polymerázovou řetězovou reakci.

    Výhody PCR v porovnání s jinými metodami

    1. Diagnóza v počátečních fázích. PCR detekuje genetický materiál vyvolávajícího onemocnění. Pomocí analýzy imunofluorescence lze stanovit pouze imunoglobuliny - látky, které organismus produkuje v reakci na infekci. V případě infekce způsobené hepatitidou C může být interval mezi infekcí a nástupem imunitní odpovědi několik týdnů a měsíců, kdy bude ELISA neúčinná. PCR poskytne odpověď už v prvním týdnu po infekci.

  • Nízká pravděpodobnost chyby. Ve studovaném materiálu se určuje genetický materiál, který je charakteristický pouze pro jeden typ patogenů. To vám umožňuje vyloučit falešné výsledky. Při ELISA jsou možné chyby, protože stejný druh protilátek lze uvolnit proti různým virům - takové protilátky se nazývají zkřížené reakce.

  • Vysoká citlivost. PCR může detekovat RNA patogenu i v minimálních množstvích. To umožňuje identifikovat skryté infekce.
  • Jak se připravit na dodávku krve pro výzkum PCR

    Pro analýzu PCR se pro hepatitidu C sbírá venózní krev. Obvykle se z pacientovy žíly najednou odeberou dvě části krve: první se odešle pro PCR a druhá pro ELISA. To se provádí, aby bylo možné přesněji posoudit, jak špatně je pacient infikován tímto virem a jak proti němu bojuje imunita.

    Obvykle jsou pro pacienta vyžadována následující pravidla:

    • vyšetření krve se odebere ráno;
    • přestávka mezi posledním jídlem a dodávkou krve by měla být osm až deset hodin;
    • dva nebo tři dny před analýzou se musíte vzdát smažených a mastných potravin a alkoholu;
    • po dobu čtyřiadvaceti hodin před analýzou by se pacient měl vyhnout fyzické námaze: nemají váhy, nechodí do tělocvičny nebo do bazénu.

    Související Články Hepatitida